Die Regulation des Hepatocytenwachstumsfaktor-Rezeptors "c-met" in der menschlichen Schilddrüse:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2001
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Schlagworte: | |
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Beschreibung: | Düsseldorf, Univ., Diss., 2001 |
Beschreibung: | [5], 86 Bl. Ill., graph. Darst. : 30 cm |
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Datensatz im Suchindex
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INHALT
A EINLEITUNG 1
B MATERIAL UND METHODEN
6
B.I.1 HERKUNFT DER PRIMAERKULTUREN 6
B.I.2 HERSTELLUNG VON PRIMAERKULTUREN 6
B.I.3 HERKUNFT DER FOLLIKULAEREN SCHILDDRUESENKARZINOMZELLINIEN 7
B.I.4 STIMULATION DER PRIMAERKULTUREN UND
SCHILDDRUESENKARZINOMZELLINIEN 7
B.II.L IMMUNHISTOCHEMIE 9
B.II.L.A GEWEBEVORBEREITUNG 9
B.LL.L.B NACHWEIS DES HGF-REZEPTORS "C-MET" 9
B.II. 1 .C NACHWEIS VON CYTOKERATIN 18 10
B.II.2 IMMUNZYTOCHEMIE 10
B.II.2.A IMMUNZYTOCHEMISCHER NACHWEIS DES HGF-REZEPTORS "C-MET" 10
B.II.2.B IMMUNZYTOCHEMISCHER NACHWEIS VON CYTOKERATIN 18 10
B.III RNA-ISOLATION 11
B.III.L ISOLATION DER RNA AUS KULTUREN ADHAERENTER ZELLEN 11
B.III.2 QUALIFIKATION DER RNA 13
B.III.3 PRUEFUNG DER RNA-QUALITAET 13
B.III.3 .A BESTIMMUNG DER OPTISCHEN DICHTEVERHAELTNISSE 13
B.III.3.B DENATURIERENDE FORMAMIDGELELEKTROPHORESE 13
B.III.3.B.L ELEKTROPHORESEGERAET UND LAUFBEDINGUNGEN 13
B.III.3.B.2 VERWENDETE PUFFER 14
B.III.3.B.2.A FORMALDEHYD-LADUNGSPUFFER 14
B.III.3.B.2.B 10 X MOPS-LAUFPUFFER 14
B.III.3.B.2.C 1 X MOPS-LAUFPUFFER 14
B.III.3 ,B.2.D PREMIX PUFFER 15
B.III.4 ANSATZ DES GELTRAEGERS 15
B.III.4.A VORBEREITUNG DER GELKAMMER 15
B.III.4.B HERSTELLUNG DER GELTRAEGER 15
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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B.111.4 C VORBEREITUNG DER PROBEN 16
B.IV REVERSE TRANSKRIPTION 16
B.IV.L PROBENANSATZ 16
B.IV.2 ABLAUF DER CDNA SYNTHESE 16
B.V AMPLIFIKATION DER CDNA DURCH DIE POLYMERASEKETTEN-REAKTION 17
B .V.L PCR BEDINGUNGEN 17
B.V. 2 VERWENDETE OLIGONUCLEOTIDE 17
B. V. 3 ANSATZ ZUR POLYMERASEKETTEN-REAKTION 18
B.VI IDENTIFIKATION DES AMPLIFIKATIONS-PRODUKTES DER
HGF-REZEPTOR-OLIGONUCLEOTIDE DURCH
RESTRIKTIONSENDONUCLEASENVERDAU 18
B.VI.L VERWENDETE RESTRIKTIONSENDONUCLEASEN UND PUFFER ~ 18
B.VI.2 ABLAUF DES ENDONUCLEASENVERDAUS 19
B. VII GELELEKTROPHORETISCHE QUANTIFIKATION DER PCR-PRODUKTE 19
B.VII.L POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE 19
B.VH.L.A ELEKTROPHORESEGERAET UND LAUFBEDINGUNGEN 20
B.VII.L.B VERWENDETE PUFFER 20
B.VUE.L.B.L LAUFPUFFER
20
B.VII.L.B.2 LADUNGSPUFFER
20
B.VH.2 HERSTELLUNG DER POLYACRYLAMIDGELE 20
B.VII.2.A ANSATZ EINER ACRYLAMID/BISACRYLAMID STAMMLOESUNG 30:0.5 V/V 20
B.VII.2.B ANSATZ EINER 8% V/V POLYACRYLAMIDSTAMMLOESUNG 20
B.VII.2.C HERSTELLUNG EINES POLYACRYLAMIDGELS 21
B.VII.2.D VORBEREITUNG DER GLASPLATTEN 21
B.VII.2.E FAERBUNG DES GELS
21
B.VII.2.E.L ANSATZ EINER ETHIDIUMBROMIDFAERBELOESUNG 21
B.VII.2.E.2 FAERBEVORGANG
21
B.VII.3 PHOTODOKUMENTATION
21
B.VII.4 ELEKTROPHORESE DER AMPLIFIKATE IM SEQUENZIERGELVERFAHREN 22
B.VII.4.A ELEKTROPHORESEGERAET UND LAUFBEDINGUNGEN 22
B.VII.4.B VERWENDETE PUFFER
22
B.VII.4.B. 1 6 X TBE LAUFPUFFER
22
B.VII.4.B.2 GEL-LADUNGSPUFFER
23
B.VII.4.C HERSTELLUNG DER GELTRAEGER 23
B.VII.4.C.1 VORBEREITUNG DER GELKAMMER 23
B. VII. 4. C. 2 HERSTELLUNG EINES 6% POLYACRYLAMID-HAMSTOFF-GELS 23
B.VII.S.A RECHNERINTEGRIERTE BANDENAUSWERTUNG 24
B. VII. 5 B DEFINITION DER BANDENFLAECHE 24
B.VII.6 BESTIMMUNG DES STIMULATIONSKOEFFIZIENTEN UND STATISTIK 24
B.VII.OE.A BESTIMMUNG DES STIMULATIONSKOEFFIZIENTEN 24
B.VII.OE.B STATISTISCHE AUSWERTUNG 24
C
ERGEBNISSE 25
IMMUNZYTOCHEMISCHER NACHWEIS DER EPITHELIALEN HERKUNFT
UNTERSUCHTER STRUMAZELLEN 25
IMMUNHISTOCHEMISCHER NACHWEIS DES HGF-REZEPTORS IN DEN
UNTERSUCHTEN GEWEBEN 26
IMMUNZYTOCHEMISCHER NACHWEIS DES HGF-REZEPTORS IN
PRIMAERKULTUREN UND KARZINOMZELLINIEN 26
NACHWEIS DER RNA QUALITAET DURCH SPEKTROMETRIE UND
DENATURIERENDE MOPS GELELEKTROPHORESE 27
IDENTIFIKATION DES RT-PCR PRODUKTES 28
REPRODUZIERBARKEIT DER MESSMETHODE 29
INTER-PCR-VARIABILITAET 29
STABILITAET DER BASALEXPRESSION DES HGF-REZEPTORS 30
SCHWANKUNGSBEREICH DER GELELEKTROPHORETISCHEN TRENNUNG 3 0
EINFLUSS DER CDNA SYNTHESE AUF DAS ZIELGEN/REFERENZGEN
VERHAELTNIS 31
VERGLEICH ZWISCHEN KULTUREN VERSCHIEDENER GEWEBE 31
DEFINITION DES LINEARITAETSBEREICHES DER AMPLIFIKATION
IN DER POLYMERSEKETTENREAKTION 31
MATRIZENMISCHUNGSVERSUCH 32
ZYKLUSABHAENGIGER VERSUCH 33
MATRIZENVERDUENNUNGSVERSUCH 33
EINFLUSS DER ZELLKONFLUENZ AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION 34
KINETIK DER TRANSKRIPTIONSINDUKTION 34
C .I GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION 3 5
C.I. 1 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINER STRUMA
COLLOIDES NODOSA ( STRUMA 510) 35
C.I.2 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINER STRUMA
COLLOIDES NODOSA ( STRUMA 511) 38
C.I.3 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINER STRUMA
COLLOIDES NODOSA ( STRUMA 512) 39
C.I.4 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINER STRUMA
COLLOIDES NODOSA ( STRUMA 513) 40
C.I.5 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINER STRUMA
COLLOIDES NODOSA ( STRUMA 517) 41
C.I.6 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINER STRUMA
COLLOIDES NODOSA (' STRUMA 519) 42
C.I.7 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINER STRUMA
COLLOIDES NODOSA ( STRUMA 526 ) 43
C.I.8 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINER STRUMA
COLLOIDES NODOSA ( STRUMA 537) 46
C.I.9 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN PRIMAERKULTUREN EINES PAPILLAEREN
SCHILDDRUESENKARZINOMS (PTC 542) 47
C.I. 10 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN SCHILDDRUESENKARZINOMZELLINIEN
EINES FOLLIKULAEREN SCHILDDRUESENKARZINOMS (FTC 133 ) 48
C.1.11 GRAPHISCHE DARSTELLUNG DER EINFLUESSE VERSCHIEDENER STIMULANTIEN
AUF DIE HGF-REZEPTOR EXPRESSION IN SCHILDDRUESENKARZINOMZELLINIEN
EINES FOLLIKULAEREN SCHILDDRUESENKARZINOMS ( FTC 238 ) 51
C.1.12 DARSTELLUNG DER PROZENTUALEN INDUKTION DES HGF-REZEPTORS
DURCH HGF IN UNTERSCHIEDLICHEN GEWEBEN 54
C.1.13 DARSTELLUNG DER PROZENTUALEN INDUKTION DES HGF-REZEPTORS
DURCH TGFA IN UNTERSCHIEDLICHEN GEWEBEN 55
C.1.14 DARSTELLUNG DER PROZENTUALEN INDUKTION DES HGF-REZEPTORS
DURCH TGFSS-1 IN UNTERSCHIEDLICHEN GEWEBEN 56
C.1.15 DARSTELLUNG DER PROZENTUALEN INDUKTION DES HGF-REZEPTORS
DURCH IFN-Y IN UNTERSCHIEDLICHEN GEWEBEN 57
C.1.16 DARSTELLUNG DER PROZENTUALEN INDUKTION DES HGF-REZEPTORS
DURCH DB CAMP IN UNTERSCHIEDLICHEN GEWEBEN 58
C.1.17 DARSTELLUNG DER PROZENTUALEN INDUKTION DES HGF-REZEPTORS
DURCH FORSKOLIN IN UNTERSCHIEDLICHEN GEWEBEN 59
C.1.18 TABELLARISCHE DARSTELLUNG DER PROZENTUALEN INDUKTION DES
HGF-REZEPTORS DURCH BTSH, NATRIUMJODID, SURAMIN
UND BFGF IN UNTERSCHIEDLICH! GEWEBEN 60
D DISKUSSION
61
E ZUSAMMENFASSUNG
69
F ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 70
G LITERATUR 71
H DANKSAGUNG 85
I LEBENSLAUF 86 |
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