Harnsäure hemmt die PAH-Aufnahme isolierter proximaler Tubuluszellen:
Gespeichert in:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINFUEHRUNG
1.1.
ZIELSETZUNG
_
1
2.
THEORETISCHE
GRUNDLAGEN
2.1.
MAKROSKOPISCHE
ANATOMIE
DER
NIERE
_
2
2.2.
MIKROSKOPISCHE ANATOMIE
DER
NIERE
_
3
23.
GEFAESSVERSORGUNG
DER
NIERE
_
4
2.4.
2.4.1.
2.4.2.
2.4.2.1.
2.42.2.
2.4.3.
2.4.3.1.
2.4.3.2.
2.4.4.
2.4.5.
2.4.6.
2.4.6.1.
2.4.62.
PHYSIOLOGIE
DER
NIERE
_
5
ALLGEMEINE
FUNKTION
DER
NIERE
_
5
AUSSCHEIDUNGSPROZESSE
IN
DER
NIERE
_
5
GLOMERULAERE
FILTRATION
_
5
TUBULAERE
TRANSPORTPROZESSE
_
6
ENTWICKLUNG
DES
ANIONENTRANSPORTMODELLS
_
7
SUBSTRATSPEZIFITAET
DES
ANIONENTRANSPORTES
_
8
DAS
KLASSISCHE
ANIONENTRANSPORTSYSTEM
_
9
INTRAZELLULAERE
VORGAENGE
_
11
LUMINALER
MECHANISMUS
_
11
URATTRANSPORT
_
12
URATREABSORPTION
_
12
URATSEKRETION
_
15
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
3.1.
VERGLEICH
VESCHIEDENER
METHODEN
ZUR
UNTERSUCHUNG
DES
ANIONENTRANSPORTS
IN
DER
NIERE
17
3.1.1.
3.1.1.1.
3.1.12.
3.1.2.
3.12.1.
3.12.2.
3.12.3.
3.12.4.
3.12.5.
3.12.6.
3.12.7.
3.12.8.
IN
VIVO
METHODEN
_
17
MIKROPUNKTIONSUNTERSUCHUNGEN
_
17
CLEARANCE-VERSUCHE
_
17
IN
VITRO
METHODEN
_
17
AKKUMULATION
ORGANISCHER
ANIONEN
IN
VITALEN
NIERENSCHEIBEN
_
17
VERSUCHE
AN
ISOLIERTEN
PERFIINDIERTEN
TUBULI
_
17
VERSUCHE
AN
ISOLIERTEN
NICHT
PERFUNDIERTEN
TUBULI
_
18
AUSSCHEIDUNGSVERSUCHE
AN
ISOLIERTEN
PERFUNDIERTEN
NIEREN
_
18
VERSUCHE
AN
ISOLIERTEN
PLASMAMEMBRANVESIKELN
_
18
VERSUCHE
AN
ZELLKULTUREN
_
18
UNTERSUCHUNGEN
AN
ISOLIERTEN
TUBULUSZELLEN
_
19
UNTERSUCHUNGEN
AN
KLONIERTEN
TRANPORTPROTEINEN
_
19
3.2.
BEMERKUNGEN
ZU
DEN
BENUTZTEN
METHODEN
_
_
19
33.
ISOLIERUNG
PROXIMALER
TUBULUSZELLEN
21
3.3.1.
ZUSAMMENSETZUNG
DER
LOESUNGEN
21
3.3.2.
VERSUCHSAUFBAU
22
3.3.3.
VORBEREITUNGEN
22
3.3.4.
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
23
3.3.4.I.
PRAEPARATION
DER
RATTE
23
3.3.4.2.
SITUS
DER
RATTE
24
3.3.4.3.
PERFIISION
DER
NIEREN
25
3.3.4.4.
ZENTRIFUGATION
DER
ZELLSUSPENSION
25
3.3.4.5.
ZAEHLEN
DER
ZELLEN
IN
EINER
NEUBAUERKAMMER
26
3.3.4.5.1
.
AUFBAU
EINER
NEUBAUERKAMMER
26
33.4.5.2.
VERDUENNUNG
DER
ZELLSUSPENSION
FUER
DEN
ZAEHLVORGANG
26
3.3.4.5.3.
BERECHNUNG
DER
ZELLZAHL
_
_
27
3.4.
PROTEINMENGENBESTIMMUNG
DER
TUBULUSZELLEN
NACH
BRADFORD
I0
28
3.4.1.
PRINZIP
DER
PROTEINMENGENBESTIMMUNG
NACH
BADFORD
28
3.4.2.
ZUSAMMENSETZUNG
DER
LOESUNGEN:
28
3.4.3.
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
28
3.4.4.
BERECHNUNG
DER
PROTEINMENGE
PRO
1
MIO.
ZELLEN
_
_
29
3.5.
BESTIMMUNG
DES
ZELLWASSERGEHALTS
PROXIMALER
TUBULUSZELLEN
29
3.5.1.
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
29
3.5.2.
BEMERKUNGEN
ZUR
MESSUNG
DER
RADIOAKTIVITAET
30
3.5.3.
FENSTEREINSTELLUNG
UND
ERMITTELN
DES
SPILLOVERS
FUER
DIE
WASSERGEHALTSBESTIMMUNG
30
3.5.4.
BERECHNUNG
DES
SPILLOVERS
_
_
31
3.6.
VERSUCHE
ZUR
'
H-PAH-AUFNAHME
PROXIMALER
TUBULUSZELLEN
32
3.6.1.
VERGLEICH
DER
AKKUMULATIONSFAKTOREN
BEI
INKUBATION
DER
ZELLEN
IN
INKUBATIONSPUFFER
UND
AMINOSAEURELOESUNG
32
3.6.1.1.
ZUSAMMENSETZUNG
DER
LOESUNGEN
32
3.6.I.2.
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
32
3.6.2.
'
H-PAH-AUFHAHME
BEI
ZUGABE
VON
UNMARKIERTEM
PAH
33
3.6.2.I.
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
33
3.6.3.
'
H-PAH-AUFHAHME
BEI
ZUGABE
VON
HARNSAEURE
34
3.6.3.1.
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
_
_
_
34
3.7.
BERECHNUNGEN
ZUR
PAH-AUFNAHME
34
3.7.1.
BERECHNUNG
DER
AKKUMULATIONSFAKTOREN
34
3.7.2.
BERECHNUNG
DER
SPEZIFISCHEN
'
H-PAH-AUFHAHME
34
3.7.3.
BERECHNUNG
DER
ABSOLUTEN
'
H-PAH-AUFHAHME
PRO
MIKROGRAMM
PROTEIN
_
_
35
3.8.
VERWENDETE
MATERIALIEN
35
3.8.1.
RADIONUKLIDE
35
3.8.2.
CHEMIEKALIENBEZUG
36
3.8.3.
VERSUCHSTIERAUSWAHL
_
_
36
3.9.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
37
3.9.1.
VARIANZANALYSE
37
3.9.2.
REGRESSIONSANALYSE
37
3.9.3.
UNVERBUNDENER
T-TEST
38
3.9.4.
VERBUNDENER
T-TEST
_
_
38
II
4,
ERGEBNISSE
4.1.
KOLLAGENASENVERGLEICH
_
39
4.1.1.
ZIEL
_
39
4.1.2.
VERSUCHSDURCHFUEHNING
_
39
4.1.3.
ERGEBNISSE
39
42.
EINFLUSS
DES
RATTENGEWICHTS
AUF
DIE
ANZAHL
ISOLIERTER
ZELLEN
_
42
4.2.1.
ZIEL
_
42
4.2.2.
ERGEBNISSE
42
43.
PROTEINMENGENBESTIMMUNG
DER
TUBULUSZELLEN
_
44
4.3.1.
ZIEL
_
44
4.3.2.
VERSUCHSDURCHFUEHNING
_
44
4.3.3.
ERGEBNISSE
44
4.4.
ERMITTLUNG
DES
SPILLOVERS
_
46
4.4.1.
ZIEL
_
46
4.4.2.
VERSUCHSDURCHFUEHNING
_
46
4.4.3.
ERGEBNISSE
_
46
4.4.4.
BERECHNEN
DES
SPILLOVERS
IN
PROZENT
47
4.5.
BESTIMMUNG
DES
WASSERANTEILS
DER
ZELLEN
_
49
4.5.1.
ZIEL
_
49
4.5.2.
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
_
49
4.5.3.
ERGEBNISSE
49
4.6.
PAH-VERSUCHE
_
51
4.6.1.
VERGLEICH
DER
'
H-PAH-AKKUMULATION
IN
INKUBATIONSPUFFER
BZW.
AMINOSAEURELOESUNG
ALS
NAEHRLOESUNG
_
51
4.6.1.1.
ZIEL
_
51
4.6.1.2.
VERSUCHSURCHFUEHRUNG
51
4.6.1.3.
ERGEBNISSE
_
51
4.6.2.
'
H-PAH-AKKUMULATION
UND
IHRE
HEMMUNG
DURCH
UNMARKIERTES
PAH
53
4.6.2.1.
ZIEL
_53
4.6.2.2.
VERSUCHDURCHFUEHRUNG
_
53
4.6.2.3.
ERGEBNISSE
_
53
4.6.3.
HEMMUNG
DER
ABSOLUTEN
'
H-PAH-AUFHAHME
PRO
MIKROGRAMM
PROTEINGEWICHT
DER
TUBULUSZELLEN
DURCH
UNMARKIERTES
PAH
_
56
4.6.3.
1
.
ZIEL
_
56
4.6.3.2.
BERECHNUNG
DER
'
H-PAH-AUFHAHME
PRO
MIKROGRAMM
PROTEINGEWICHT
_
56
4.6.3.3.
ERGEBNISSE
56
4.7.
EINFLUSS VON
HARNSAEURE
AUF
DIE
PAH-AUFNAHME
PROXIMALER
TUBULUSZELLEN
_
59
4.7.1.
HEMMUNG
DER
'
H-PAH-AKKUMULATION
DURCH
HARNSAEURE
_
59
4.7.1.1.
ZIEL
_
59
4.7.1.2.
VERSUCHSDURCHFUEHNING
_
59
4.7.1.3.
ERGEBNISSE
_
59
4.7.2.
HEMMUNG
DER
ABSOLUTEN
'
H-PAH-AUFHAHME
PRO
MIKROGRAMM
PROTEINGEWICHT
DER
PROXIMALEN
TUBULUSZELLEN
DURCH
HARNSAEURE
_
61
4.7.2.1
.
ZIEL
_
61
4.7.2.2.
BERECHNUNG
_
61
4.7.3.3.
ERGEBNISSE
61
III
5.
DISKUSSION
5.1.
ISOLIERUNG
PROXIMALER
TUBULUSZELLEN
64
5.2.
PROTEINMENGENBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
65
53.
BESTIMMEN
DES
INTRAZELLULAEREN
VOLUMENS
65
5.4.
NUTZBARKEIT
ISOLIERTER
TUBULUSZELLEN
FUER
DIE
UNTERSUCHUNG
VON
TRANSPORTPROZESSEN_
65
53.
'
H-PAH-AUFNAHME
66
5.6.
EINFLUSS
VON
HARNSAEURE
AUF
DIE
PAH-AUFNAHME
67
5.7.
AUSBLICK
68
6.
ZUSAMMENFASSUNG
69
7.
LITERATURVERZEICHNIS
70
8.
ANHANG
79
RV |
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