Molekularer Mechanismus der karzinogenen Wirkung von Nitromoschusverbindungen:
Gespeichert in:
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Veröffentlicht: |
2001
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
VORWORT
L
1
EINLEITUNG
4
1.1
KARZINOGENESE
4
1.1.1
PROTO-ONKOGENE
UND
TUMORSUPPRESSOR-GENE
7
1.1.2
VIRALE
KARZINOGENESE
9
1.1.3
CHEMISCHE
KARZINOGENESE
13
1.2
TESTSYSTEME
ZUM
NACHWEIS
KANZEROGENER
SUBSTANZEN
17
1.2.1
IN
VIVO
TESTSYSTEME
18
1.2.1.1
DIE
CYTOGENERISCHEN
TESTSYSTEME
18
1.2.1.2
DER
YYDOMINANT-LETHAL
"
-TEST
19
1.2.1.3
DER
,JHERITABLE-TRANSLOCATION
"
-TEST
19
1.2.1.4
DER
"
SPEZIFIC-LOCUS
"
-TEST
20
1.2.1.5
DER
"
MAMMALIAN-SPOF
'
-TEST
21
1.2.1.6
DER
TUMORGENIC-TEST
22
1.2.2
IN
VITRO
TESTSYSTEME
22
1.2.2.1
DER
AMES-TEST
23
1.2.2.2
DER
"
SOS-CHROMOTEST
"
24
1.2.2.3
DER
YYIN
VITRO-MAMMALIAN
CELL
GENE
MUTATION
"
-TEST
24
1.2.2.4
DER
YYIN
VITRO
ZELLTRANSFONNATIONSTEST
"
25
1.2.2.5
DER
YYDNA-REPAIR-TEST
"
25
1.2.3
IN
VIVO/IN
VITRO
TESTSYSTEME
26
1.2.3.1
DAS
YYHOST-MEDIATED-MAMMALIAN
"
-TESTSYSTEM
26
1.2.3.2
DAS
"
TRANSPLACENTAT-TESTSYSTEM
27
1.2.3.3
DAS
SOFT
AGAR
TESTSYSTEM
27
1.3
EIGENSCHAFTEN
DER
UNTERSUCHTEN
SUBSTANZEN
30
2
THEMA
UND
ABGRENZUNG
DER
ARBEIT
34
3
MATERIAL
UND
METHODEN
37
3.1
MATERIAL
37
3.1.1
CHEMIKALIEN
37
3.1.2
PHYSIOLOGISCHE
TRYPANBLAU-LOESUNG
38
3.1.3
LIPOPOLYSACCHARIDE
38
3.1.4
12-0-TETRADECANOYLPHORBOL-13-ACETATE
(TPA)
38
3.1.5
PENICILLIN/STREPTOMYCIN
(PEN/STREP)
39
3.1.6
TRYPSIN/EDTA
39
3.1.7
AGAR-AGAR
39
3.1.8
COLONY-STIMULATING
FACTOR
(CSF)
39
3.1.9
PHOSPHATE
BUFFERED
SALINE
(PBS)
40
3.1.10
FOETALES
KAELBERSERUM
(FCS)
40
3.1.11
KULTURMEDIUM
41
3.1.12
ANTIKOERPER
41
3.1.13
ZELLINIEN
42
3.1.14
VERSUCHSTIERE
42
3.1.15
REAGENTIEN
FUER
GEL-ELEKTROPHORESE
42
3.1.16
STERILE
EINMALARTIKEL
43
3.2
ARBEITEN
MIT
ZELLEN
44
3.2.1
ZELLKULTURBEDINGUNGEN
44
3.2.2
GEWINNUNG
VON
COLONY
STIMULATING
FACTOR
(CSF)
44
3.2.3
TRYPSINIERUNG
VON
ZELLEN
45
3.2.4
LANGZEITKONSERVIERUNG
VON
ZELLEN
45
3.2.5
ZELLZAHLBESTIMMUNG
46
3.2.6
BESTIMMUNG
DER
LEBEND
UND
TOTZELLZAHL
47
3.2.7
GEWINNUNG
VON
PERITONEAHNAEKROPHAGEN
47
3.3
DAS
WIRTSVERMITTELTE
IN
VIVO/IN
VITRO
TESTSYSTEM
48
3.3.1
ALLGEMEIN
48
3.3.2
ZEITLICHER
ABLAUF
48
3.3.3
AUSWERTUNG
51
3.3.4
GEWINNUNG
VON
SERUMFREIEM
MEDIUM
53
3.4
SDS-POLYACRYLAMID
GEL
ELEKTROPHORESE
54
3.4.1
PRINZIP
54
3.4.2
LOESUNGEN
55
3.4.3
DURCHFUEHRUNG
56
3.4.4
FAERBUNG
57
3.4.4.1
COOMASIE-FAERBUNG
57
3.4.4.2
ROTI-BLUE-FAERBUNG
58
3.4.4.3
SILBEMITRAT-FAERBUNG
58
3.4.5
PROTEINBESTIMMUNG
60
3.4.5.1
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
LOWRY
60
3.4.S.2
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
62
3.5
CHARAKTERISIERUNG
DER
ZELLEN
64
3.5.1
UNSPEZIFISCHE
ESTERASE-TEST
64
3.5.2
IMMUNZYTOCHEMISCHER
NACHWEIS
VON
MAC-L-ANTIGEN
MIT
DER
PEROXIDASE-ANTIPEROXIDASE
(PAP)
REAKTION
66
3.5.3
NACHWEIS
VON
FC-REZEPTOREN
UND
PHAGOZYTOSEAKTIVITAET
68
3.6
HISTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGSMETHODEN
DES
TUMORGEWEBES
69
3.6.1
PARAFFINEINBETTUNG
69
3.6.2
UEBERSICHTSFAERBUNG
MIT
HAEMATOXYLIN-EOSIN
(H.E.-FAERBUNG)
70
4
ERGEBNISSE
71
4.1
KARZINOGENITAETSNACHWEIS
DER
UNTERSUCHTEN
SUBSTANZEN
IM
WIRTSVERMITTELTEN
IN
VIVO/IN
VITRO
SYSTEM
72
4.1.1
XYLOLMOSCHUS
72
4.1.2
TIBETENMOSCHUS
79
4.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
ETABLIERTEN
ZELLINIEN
85
4.2.1
MORPHOLOGISCHE
VERAEDERUNGEN
DER
TM
UND
XM-ZELLEN
85
4.2.1.1
TEST
AUF
UNSPEZIFISCHE
ESTERASE
87
4.2.1.2
NACHWEIS
DER
FC-REZEPTOREN
90
4.2.1.3
NACHWEIS
VON
MAC-1
ANTIGEN
92
4.2.1.4
ONKOGENES
POTENTIAL
DER
TRANSFORMIERTEN
ZELLEN
95
4.2.1.5
HISTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNG
DES
TUMORGEWEBES
96
4.2.2
BIOCHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
98
4.2.2.1
SDS-GEL-ELEKTROPHORESE
98
5
DISKUSSION
101
6
ZUSAMMENFASSUNG 114
7
LITERATURVERZEICHNIS
117
8
VERWENDETE
ABKUERZUNGEN
143
9
ANHANG
145
I
DANKSAGUNG
145
II
LEBENSLAUF
146
HI
EHRENWOERTLICHE
EIKLAERUNG
149 |
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