Transplantation retinaler Pigmentepithelzellen in den subretinalen Raum von RCS-Ratten:
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2001
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A
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
ZIELSETZUNG
1
2
EINLEITUNG
2
2.1
ANATOMISCHER
AUFBAU
DES
SAEUGERAUGES
2
2.2
AUFBAU
DER
RETINA
3
2.3
DEGENERATIVE
NETZHAUTERKRANKUNGEN
DES
MENSCHEN
4
2.4
DAS
RETINALE
PIGMENTEPITHEL
4
2.4.1
ZELLSTRUKTUR
DES
RPE
4
2.4.2
CHARAKTERISTISCHE
FUNKTIONEN
DES
RPE
6
2.4.3
ERKRANKUNGEN
DES
RPE
BEIM
MENSCHEN
7
2.5
DIE
ROYAL
COLLEGE
OF
SURGEONS
(RCS)-RATTE
8
2.5.1
DIE
RCS-RATTE
ALS
TRANSPLANTATIONSMODELL
IM
VERGLEICH
ZU
ANDEREN
TIER
MODELLEN
8
2.5.2
GENETISCHE
GRUNDLAGEN
9
2.5.3
AUSWIRKUNGEN
DES
GENETISCHEN
DEFEKTES
AUF
DEN
PHAENOTYP
9
2.6
IMMUNOLOGISCHE
GRUNDLAGEN
BEI
TRANSPLANTATIONEN
AM
AUGE
11
2.7
CHIRURGISCHE
TECHNIKEN
ZUR
SUBRETINALEN
ZELLTRANSPLANTATION
12
2.8
TRANSPLANTATION
IM
RCS-RATTENMODELL
16
2.8.1
ALLOTRANSPLANTATION
16
2.8.2
XENOTRANSPLANTATION
17
2.9
LIMITIERUNG
DES
TRANSPLANTATIONSERFOLGES
17
3
MATERIAL
UND
METHODEN
19
3.1
MATERIAL
19
3.1.1
ISOLIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
DER
SPENDERZELLEN
19
3.1.2
ZELLTRANSPLANTATION
20
3.1.3
IN
SIFU-HYBRIDISIERUNG
21
3.1.4
MAKROPHAGENFAERBUNG
22
3.1.5
GERAETE
22
3.2
METHODEN
23
3.2.1
GEWINNUNG
DER
SPENDERZELLEN
23
3.2.1.1
ISOLIERUNG
23
3.2.1.2
KULTIVIERUNG
24
3.2.2
ERMITTLUNG
INJEKTIONSABHAENGIGER
SPENDERZELLSCHAEDEN
24
3.2.3
TIERMODELL
25
3.2.4
SUBRETINALE
TRANSPLANTATION
26
3.2.4.1
INJEKTIONSSYSTEME
26
3.2.4.2
NARKOSE
UND
OP-VORBEREITUNG
26
3.2.4.3
OPERATION
26
3.2.4.4
ENUKLEATION
27
3.2.5
SPEZIFISCHER
HISTOLOGISCHER
NACHWEIS
VON
HUMANEN
SPENDERZELLEN
28
3.2.5.1
STANDARDISIERTE
AUFARBEITUNG
28
3.2.5.2
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
MIT
EINER
ALU-DNA-SONDE
28
3.2.5.3
ADAPTATION
DER
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
AN
VERSCHIEDENE
GEWEBEARTEN
29
3.2.5.4
NACHWEIS
DER
SPEZIESSPEZIFITAET
DER
HUMANEN
ALU-SONDE
30
3.2.5.5
MODIFIZIERTES
STANDARDPROTOKOLL
ZUR
IN
,S;7U-HYRIDISIERUNG
32
3.2.6
IMMUNHISTOCHEMISCHER
NACHWEIS
VON
RATTENMAKROPHAGEN
33
4
ERGEBNISSE
35
4.1
OPTIMIERUNG
DER
INJEKTIONSTECHNIK
35
4.1.1
SPENDERZELLSCHAEDEN
IN
ABHAENGIGKEIT
VOM
INJEKTIONSSYSTEM
35
4.1.2
EINFLUSS
DER
INJEKTIONSSYSTEME
AUF
DAS
REZIPIENTENGEWEBE
36
4.2
ETABLIERUNG
EINER
SPEZIFISCHEN
NACHWEISMETHODE
VON
HUMANEN
SPENDERZELLEN
IM
OKULAEREN
RATTENGEWEBE
42
4.3
MIKROSKOPISCHE
EVALUIERUNG
DER
TRANSPLANTATIONSSTELLEN
EINEN
TAG
NACH
TRANS
PLANTATION
51
4.4
MIKROSKOPISCHE
EVALUIERUNG
DER
TRANSPLANTATIONSSTELLEN
EINEN
MONAT
NACH
TRANS
PLANTATION
54
5
DISKUSSION
58
5.1
OPTIMIERUNG
DER
INJEKTIONSTECHNIK
58
5.2
SPEZIFISCHER
ZELLNACHWEIS
VON
TRANSPLANTIERTEN
HUMANEN
RPE-ZELLEN
IM
RCS
RATTENAUGE
62
5.3
MIKROSKOPISCHE
EVALUIERUNG
DER
TRANSPLANTATIONSSTELLEN
65
5.4
AUSBLICK
68
6
ZUSAMMENFASSUNG
69
7
SUMMARY
70
8
LITERATURVERZEICHNIS
71
9
ANHANG
81
9.1
TABELLEN
81
9.2
ARBEITSVORSCHRIFT
ZUR
IN
SIRU-HYBRIDISIERUNG
NACH
STANDARDPROTOKOLL
DES
HERSTEL
LERS
85
9.3
REAGENZIEN,
MEDIEN
UND
LOESUNGEN
EIGENER
HERSTELLUNG
86 |
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