Hormonelle und gentoxische Wirkung ausgewählter Phyto- und Xenoöstrogene:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Osnabrück
<<Der>> Andere Verl.
2002
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Würzburg, Univ., Diss., 2002 |
| Beschreibung: | 208 S. Ill., graph. Darst. |
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Inhaltsverzeichnis
I. Einleitung 6
II. Kenntnisstand 12
2.1 Einleitung 2
2.1.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 12
2.1.2 Gentoxisches Potential 15
2.2 Isoflavone 16
2.3 Resveratrol 21
2.4 Anthocyane 24
2.5 Bisphenol A 27
2.6 Weitere Xeno- und Phytoöstrogene 30
III. Aufgabenstellung 33
IV. Ergebnisteil 36
4.1 Einleitung 36
4.1.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 36
4.1.1.1 Etablierung der in vitro Testsysteme 37
4.1.1.1.1 Affinität zum Östrogenrezeptor a 37
4.1.1.1.2 Transkriptionsaktivität 39
4.1.1.1.3 Untersuchungen zur Zellproliferation 45
4.1.1.1.3.1 E-SCREEN 46
4.1.1.1.3.2 Kernteilungs-Assay 51
4.1.1.1.3.3 Bestimmung der Replikationsrate 52
4.1.1.1.4 Vitalitätsfärbung 54
4.1.2 Gentoxische Untersuchungen 54
4.1.2.1 Humane Brustkarzinomzellinien 54
4.1.2.2 Humane ovariale Karzinomzellinie 56
4.2 Isoflavone und Oaidzein - Metabolite 57
4.2.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 57
4.2.1.1 Affinität zum Östrogenrezeptor cc 57
4.2.1.2 Transkriptionsaktivität 59
4.2.1.3 Zellproliferation 63
4.2.1.3.1 E-SCREEN 63
Humane Brustkarzinomzellinie 63
Humane ovariale Karzinomzellinie 70
4.2.1.3.2 Kernteilungs-Assay 74
4.2.1.33 Replikationsrate 75
4.2.2 Gentoxisches Potential 77
4.2.2.1 Mikrokerntest in Maus Lymphoma Zellen L5178Y 77
4.2.2.2 Mikrokerntest in humanen Brustkarzinomzellen 79
4.2.2.3 Vitalitätsfärbung 81
3 Inhaltsverzeichnis 4.3 Sojakapselpräparat Alsiroyal® 82
4.3.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 82
4.3.1.1 Rezeptor-Bindungs-Studie 82
4.3.1.2 Transkriptionsaktivität 83
4.3.1.3 Zellproliferation 85
4.3.1.3.1 E-SCREEN 85
Humane Brustkarzinomzellinie 85
Humane ovariale Karzinomzellinie 89
4.3.2 Untersuchungen zur Gentoxizität 91
4.3.3 Analytische Untersuchung zur Zusammensetzung 92
4.4 Resveratrol 93
4.4.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 93
4.4.1.1 Rezeptor-Bindungs-Studie 93
4.4.1.2 Untersuchungen zur Zellproliferation 94
4.4.1.2.1 Replikationsstudie 94
4.4.1.2.2 Kernteilungs-Assay 95
4.4.1.2.3 Zellproliferation 96
4.4.2 Untersuchungen zum gentoxischen Potential 97
4.4.2.1 Cytotoxizitätstest 97
4.4.2.2 Zellzyklusanalysen 98
4.4.2.3 Mikrokemtest in Maus Lymphoma Zellen L5178Y 100
4.4.2.4 Mikrokemtest in humanen Brustkarzinomzellen 101
4.5 Antbocyane 103
4.5.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 103
4.5.1.1 Rezeptor-Bindungs-Studie 103
4.5.1.2 Transkriptionsaktivität 104
4.5.1.3 Zellproliferation 106
4.5.1.3.1 E-SCREEN 106
Humane Brustkarzinomzellinien 106
Humane ovanale Karzinomzellinien 1 10
4.6 Bisphenol A 114
4.6.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 114
4.6.1.1 Rezeptor-Bindungs-Studie 114
4.6.1.2 Transkriptionsaktivität 115
4.6.1.3 Zellproliferation 117
4.6.1.3.1 E-SCREEN 117
Humane Brustkarzinomzellinien 117
Humane ovariale Karzinomzellinien 119
4.6.1.3.2 Kernteilungs-Assay 122
4.6.1.3.3 Bestimmung der Replikationsrate 123
4.6.2 Bestimmung des gentoxischen Potentials 123
4.6.2.1 Mikrokemtest in Mauslymphomzellen L5178Y 123
4.6.2.2 Mikrokemtest in humanen Brustkarzinomzellinien 124
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4.7 Aurin 126
4.7.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 126
4.7.1.1 Rezeptor-Bindungs-Studie 126
4.7.1.2 Transkriptionsaktivität 127
4.7.1.3 Zellproliferation 127
E-SCREEN 128
4.8 Fluorescelndiacetat 129
4.8.1 Zellproliferation 129
E-SCREEN 129
4.9 Stilbenderivate (Dlethylstilböjtrol, Heiöstrol) 130
4.9.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 131
4.9.1.1 Rezeptor-Bindungs-Studie 131
4.9.1.2 Transkriptionsaktivität 132
4.9.1.3 Zellproliferation 132
E-SCREEN 132
4.10 Galangin 134
4.10.1 Bestimmung des östrogenen Potentials 134
4.10.1.1 Rezeptor-Bindungs-Studie 134
4.10.1.2 Zellproliferation 135
E-SCREEN 135
V. Diskussion 137
5.1 Testjyjteme 137
5.2 Isoflavone 139
östrogene Wirkung 139
Gentoxizitat 146
5.3 Sojakapselpräparat Alslroyal* 151
5.4 Resveratrol 154
5.5 Anthocyane 159
5.6 Bisphenol A 163
5.7 Aurin 166
5.8 Fluoresceindiacetat 167
5.9 Diethylstilböstrol und Hexöstrol 168
5.10 Galangin 169
5.11 Struktur-Wirkungs-Modell 170
VI. Zusammenfassung 173
_5 Inhaltsverzeichnis VII. Experimentalteil 177
7.1 Chemikalien und Verbrauchsmaterial 177
7.2 Arbeitsgeräte 178
7.3 Biochemische Methoden 179
7.3.1 Bestimmung der Affinität zum Östrogenrezeptor a 179
7.3.2 Transkriptionsaktivität 180
7.3.3 Isolierung von Kernproteinen 181
7.3.4 Plasmidvervielfältigung und -reinigung 182
7.4 Zellwachstum 183
7.4.1 Zellkultur 183
7.4.1.1 Humane Brustkarzinomzellinie MCF-7 183
7.4.1.2 Humane Brustkarzinomzellinie MDA-MB-231 184
7.4.1.3 Humane ovariale Karzinomzellinie BG-1 184
7.4.1.4 Humane ovariale Karzinomzellinie UCI107 185
7.4.1.5 Maus Lymphom Zellinie L5178Y tk+/ 186
7.5 Vitalitätstest 187
7.6 Bestimmung der Replikationsrate durch Einbau von [3H]-Tbymidin 188
7.7 Kernteilungs-Assay 189
7.8 Zellzyklusanalyse 190
7.8.1 Zellzyklusanalyse in Maus Lymphom Zellen L5178Y 190
7.9 Gentoxizitätstest 191
7.9.1 In vitro Mikrokerntest in humanen Brustkarzinomzellinien 191
7.9.2 In vitro Mikrokerntest in Maus Lymphom Zellen L5178Y
191
7.9.3 Indirekte Immunfluoreszenzfärbung-Nachweis von
Kinetochorproteinen 192
7.9.4 Immunfluoreszenzfärbung des Tubulingerüstes 192
7.10 Analytische Methoden 194
7.10.1 Analyse der Sojakapsel Alsiroyal 194
7.10.1.1 Analyse mit Hochdruckdurchflusschromatographie 194
7.10.2 Aufreinigung und NMR-Charakterisierung 195
7.11 Struktur-Wirkungs-Beziehungen (Q)SAR 195
7.12 Statistische Auswertung 195
VIII. Literaturverzeichnis 196
IX. Anhang 209
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