Der Einfluss von Suramin auf die Proliferation von Follikelepithelzellen der menschlichen Schilddrüse in vitro:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG.
1
2 MATERIAL UND METHODEN.
4
2.1 ALPHABETISCHE AUFLISTUNG DER ARBEITSGERAETE.4
2.2 ALPHABETISCHE AUFLISTUNG ALLER VERWENDETEN SUBSTANZEN UND PUFFER.4
2.3 HERSTELLUNG DER ARBEITSLOESUNGEN.7
2.3.1 ANSATZ DES NAEHRSTOFFGEMISCHES FUER THYREOZYTENKULTUREN.7
2.3.2 ANSATZ DES H5-MEDIUM NACH AMBESI-IMPIOMBATO.7
2.3.3 ANSATZ DES FETALEN KAELBERSERUM.7
2.3.4 ANSATZ DER STAMMLOESUNG VON SURAMIN.8
2.3.5 ANSATZ DER MTT-STAMMLOESUNG.!?.8
2.3.6 ANSATZ DER SULPHORHODAMIN-B-FARBLOESUNG.8
2.3.7 ANSATZ VON 3,05N TRICHLORESSIGSAEURELOESUNG.8
2.3.8 ANSATZ DES TRIS-PUFFERS.8
2.3.9 ANSATZ DER 1M SCHWEFELSAEURE.8
2.3.10 ANSATZ DER EOSIN-LOESUNG.9
2.3.11 ANSATZ DER LOESUNGEN FUER DIE IMMUNZYTOCHEMIE.9
2.3.11.1 ANSATZ DER PHOSPHATGEPUFFERTEN KOCHSALZLOESUNG (PBS), PH 7,6.9
2.3.11.2 ANSATZ DER PBSA-LOESUNG.9
2.3.11.3 ANSATZ DER DAB-LOESUNG.9
2.3.11.4 ANSATZ DER ZYTOKERATINLOESUNG.9
2.4 METHODEN.10
2.4.1 BESCHREIBUNG DER PERMANENTEN SCHILDDRUESEN-KARZINOM-ZELLIEN UND DER
SCHILDDRUESEN-PRIMAERKULTUREN.10
2.4.2 ANLAGE VON PRIMAERKULTUREN AUS FRISCHPRAEPARATEN MENSCHLICHER
SCHILDDRUESEN . 11
2.4.3 HERSTELLUNG VON ZELLSUSPENSIONEN DURCH TRYPSINBEHANDLUNG DER
MONOLAYER-
KULTUREN.12
2.4.4 ZELLZAEHLUNG UND VITALITAETSKONTROLLE DURCH DEN
TRYPANBLAU-FARBSTOFF-
EXKLUSIONS-VERSUCH.12
2.4.5 ZELLKULTURBESCHICKUNG UND ZUSATZ DER PRUEFSUBSTANZ.13
2.4.6 METHODEN ZUR BESTIMMUNG VON ZELLZAHL UND PROLIFERATION.14
2.4.6.1 MTT-MESSVERFAHREN.14
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/962189243
3
2.4.6.2 BRDU-MESSVERFAHREN.
2.4.6.3 SULPHORHODAMIN-B-FARBSTOFF-TEST.
2.4.6.4 HAEMALAUN-EOSIN-FAERBUNG.
2.4.7 IMMUNZYTOCHEMIE.
ERGEBNISSE.
3.1 VALIDIERUNG DER VERFAHREN ZUR ZELLZAEHLUNG UND PROLIFERATIONSMESSUNG.
3.1.1 VALIDIERUNG DER MESSMETHODEN MIT ZELLEN DER PERMANENTEN
FTC-ZELLINIE 133.
3.2 PROLIFERATIONSDATEN ALLER UNTERSUCHTEN PERMANENTEN ZELIINIEN UND
PRIMAERKULTUREN.
3.2.1 PROLIFERATIONSDATEN DER PERMANENTEN FOLLIKULAEREN
SCHILDDRUESEN-KARZINOM-
ZELLINIEN 133, 236 UND 238.
15
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17
17
19
19
19
20
20
3.2.2 PROLIFERATIONSDATEN DER PRIMAERKULTUREN AUS ~P9PI^
RN SCHILDDRUESEN-
KARZINOMEN (PTC), GENANNT 438,448,465 UND 488.
3.2.3 PROLIFERATIONSDATEN DER PRIMAERKULTUREN AUS MORBUS-BASEDOW, GENANNT
441,
455 UND 489.
3.2.4 PROLIFERATIONSDATEN DER PRIMAERKULTUREN AUS STRUMEN, GENANNT 451,
454, 458,
459,464, 470, 490,491,492 UND 493.
3.2.5 EINFLUSS VON SURAMIN AUF DIE PROLIFERATION VON
FOLLIKELEPITHELZELLEN DER
SCHILDDRUESE.
3.3 NACHWEIS DER PROLIFERATIONSKAPAZITAET DER UNTERSUCHTEN ZELIINIEN UND
PRIMAERKULTUREN.
3.3.1 PROLIFERATION UNTER SERUMFREIEN WACHSTUMSBEDINGUNGEN.
3.3.2 PROLIFERATION MIT ZUSATZ VON 1 %V/V FKS.
3.3.3 PROLIFERATION MIT ZUSATZ VON 10%V/V FKS.
3.4 PROLIFERATIONSREGULATION VON THYROZYTEN DURCH SURAMIN.
3.4.1 ERGEBNISSE AUS DEM MTT- UND BRDU-TEST.
3.4.2 ERGEBNISSE AUS DEM MTT- UND BRDU-TEST UNTER ZUSATZ VON 5% FKS.
3.5 PROLIFERATION UNTER ZUSATZ VON SURAMIN 20PM.
3.6 ERGEBNISUEBERSICHT.
3.6.1 ERGEBNISSE ZUR VALIDIERUNG DER MESSMETHODEN.
3.6.2 ERGEBNISSE ZUR PROLIFERATION IM LANGZEITVERSUCH UNTER SERUMFREIEN
WACHSTUMSBEDINGUNGEN UND MIT ZUSATZ VON 1%V/V UND 10%V/V FETALEM
KAELBERSERUM ZUM NAEHRMEDIUM.
21
22
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25
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30
.32
.32
.33
.34
.35
.35
35
II
3.6.2.1 PROLIFERATION UNTER SERUMFREIEN WACHSTUMSBEDINGUNGEN.36
3.6.2.2 PROLIFERATION MIT ZUSATZ VON 1 %V/V FKS ZUM NAEHRMEDIUM.36
3.6.2.3 PROLIFERATION MIT ZUSATZ VON 10%V/V FKS ZUM NAEHRMEDIUM.38
3.6.3 ERGEBNISSE ZUR PROLIFERATIONSINDUKTION UND -INHIBITION DURCH
SURAMIN.40
3.6.3.1 PROLIFERATIONSINDUKTION DURCH SURAMIN, NACHWEIS IM
MTT-VERFAHREN.40
3.6.3.2 WACHSTUMSINDUKTION DURCH SURAMIN, NACHWEIS IM
BRDU-MESSVERFAHREN.43
3.6.3.3 WACHSTUMSINHIBITION DURCH SURAMIN, NACHWEIS IM MTT-VERFAHREN.45
3.6.3.4 PROLIFERATIONSINHIBITION DURCH SURAMIN, NACHWEIS IM
BRDU-VERFAHREN.47
3.6.3.5 ERGEBNISSE ZUR PROLIFERATION UNTER SURAMIN 20|JM.49
4 ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE.
49
CO
5 DISKUSSION.
FIOE
6 ZUSAMMENFASSUNG.
R1
7 LITERATURVERZEICHNIS.
III |
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