Funktionelle Analyse der Isoformen der regulatorischen Untereinheiten der Phosphatidylinositol-3-Kinase: Bedeutung bei der Insulinresistenz und beim Diabetes mellitus Typ 2
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2001
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INHALSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 3
2. METHODEN 8
2.1 ZUSAMMENSETZUNG DER VERWENDETEN REAGENZIEN, ANTIKOERPER
UND GERAETE 8
2.1.1 REAGENZIEN 8
2.1.2 ANTIKOERPER 9
2.1.3 GERAETE UND SONSTIGE MATERIALIEN 10
2.2 GENEHMIGUNG 10
2.3 STATISTIK UND AUSWERTUNG 10
2.4 HERSTELLUNG VON FIBROBLASTENKULTUREN ~ 11
2.4.1 KULTIVIERUNG VON FIBROBLASTENKULTUREN 11
2.4.2 KRYOKONSERVIERUNG UND ANZUCHT VON
FIBROBLASTENKULTUREN 11
2.5 HERSTELLUNG DER ZELLLYSATE VON FIBROBLASTENKULTUREN 12
2.6 TRANSGENE MAEUSE 13
2.6.1 GEWINNUNG VON GEWEBE UND HERSTELLUNG DER LYSATE 13
2.7 PROTEINBESTIMMUNG 14
2.8 IMMUNPRAEZIPITATION 14
2.8. L KOPPLUNG DER SCHWEREN KETTEN 15
2.9 ELEKTROPHORETISCHE AUFTRENNUNG MITTELS
SDS-POLYACRYLAMID-GEL 16
2.10 WESTEM-BLOTTING 16
2.11 IMMUNODETECTION 17
2.12 STRIPPING 18
19
19
20
3. ERGEBNISSE
3.1 KLINISCHE DATEN DER PATIENTEN
3.2 FIBROBLASTENKULTUREN
GESAMTLYSATE P85A/AS53
1
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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P85A BINDUNG AN IRS-J
P85A BINDUNG AN IRS-2
P85 A BINDUNG AN IRS-1 UND IRS-2 IM VERGLEICH
ASS3 BINDUNG CM IRS-1 UND IRS-2
TABELLE 2A: FIBROBLASTENKULTUREN
TABELLE 2B: FIBROBLASTENKULTUREN
3.3 DIABETISCHE MAEUSE 23
3.3.1 MUSKELGEWEBE 23
GESAMTLYSATE P85A/AS53 IM MUSKELGEWEBE
P85A BINDUNG AN IRS-1 IM MUSKELGEWEBE
AS53 BINDUNG CM IRS-1 IM MUSKELGEWEBE
P85A/AS53 BINDUNG CM IRS-1 IM MUSKELGEWEBE
TABELLE 3: MUSKELGEWEBE
"
3.3.2 FETTGEWEBE 25
GESAMTLYSATE P85A/AS53 IM FETTGEWEBE
P85A BINDUNG AN IRS-1 IM FETTGEWEBE
ASS3 BINDUNG AN IRS-1 IM FETTGEWEBE
P8SA/ASS3 BINDUNG CM IRS-1 IM FETTGEWEBE
TABELLE 4: FETTGEWEBE
3.4 ABBILDUNGEN 27
4. DISKUSSION 37
5. ZUSAMMENFASSUNG 40
6. LITERATURVERZEICHNIS 41
ANHANG:
DANKSAGUNG
LEBENSLAUF
ERKLAERUNG
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