Untersuchungen einer humoralen und zellulären Immunreaktivität gegen Hitzeschockprotein 70 bei Patienten mit Innenohrschwerhörigkeiten:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2002
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1
DEFINITION
SCHWERHOERIGKEIT
1
1.2
AUTOIMMUNE,
PROGREDIENTE,
DEGENERATIVE,
MEIST
IN
SCHUEBEN
1
VERLAUFENDE,
SENSORINEURALE
SCHWERHOERIGKEIT
(APDSNSH)
1.3
GRUNDLAGEN
DER
IMMUNOLOGIE
UND
AUTOINUNUNOLOGIE
3
1.4
DIE
AUTOIMMUNE,
PROGREDIENTE,
DEGENERATIVE,
MEIST
IN
SCHUEBEN
5
VERLAUFENDE
SENSORINEURALE
SCHWERHOERIGKEIT
ALS
ORGANUNSPEZIFISCHE
ERKRANKUNG
1.5
AUTOIMMUNBEDINGTE
SCHWERHOERIGKEITEN
6
1.6
HITZESCHOCKPROTEINE
8
1.6.1
STRESSANTWORT
UND
HITZESCHOCK-PROTEINE
8
1.6.2
HSP
UND
IMMUNANTWORT
10
1.6.3
HSP
ALS
ANTIGEN
BEI
INFEKTIONEN
10
1.7
INTENTION
DER
ARBEIT
12
2.
MATERIAL
13
2.1
GERAETE
UND
LABORGEGENSTAENDE
13
2.2
AUFLISTUNG
DER
VERWENDETEN
ANTIKOERPER
14
2.2.1
UNKOJUNGIERTE
ANTIKOEPER
14
2.2.2
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
GEGEN
HITZESCHOCK-PROTEINE
14
2.2.3
KONJUGIERTE
ANTIKOERPER
14
2.2.4
SEKUNDAER-AK
UND
KONJUGATE
15
2.3
BIOCHEMIKALIEN
15
2.4
ZELLKULTURMATERIALIEN
16
2.5
RADIOCHEMIKALIEN
17
2.6
SOFTWARE
17
2.7
SONSTIGES
17
2.8
VERWENDETE
BIOMATERIALIEN
18
2.8.1
SERUM
UND
PERIPHERE
BLUTLYMPHOZYTEN
18
2.8.2
HUMANE
TUMORZELLLINIE
18
2.9.
VERWENDETE
HITZESCHOCKPROTEINE
18
2.10
PUFFER
UND
LOESUNGEN
18
2.10.1
LAGERUNGSPUFFER
19
2.10.2
SDS
GELEKEKTROPHORESE-PUFFER
19
2.10.3
IMRNUNOBLOT-PUFFER
22
2.11
ZELLKULTURMEDIEN
24
3
METHODEN
25
3.1
PATIENTENGUT
25
3.1.1
APDSNSH
25
3.1.2
M.MENIDRE
26
3.1.3
KLASSISCHER
HOERSTURZ
26
3.1.4
OTOSKLEROSE
26
3.1.5
KONTROLLPERSONEN
27
3.1.6
PATIENTEN
MIT
EINEM
COGAN
SYNDROM
27
3.1.7
POSITIVE
KONTROLLPERSONEN
27
3.2
GEWINNUNG
DER
INNENOHRPROTEINE
AUS
FELSENBEINEN
27
3.3
BIOCHEMISCHE
METHODEN
28
3.3.1
EXTRAKTION
DER
INNENOHRPROTEINE
UND
SDS
GEL
28
ELEKTROPHORESE
3.3.2
INUNUNOBLOT
29
3.3.3
BLOCKIERUNGSVERSUCHE
GEGEN
HITZESCHOCKPROTEIN
70
30
3.3.4
BLOCKIERUNG
VON
UNSPEZIFISCHEN
BINDUNGEN
MIT
DER
30
SEPHAROSE
A
3.4 ZELLULAERE
METHODEN
31
3.4.1
KULTIVIERUNG
DER
ZELLEN
31
3.4.2
ISOLATION
HUMANER
PERIPHERER
BLUTLYMPHOZYTEN
31
3.4.3
EINFRIEREN
VON
ISOLIERTEN
BLUTLYMPHOZYTEN
32
3.4.4
AUFTAUEN
VON
ISOLIERTEN
PERIPHEREN
BLUTLYMPHOZYTEN
32
3.4.5
VORBEREITUNG
DER
TARGETZELLEN
FUER
DIE
CML
32
3.4.6
ZYTOTOXIZITAETS-MESSUNG
MIT
DEM
CR-51
FREISETZUNGSTEST
33
3.4.7
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSEN
34
3.5
STATISTIK
35
4
ERGEBNISSE
36
4.1
ANALYSE
DER
HUMORALEN
IMMUNREAKTIVITAET
36
4.1.1
ANALYSE
DER
HUMORALEN
IMMUNANTWORT
GEGEN
BOVINES
36
INNENOHRPROTEIN
4.1.2
SERUMKONZENTRATIONSUNTERSUCHUNGEN
MIT
DEM
BOVINEN
40
70
KDA-INNENOHRPROTEIN
4.1.3
NACHWEIS
DER
70
KDA-PROTEIN-BANDE
IN
DER
HUMANEN
41
INNENOHRPELLETFRAKTION
4.1.4
ABBLOCKEN
MIT
SEPHAROSE
A
43
4.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
70
KDA-INNENOHRPROTEIN
UND
43
HITZESCHOCKPROTEIN
70
(HSP70)
4.2.1
NACHWEIS
EINER
HUMORALEN
IMMUMEAKTIVITAET
GEGENUEBER
43
BOVINEM
SOWIE
HUMANEM
HSP
70
4.2.2
ANTIKOERPERBLOCKIERUNGSUNTERSUCHUNG
44
4.2.3
MESSUNG
DER
LYTISCHEN
AKTIVITAET
VON
PATIENTEN
PBL
MIT
45
EINER
APDSNSH
GEGENUEBER
HSP70
EXPREMIERENDEN
ZELLEN
4.2.3.1
UNTERSUCHUNG
DER
LYSERATE
AM
TAG
NULL
48
4.2.3.2
UNTERSUCHUNG
DER
LYSERATE
AM
TAG
SIEBEN
48
4.3
ANALYSE
DER
LYMPHOZYTENVERTEILUNG
51
4.3.1
VERGLEICH
DER
BEOBACHTUNGSGRUPPE
MIT
DER
KONTROLLGRUPPE
51
AM
TAG
NULL
4.3.1.1
BESTIMMUNG
DES
ANTEILS
AN
T-ZELLEN
(CD3)
53
4.3.1.2
BESTIMMUNG
DES
ANTEILS
AN
T-HELFER-ZELLEN
(CD4)
54
4.3.1.3
BESTIMMUNG
DES
ANTEILS
AN
ZYTOTOXISCHEN
55
T-ZELLEN
(CD
4.3.1.4
BERECHNUNG
DES
VERHAELTNISSES
VON
CD4
ZU
56
CD8
ZELLEN
4.3.4.5
BESTIMMUNG
DES
ANTEILS
AN
NATUERLICHEN
KILLER
57
ZELLEN
(CD3
NEG./CD16
/
CD56)
4.3.4.6
BESTIMUNG
DES
ANTEILS
AN
B-LYMPHOZYTEN
(CD19)
58
4.3.4.7
BESTIMMUNG
DES
ANTEILS
AN
Y/6
T-ZELLEN
59
4.3.2
ANALYSE
DER
LYMPHOZYTENSUBPOPULATIONEN
DER
PATIENTEN,
60
DIE
EINE
ERHOEHTE
LYTISCHE
AKTIVITAET
GEGEN
HSP70
EXPREMIERENDEN
ZELLEN
AM
TAG
0
ZEIGTEN
4.3.3
ANALYSE
DER
LYMPHOZYTENSUBPOPULATIONEN
DER
PATIENTEN,
63
DIE
EINE
ERHOEHTE
LYTISCHE
AKTIVITAET
GEGEN
HSP70
EXPREMIERENDEN
ZELLEN
AM TAG
7
ZEIGTEN
4.3.3.1
ANALYSE
DER
LYMPHOZYTENSUBPOPULATIONE
OHNE
65
IL-2-STIMULATION
4.3.3.2
ANALYSE
DER
LYMPHOZYTENSUBPOPULATIONEN
NACH
68
7
TAGEN
IL-2-STIMULATION
4.3.4
VERGLEICH
DER
PBL
DER
PATIENTEN,
DIE
EINE
ERHOEHTE
LYTISCHE
71
AKTIVITAET
AM
TAG
7
NACH
IL-2-STIMULATION
UND
/
ODER
AM
TAG
0
GEGENUEBER
DER
KONTROLLGRUPPE
ZEIGTEN
4.3.5
VERGLEICH
DER
PBL
DER
PATIENTEN,
DIE
EINE
ERHOEHTE
LYTISCHE
75
AKTIVITAET
AM
TAG
7
NACH
IL-2-STIMULATION
UND
AM
TAG
0
GEGENUEBER
DER
KONTROLLGRUPPE
ZEIGTEN
5.
DISKUSSION
77
5.1
EIN
70
KDA-PROTEIN
IN
DER
BOVINEN
UND
HUMANEN
INNEN-
78
OHRPROTEINFRAKTION
5.2
UNTERSUCHUNG
VON
HSP70
ALS
IMMUNOGENE
DETERMINANTE
83
5.2.1
HUMORALE
IMMUNREAKTIVITAET
GEGEN
DAS
HSP70
83
5.2.2
ZELLULAERE
IMMUNREAKTIVITAET
GEGEN
DAS
HSP70
85
5.3
EINE
DYSBALANCE
IN
DER
IMMUNABWEHR
UND
DIE
ERHOEHTE
AKTIVITAET
91
VON
Y/8-T-ZELLEN
6.
ZUSAMMENFASSUNG
95
7.
LITERATURVERZEICHNIS
98
8.
DANKSAGUNG
116
9.
EIGENE
PUBLIKATIONEN
117
10.
LEBNSLAUF
119 |
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