Formen des Pankreatitis-assoziierten Proteins (PAP) im Serum bei akuter und chronischer Pankreatitis sowie Mukoviszidose:
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2001
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4
INHALT
SEITE
1. EINLEITUNG 6
1.1. PHYSIOLOGIE DES PANKREAS 6
1.1.1. EXOKRINE FUNKTION 6
1.1.2. ENDOKRINE FUNKTION 6
1.2. PATHOPHYSIOLOGIE 6
1.2.1. DIE AKUTE PANKREATITIS 6
1.2.2. DIE CHRONISCHE PANKREATITIS 9
1.2.3. MUKOVISZIDOSE (CYSTISCHE FIBROSE, CF) 10
1.2.4. DIE AKUTPHASEREAKTION DES PANKREAS 14
1.2.5. VORKOMMEN UND CHARAKTERISIERUNG DES PANKREATITIS- ASSOZIIERTEN
PROTEINS 15
1.3. FRAGESTELLUNG DER ARBEIT
RR. 18
2. MATERIAL UND METHODEN 19
2.1. PATIENTEN 19
2.1.1. PATIENTEN MIT PANKREATITIS 19
2.1.2. PATIENTEN MIT MUKOVISZIDOSE 20
2.2. PROBENGEWINNUNG UND -LAGERUNG 21
2.3. MESSUNG DES PAP 22
2.3.1. KOMPETITIVER ASSAY 22
2.3.2. PANCREPAP- ASSAY 23
2.4. FLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE (FPLC) 24
2.4.1. GELAUSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE 25
2.4.2. LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE 26
2.5. AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE 27
2.6. UMSALZEN UND LYOPHILISIEREN 27
2.7. ELEKTROPHORETISCHE AUFTRENNUNG DER PROTEINE 27
2.8. FAERBUNG DER GELE 29
2.8.1. COOMASSIE-FAERBUNG 29
2.8.2. SILBERFAERBUNG 29
2.9. ISOELEKTRISCHE FOKUSSIERUNG VON SERUMPROTEINEN 30
2.10. DETEKTION DES PAP IM WESTEMBLOT 31
2.11. UEBERSICHTEN ZUR PROBENVERARBEITUNG 33
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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5
3.
ERGEBNISSE 35
3.1. UNTERSUCHUNG DER SERUMPROBEN DER PATIENTEN MIT AKUTER PANKREATITIS
UND MUKOVISZIDOSE 35
3.1.1. MESSUNG DER PAP-KONZENTRATION IM SERUM 35
3.1.2. TRENNUNG DER SERUMPROBEN PER GELAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE 36
3.1.3. DETEKTION DES PAP IN DEN ELUATEN 37
3.2. WEITERE UNTERSUCHUNG DER ELUATE NACH SERUMTRENNUNG UEBER DIE
SUPERDEXSAEULE 44
4. DISKUSSION 49
4.1. SICHERUNG DER DIAGNOSE PANKREATITIS UND BESTIMMMUNG DES
SCHWEREGRADES 49
4.2. TRENNUNGSMETHODEN UND PROBLEME DER REINIGUNG 50
4.3. VERSCHIEDENE DETEKTIERTE PROTEINFORMEN 51
4.3.1. IDENTIFIKATION DES PAP 51
4.3.2. AKUTPHASEPROTEINE IM SERUM 52
4.3.3. SERUMEIWEISSE BEI MUKOVISZIDOSE 53
4.4. LEKTINEIGENSCHAFTEN DES PAP 54 -
5. ANHANG 57
VERZEICHNIS DER VERWENDETEN ABKUERZUNGEN
SEQUENZ DES PANKREATITIS- ASSOZIIERTEN PROTEINS
6. ZUSAMMENFASSUNG DER ARBEIT 59
7. LITERATUR 62
8. ANLAGEN 73
DANKSAGUNG
ERKLAERUNG UEBER DIE EIGENSTAENDIGE ABFASSUNG
LEBENSLAUF |
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