Prävalenz und Charakterisierung disseminierter Tumorzellen im Knochenmark von Patienten mit epithelialen Tumoren:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
UND
FRAGESTELLUNGEN
5
2
PATIENTEN,
MATERIAL
UND
METHODEN
9
2.1
PATIENTENKOLLEKTIV
.
9
2.2
GEWINNUNG
UND
AUFBEREITUNG
DER
KNOCHENMARKSASPIRATE
.
10
2.3
IMMUNCYTOCHEMISCHE
FAERBETECHNIKEN
.
13
2.3.1
APAAP-TECHNIK
.
13
2.3.2
ENTWICKLUNG
EINER
DOPPELMARKIERUNGSTECHNIK
MIT
FLUORESZENZFARB
STOFFEN
.
17
2.3.3
NACHWEIS
DER
MEMBRANSTAENDIGEN
METALLOPROTEINASE
MT1-MMP
IN
GEWEBESCHNITTEN
MIT
HILFE
DER
AVIDINBIOTIN-KOMPLEX(ABC)
METHODE
.
21
2.4
MOLEKULARGENETISCHE
CHARAKTERISIERUNG
CK18+
ZELLEN
IM
KNOCHENMARK
VON
TUMORPATIENTEN
.
23
2.4.1
GEWINNUNG
UND
VORBEHANDLUNG
DES
MATERIALS
.
23
2.4.2
VORAMPLIFIKATION
DER
ZELL-DNA
MITTELS
PEP-PCR
.
24
2.4.3
DETEKTION
GENOMISCHER
INSTABILITAETEN
DURCH
ANWENDUNG
SPEZIFI
SCHER
PCR-VERFAHREN
.
25
2.5
STATISTISCHE
VERFAHREN
.
26
2.5.1
ALLGEMEINE
VORBEMERKUNGEN
.
26
2.5.2
STATISTISCHE
BEARBEITUNG
DER
BASISDATEN
.
26
2.5.3
STATISTISCHE
BEARBEITUNG
DER
FOLLOW
UP-DATEN
.
27
INHALTSVERZEICHNIS
2
3
ERGEBNISSE
28
3.1
NACHWEIS
EPITHELIALER
ZELLEN
IM
KNOCHENMARK
.
28
3.2
KORRELATION
DES
KNOCHENMARKSBEFUNDES
ZU
ETABLIERTEN
PROGNOSEPARAMETERN
30
3.2.1
MAGEN
UND
OESOPHAGUSKARZINOM
.
30
3.2.1.1
MAGENKARZINOM
.
30
3.2.1.2
OESOPHAGUSKARZINOM
.
33
3.2.2
KOLONKARZINOM
.
33
3.2.3
REKTUMKARZINOM
.
36
3.2.4
GASTROINTESTINALE
TUMORE
.
38
3.2.5
KARZINOME
DER
SCHILDDRUESE,
DER
MAMMA,
DES
PANKREAS,
DES
DUCTUS
CHOLEDOCHUS,
DER
GALLENBLASE,
DER
NIERE
UND
KLATSKINTUMOREN
.
.
38
3.2.6
SONSTIGE
.
38
3.2.7
KONTROLLKOLLEKTIV
.
40
3.3
DIFFERENZIERTE
DATENANALYSE
DER
KNOCHENMARKSBEFUNDE
BEI
MAGEN-,
KOLON
UND
REKTUMKARZINOMPATIENTEN
.
42
3.3.1
BETRACHTUNG
DER
AGGREGATIONSFORM
CK18+
ZELLEN
IM
KNOCHENMARK
42
3.3.2
QUANTITATIVE
ANALYSE
DES
VORKOMMENS
VON
EPITHELIALEN
ZELLEN
IM
KNOCHENMARK
.
43
3.4
NACHBEOBACHTUNG
DER
MAGEN-,
KOLON
UND
REKTUMKARZINOMPATIENTEN
.
.
46
3.4.1
REZIDIVFREIES
UEBERLEBEN
DER
MAGENKARZINOMPATIENTEN
.
47
3.4.2
REZIDIVFREIES
UEBERLEBEN
DER
KOLONKARZINOMPATIENTEN
.
48
3.4.3
REZIDIVFREIES
UEBERLEBEN
DER
REKTUMKARZINOMPATIENTEN
.
49
3.5
ERGEBNISSE
DER
CK2/MT1-MMP
-
DOPPELFAERBUNG
MIT
FLUORESZENZFARBSTOFFEN
50
3.5.1
WAHL
DER
GEEIGNETEN
ANTIKOERPER
UND
KARZINOMZELLEN
FUER
SICHERE
POSITIV
UND
NEGATIVKONTROLLEN
.
50
3.5.2
MTL-MMP-EXPRESSION
AUF
CK2
POSITIVEN
ZELLEN
IM
KNOCHENMARK
51
3.5.3
MTL-MMP-EXPRESSION
IN
PRIMAERTUMOREN,
LYMPHKNOTEN
UND
OR
GANMETASTASEN
.
52
3.6
ERGEBNISSE
DER
MOLEKULARGENETISCHEN
TUMORZELLCHARAKTERISIERUNG
.
53
INHALTSVERZEICHNIS
3
4
DISKUSSION
56
4.1
DIE
IMMUNCYTOCHEMISCHE
DETEKTION
DISSEMINIERTER
TUMORZELLEN
IM
KNO
CHENMARK
VON
PATIENTEN
MIT
SOLIDEN
TUMOREN
.
56
4.1.1
DISKUSSION
DER
METHODE
.
56
4.1.1.1
DAS
KOMPARTIMENT
KNOCHENMARK
-
PUNKTIONSORT,
PUNK
TIONSZEITPUNKT
UND
PUNKTIONSHAEUFIGKEIT
.
57
4.1.1.2
DER
VERWENDETE
ANTIKOERPER
CK2
-
SPEZIFITAET
UND
SENSITI
VITAET
.
59
4.1.1.3
DIE
IMMUNCYTOCHEMISCHE
METHODE
.
60
4.1.2
BEDEUTUNG
DER
DETEKTION
EPITHELIALER
ZELLEN
IM
KNOCHENMARK
VON
KARZINOMPATIENTEN
-
KORRELATION
ZU
ETABLIERTEN
PROGNOSEPARAME
TERN
UND
FOLLOW
UP-DATEN
.
62
4.1.2.1
DETEKTION
CK18+
ZELLEN
IM
KNOCHENMARK
VON
MAGENKARZINOMPATIENTEN
.
64
4.1.2.2
DETEKTION
VON
CK18+
ZELLEN
IM
KNOCHENMARK
VON
PATI
ENTEN
MIT
KOLOREKTALEN
KARZINOMEN
.
65
4.1.3
BEDEUTUNG
DER
AGGREGATIONSFORM
UND
DISKUSSION
DER
NOTWENDIG
KEIT
EINER
QUANTIFIZIERUNG
VON
DISSEMINIERTEN
TUMORZELLEN
IM
KNO
CHENMARK
.
67
4.1.4
PROGNOSTISCHE
BEDEUTUNG
DES
TUMORZELLNACHWEISES
IM
KNOCHEN
MARK
VON
PATIENTEN
MIT
GASTROINTESTINALEN
KARZINOMEN
.
68
4.2
NAEHERE
CHARAKTERISIERUNG
DISSEMINIERTER
TUMORZELLEN
MIT
HILFE
EINER
DOP
PELMARKIERUNGSTECHNIK
.
70
4.2.1
DIE
BEDEUTUNG
VON
MATRIX
METALLOPROTEINASEN
BEI
DER
METASTASIE
RUNG
VON
TUMORZELLEN
.
71
4.2.2
ENTWICKLUNG
EINER
METHODE
ZUR
SIMULTANEN
DARSTELLUNG
VON
INTRA
ZELLULAEREM
CYTOKERATIN
18
UND
DER
ZELLMEMBRANSTAENDIGEN
METALLO
PROTEINASE
.
73
4.2.2.1
ERHOEHUNG
DER
EXPRESSION
VON
MT1-MMP
AUF
DER
ZELLO
BERFLAECHE
DER
POSITIVKONTROLLZELLEN
MIT
HILFE
VON
CONCAVA
LIAN
A
.
73
INHALTSVERZEICHNIS
4
4.2.2.2
DETEKTION
DER
ANTIGENE
MIT
FLUORESZENZMARKIERTEN
AN
TIKOERPERN
.
74
4.2.3
DISKUSSION
DER
DURCH
DOPPELMARKIERUNG
ERHALTENEN
ERGEBNISSE
.
.
75
4.3
MOLEKULARGENETISCHE
CHARAKTERISIERUNG
MIKRODISSEZIERTER
CK18+
ZELLEN
AUS
DEM
KNOCHENMARK
.
77
4.3.1
DISKUSSION
METHODISCHER
ASPEKTE,
ANFAELLIGKEITEN
UND
GRENZEN
.
.
78
4.3.1.1
MIKRODISSEKTION
DER
CK18+
ZELLEN
VOM
OBJEKTTRAEGER
.
.
78
4.3.1.2
UNTERSUCHUNG
AUF
MIKROSATELLITENINSTABILITAETEN
DURCH
UN
SPEZIFISCHE
AMPLIFIZIERUNG
DER
ZELL-DNA
MITTELS
EINER
MO
DIFIZIERTEN
PEP-PCR
UND
ANSCHLIESSENDER
SPEZIFISCHER
PCR
79
4.3.2
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
DER
LOH-ANALYSE
.
80
5
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
82 |
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