Streptokokken in der Interaktion mit eukaryoten Strukturen: Identifizierung genetischer Determinanten
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1999
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INHALTSVERZEICHNIS
I EINLEITUNG ML
LI MIKROBIELLE PATHOGENITAET 1
1.2 MULTIPLE STREPTOKOKKEN-ADHAESINE 1-2
1.3 BEDEUTUNG VON S.
PNEUMONIAE ALS INFEKTIONSERREGER 2-3
1.4 ADHAERENZFAKTOREN VON
S. PNEUMONIAE 3-4
1.5 BEKANNTE VIRULENZFAKTOREN VON
S. PNEUMONIAE 4-5
1.6 BEDEUTUNG VON
S. AGALACTIAE ALS INFEKTIONSERREGER 5-6
1.7 ADHAERENZFAKTOREN VON
S. AGALACTIAE 6-7
1.8 BEKANNTE VIRULENZFAKTOREN VON
S. AGALACTIAE 7-10
1.9 GENETISCHE MUTAGENESE VON
S. AGALACTIAE 10-11
ZIELSETZUNG 12
II MATERIAL UND METHODEN 13-28
IL1 BAKTERIENSTAEMME UND WACHSTUMSBEDINGUNGEN 13-15
IL2 MOLEKULARBIOLOGISCHE TECHNIKEN 15-16
IL3 LAMBDA PHAGEN TECHNIKEN 16
D.4 KONSTRUKTION DER
S. PNEUMONIAE MUTANTEN 16-17
H.5 AMPLIFIKATION DER GENE OBERFLAECHEN-ASSOZIIERTER
S. AGALACTIAE
PROTEINE 18
11.6 KONSTRUKTION DER
S. AGALACTIAE MUTANTEN 18-20
11.7 AMPLIFIZIERUG DER CY/-GENE NICHT-HAEMOLYSIERENDER 20
S.
AGALACTIAE WILDTYPSTAEMME
IL8 RNA-PRAEPARATIONEN UND ANALYSE 21-22
IL9 EXPRESSION DES LMB-PROTEINS IN
E. COLI 22-23
ILIO BESTIMMUNG DER SUBZELLULAEREN LOKALISATION DES 23
LMB-PROTEINS
11.11 HAEMAGGLUTINATION DURCH STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE 24
11.12 ENDOTHELZELL- UND LUNGENEPITHELZELLKULTUREN 24
11.13 ADHAERENZUNTERSUCHUNGEN VON
S. PNEUMONIAE 25
11.14 MESSUNG DER WASSERSTOFFPEROXID-PRODUKTION 25
11.15 ADHAERENZUNTERSUCHUNGEN VON S.
AGALACTIAE 26
11.16 BESTIMMUNG DER HAEMOLYTISCHEN AKTIVITAET
BAKTERIELLER STREPTOCOCCUS AGALACTIAE EXTRAKTE 27
11.17 BESTIMMUNG DER ZELLULAEREN FETTSAEUREPROFILE 27
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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II. 18 VIRULENZUNTERSUCHUNGEN IM TIERMODELL 27-28
ERGEBNISSE 29-66
IH.1 MUTAGENESE UND IDENTIFIZIERUNG OBERFLAECHEN
ASSOZIIERTER PROTEINE VON
S. PNEUMONIAE 29
HL2 IDENTIFIZIERUNG EINER HAEMAGGLUTINATIONS-DEFIZIENTEN 29-30
MUTANTE
UEL3 VERMINDERTE ADHAERENZ AN EUKARYOTE ZELLEN 30
III. 4 ADHAERENZ AN SPEZIFISCHE GLYCOKONJUGATE 30-31
M.5 NUKLEOTIDSEQUENZANALYSE DER MUTANTE SPRU16 31-34
FFL.6 WACHSTUMSANFORDERUNGEN IN ABHAENGIGKEIT VON 34-35
SPXB UND ACETYLPHOSPHAT
IIL7 EINFLUSS VON SPXB AUF DIE H
2
O
2
PRODUKTION 35-36
IIL8 PHAENOTYPISCHE KOMPLEMENTIERUNG DER SPXB-MUTANTEN 36
DURCH EXOGENES ACETAT
IIL9 SUBZELLULAERE LOKALISATION DES SPXB-PHOA 36
FUSIONSPROTEINS
111.10 SPXB ALS VIRULENZDETERMINANTE 37-38
111.11 IDENTIFIZIERUNG DES
IMB-GENS 39
111.12 NUKLEOTID- UND PROTEINSEQUENZ ANALYSE 39-42
IH.13 EXPRESSION DES
IMB-GENS IN VERSCHIEDENEN 43
S.
AGALACTIAE SEROTYPEN
111.14 TRANSKRIPTIONSANALYSE DES
IMB LOCUS 44
111.15 SUBZELLULAERE LOKALISATION DES LMB-PROTEINS 45-46
111.16 KONSTRUKTION VON
IMB-MUTANTEN MITTELS 46-47
INSERTIONS-DUPLIKATIONS-MUTAGENESE
111.17 WACHSTUM DER S. AGALACTIAE WILDTYP- UND 47
MUTANTEN-STAEMME UNTER MANGANSUBSTITUTION
111.18 ADHAERENZ AN EXTRAZELLULAERE MATRIXPROTEINE 47-48
111.19 EINFLUSS DES REKOMBINANTEN LMB-PROTEINS AUF DIE 48-49
ADHAERENZ DES WILDTYPSTAMMES
111.20 EINFLUSS DER MANGANKONZENTRATION AUF DIE 49-50
ADHAERENZEIGENSCHAFTEN
111.21 BINDUNG DES REKOMBINANTEN LMB-PROTEINS AN 50
IMMOBILISIERTES LAMININ
TTI-22 KONSTRUKTION DES S. AGALACTIAE MUTANTENPOOLS 51
111.23 IDENTIFIZIERUNG DES
CYL -OPERON 51
111.24 NUKLEOTID- UND PROTEINSEQUENZANALYSE DES
CYL -OPERON 51-59
III.25 ANALYSE DER ISS 2 INSERTIONSSTELLEN 59
III-26 GEZIELTE KONSTRUKTION VON
CYL- MUTANTEN 59-60
III.27 TRANSKRIPTIONSANALYSE 60-61
IIL28 KOMPLEMENTIERUNGSUNTERSUCHUNGEN 63
III-29 ANALYSE NICHT-HAEMOLYSIERENDER WILDTYPSTAEMME 63-64
111.30 HAEMOLYSINEXTRAKTE 64
111.31 ASSOZIATION DER HAEMOLYSIN-UND PIGMENT-PRODUKTION 64
111.32 ANALYSE DER ZELLULAEREN FETTSAEUREN 66
IV DISKUSSION 67-79
IV.L EINFLUSS DER PYRUVATOXIDASE AUF DIE ADHAERENZ VON 67-68
S. PNEUMONIAE
IV.2 STRUKTURANALYSE DER PYRUVATOXIDASE 68-69
IV.3 BEDEUTUNG VON SPXB FUER DIE VIRULENZ VON 69-72
STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE
IV.4 LMB VERMITTELT DIE ADHAERENZ VON S. AGALACTIAE 72-73
AN HUMANES LAMININ
IV.5 DER ADHAESIONSVERLUST DER LMB MUTANTEN IST 74
NICHT SUPPLEMENTIERBAR
IV.6 LMB ALS IMPFSTOFFKANDIDAT 75
IV.7 GENERIERUNG EINES
S. AGALACTIAE-MUTANTENPOOLS 75-76
IV.8 BETEILIGUNG DER CYL-GENE AN DER EXPRESSION DES 76-79
HAEMOLYTISCHEN PHAENOTYPS VON S. AGALACTIAE
V ZUSAMMENFASSUNG 80-81
VI LITERATURVERZEICHNIS 82-95
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 96
DANKSAGUNG |
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