Wirkungen von Troglitazon auf humane kultivierte neudifferenzierte Fettzellen:
Gespeichert in:
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Veröffentlicht: |
2000
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
1
ABSTRACT
1
2
EINLEITUNG
2.1
ADIPOSITAS
3
2.2
INSULINRESISTENZ
4
2.3
TUMOR
NEKROSE
FAKTOR-A
(TNF-A)
5
2.4
THIAZOLIDINDIONE
6
2.5
DIE
ROLLE
VON
PPAR-Y2
IN
DER
FETTZELLDIFFERENZIERUNG
8
2.6
LEPTIN
10
2.7
DIE
ADIPOGENE
DIFFERENZIERUNG
HUMANER
PRAEADIPOZYTEN
11
2.8
HORMONELLE
REGULATION
DER
ADIPOGENEN
DIFFERENZIERUNG
14
MENSCHLICHER
PRAEADIPOZYTEN
2.9
FRAGESTELLUNGEN
15
3
MATERIAL
3.1
TECHNISCHEINSTRUMENTE
16
3.2
SONSTIGE
MATERIALIEN
18
3.3
CHEMIKALIEN
18
3.4
ZELLKULTURMEDIEN
UND-ZUSAETZE
21
3.5
PRIMER-SEQUENZEN
22
3.6
ENZYME
22
3.7
KULTURMEDIUM
23
3.8
MEDIUM
FUER
DEN
GLUKOSETRANSPORT
23
4
METHODEN
4.1
ISOLIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
VON
PRAEADIPOZYTEN
AUS
HUMANEN
25
FETTGEWEBSPROBEN
4.1.1
FETTGEWEBSBESCHAFFUNG
25
4.1.2
ISOLIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
STROMALER
ZELLEN
25
4.1.3
PRIMAERKULTIVIERUNG
STROMALER
ZELLEN
27
4.1.4
ZELLERNTE
27
4.2
BIOCHEMISCHE
METHODEN
28
4.2.1
BESTIMMUNG
DER
GLYCERIN-3-PHOSPHAT-DEHYDROGENASE
(GPDH)
28
4.2.2
BESTIMMUNG
DES
PROTEINGEHALTS
29
4.2.3
MESSUNG
DES
2-DEOXY-D-GLUKOSE-TRANSPORTS
30
4.2.4
MESSUNG
DER
LEPTTNSPIEGEL
IN
DEN
KULTURMEDIEN
31
4.2.5
ISOLIERUNG
DER
ZYTOPLASMATISCHEN
RNA
AUS
ZELLKULTUREN
31
4.3
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
33
4.3.1
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
33
4.3.2
RT-PCR
34
4.3.3
REVERSE
TRANSKRIPTION
VON
GESAMT-RNA
35
4.3.4
SEMIQUANTITATIVE
PCR
36
4.3.5
PRIMER
DESIGN
37
4.4
ELEKTROPHORETISCHE
METHODEN
37
4.4.1
HORIZONTALE
AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE
UNTER
DENATURIERENDEN
37
BEDINGUNGEN
4.4.2
HORIZONTALE
AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE
UNTER
NATIVEN
38
BEDINGUNGEN
4.4.3
PAGE
UNTER
DENATURIERENDEN
BEDINGUNGEN
39
4.5
AUSWERTUNG
UND
STATISTIK
39
5
ERGEBNISSE
5.1
TROGLITAZON
UND
TNF-A
40
5.1.1
EINFLUSS
VON
TROGLITAZON
UND
TNF-A
AUF
DIE
GPDH-AKTIVITAET
IN
40
PRIMAERKULTUREN
MENSCHLICHER
PRAEADIPOZYTEN
5.1.2
EINFLUSS
VON
TROGLITAZON
UND
TNF-A
AUF
DEN
BASALEN
UND
44
INSULINSTIMULIERTEN
GLUKOSETRANSPORT
IN
HUMANEN
FETTZELLKULTUREN
5.1.3
VERLAUF
DER
EXPRESSION
VON
PPAR-/2
WAEHREND
DER
46
DIFFERENZIERUNG
HUMANER
PRAEADIPOZYTEN
5.1.4
EINFLUSS
VON
TNF-A
UND
TROGLITAZON
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
48
PPAR-Y2
IN
KULTIVIERTEN
HUMANEN
FETTZELLEN
5.2
WIRKUNG
UND
EXPRESSION
VON
LEPTIN
IN
KULTIVIERTEN
HUMANEN
52
PRAEADIPOZYTEN
UND
FETTZELLEN
5.2.1
LEPTIN-MRNA-EXPRESSION
WAEHREND
DER
DIFFERENZIERUNG
HUMANER
52
PRAEADIPOZYTEN
5.2.2
WIRKUNG
VON
TROGLITAZON
UND
TNF-A
AFF
DIE
LEPTIN-MRNA
53
EXPRESSION
5.2.3
LEPTINSEKRETION
WAEHREND
DER
DIFFERENZIERUNG
HUMANER
55
PRAEADIPOZYTEN
5.2.4
EINFLUSS
EINER
KURZZEITINKUBATION
MIT
TROGLITAZON
AFF
DIE
56
LEPTINSEKRETION
5.2.5
EINFLUSS
VON
LEPTIN
AFF
DIE
GPDH-AKTIVITAET
IN
PRIMAERKULTUREN
57
MENSCHLICHER
PRAEADIPOZYTEN.
5.2.6
EINFLUSS
VON
LEPTIN
AUF
DEN
BASALEN
UND
INSULINSTIMULIERTEN
58
GLUKOSETRANSPORT
IN
HUMANEN
FETTZELLEN
6
DISKUSSION
6.1
WIRKUNG
VON
TROGLITAZON
UND
TNF-A
AUF
HUMANE
60
PRAEADIPOZYTENKULTUREN
6.2
PPAR-Y
IM
VERLAUF
DER
ADIPOGENEN
DIFFERENZIERUNG
63
6.3
WIRKUNG
VON
TROGLITAZON
UND
TNF-A
AUF
DIE
PPAR-Y2-EXPRESSION
63
6.4
LEPTINEXPRESSION
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
FETTZELLDIFFERENZIERUNG
65
6.5
WIRKUNG
VON
TROGLITAZON
AUF
DIE
LEPTINEXPRESSION
UND
-SEKRETION
65
6.6
WIRKUNG
VON
TNF-A
AUF
DIE
LEPTINEXPRESSION
66
6.7
WIRKUNGEN
VON
LEPTIN
AUF
HUMANE
FETTZELLEN
66
7
HYPOTHESE
UND
AUSBLICK
69
8
LITERATURVERZEICHNIS
70
LEBENSLAUF
UND
LITERATUR |
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