Nachweis von Endotoxin, anti-Lipid-A- und anti-Endotoxin-Antikörpern in Körperflüssigkeiten von Pferd und Rind:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGEN
1.
EINLEITUNG.
.
1
2.
LITERATURUEBERSICHT.
2
2.1.
URSPRUNG
DER
ENDOTOXINE
.
2
2.2.
STRUKTUR-ANTIGENITAETS-ZIMMUNOGENITAETS-RELATIONEN
DER
ENDOTOXINKOMPONENTEN
.
2
2.2.1.
O-SPEZIFISCHE
KETTE
.
2
2.2.2.
KEMOLIGOSACCHARID
.
5
2.2.3.
LIPID
A
.
7
2.3.
BIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
ENDOTOXINE
FUER
MIKRO
UND
WIRTSORGANISMUS
.
10
2.4.
NATUERLICHES
VORKOMMEN
UND
BIOLOGISCHE
WERTIGKEIT
VON
ANTI-LPS
UND
ANTI-LIPID
A
ANTIKOEREM
.
12
2.4.1.
ANTI-LPS-ANTIKOERPER
.
12
2.4.2.
ANTI-LIPID
A-ANTIKOERPER
.
17
2.5.
BESONDERHEITEN
DER
IMMUNGLOBULINKLASSEN
G
UND
M
.
19
2.6.
ZIMIJI/S-AMOEBOZYTEN-LYSAT-TEST
(LAL-TEST)
.
20
2.6.1.
GRUNDLAGEN
UND
WIRKUNGSWEISE
DES
LAL-TESTES
.
21
2.6.2.
METHODEN,
DURCHFUEHRUNG
UND
STANDARDISIERUNG
DES
LAL-TESTES
.
21
2.6.3.
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
LYSATREAKTION
UND
MASSNAHMEN
ZUR
TESTOPTIMIERUNG
.
23
2.7.
ELISA
.
25
2.7.1.
ALLGEMEINE
PRINZIPIEN
.
25
2.7.2.
INDIREKTER
ENDOTOXINNACHWEIS
.
26
3.
MATERIAL
UND
METHODEN.
28
A.
METHODEN
UND
METHODENABHAENGIGE
MATERIALEN
.
28
3.1.
ELISA
.
28
3.1.1.
ANTI-ENDOTOXIN-IGG-ELISA
FUER
BESTIMMUNGEN
IM
BLUTSERUM/
-PLASMA
DES
PFERDES.29
3.1.1.1.
STANDARD
.
29
3.1.1.2.
EVALUIERUNG
DER
OPTIMALEN
REAKTIONSBEDINGUNGEN
FUER
STANDARD
BZW.
NORMALSEREN.
.29
3.1.1.2.1.
COATING
.
29
3.1.1.2.2.
WASCHEN
.
31
3.1.1.2.3.
BLOCKIERUNG
.
31
3.1.1.2.4.
INKUBATIONSMEDIUM
FUER
STANDARD
UND
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
.
32
3.1.1.2.5.
EINFLUSS
VON
INKUBATIONSDAUER,
-TEMPERATUR
UND
PLATTENSHAKER
FUER
STANDARD
BZW.
NORMALSEREN
.
32
3.1.1.2.6.
KONJUGAT
.
32
3.1.1.2.7.
SUBSTRAT
.
33
3.1.1.2.8.
ABBRUCH
DER
REAKTION
UND
MESSUNG
DER
OPTISCHEN
DICHTE
.
33
3.1.1.3.
QUALITAETSPARAMETER
.
33
3.1.1.3.1.
SPEZIFITAET
.
34
3.1.1.3.2.
WIEDERFINDUNGSRATE
(RECOVEIY)
.
34
3.1.1.3.3.
SENSITIVITAET
.
34
3.1.1.3.4.
LINEARITAETSBEREICH
(MESSBEREICH)
.
35
3.1.1.3.5.
PRAEZISION
.
35
3.1.2.
ELISAS
MIT
TITERBESTIMMUNGEN
.
36
3.1.2.1.
EVALUIERUNG
DER
OPTIMALEN
REAKTIONSBEDINGUNGEN
.
36
3.1.2.2.
KONTROLLEN
.
38
3.1.2.3.
QUALITAETSPARAMETER.
.
38
3.2.
LZMUZUS-AMOEBOZYTEN-LYSAT-TEST
(LAL-TEST)
.
39
3.2.1.
VORUNTERSUCHUNGEN
ZUR
AUSWAHL
DES
TESTSYSTEMS
.
39
3.2.2.
STANDARDS
.
39
3.2.3.
STANDARDKURVEN
.
39
3.2.4.
TESTDURCHFUEHRUNG
.
39
3.2.5.
ABKLAERUNG
VON
PROBEN
MIT
HOHER
ENDOTOXINAKTIVITAET
.
40
B.
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
.
41
3.3.1.
GESAMTUEBERBLICK
ZU
APPLIKATIVEN
UNTERSUCHUNGEN
.
41
3.3.2.
UNTERSUCHUNGEN
IN
BLUTPLASMA,
PERITONEALPUNKTAT,
BAL,
SYNOVIA
UND
KOTWASSER
VON
PFERDEN
.
41
3.3.2.1.
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
EINFLUSS
EINER
FETTANGEREICHERTEN
RATION
AUF
DEN
ENDOTOXIN
GEHALT
SOWIE
DIE
DYNAMIK
VON
IGG-ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
UND
IGG-ANTI
LIPID
A-TITEM
IM
BLUTPLASMA
VON
PFERDEN
.
41
3.3.2.2.
BEZIEHUNGEN
ZWISCHEN
STUTEN
UND
IHREN
FOHLEN
HINSICHTLICH
ENDOTOXIN
UND
IGG
ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
SOWIE
DEM
IGG-ANTI-LIPID
A-TITER
IM
BLUTPLASMA.
.42
3.3.2.3.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
ENDOTOXIN
UND
IGG-ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
SOWIE
DEM
IGG-ANTI-LIPID
A-TITER
IN
BLUTPLASMA,
PERITONEALPUNKTAT,
BAL
1
,
SYNOVIA
UND
KOTWASSER
VON
EQUINEN
PATIENTEN
DER
MEDIZINISCHEN
UND
CHIRURGISCHEN
KLINIKEN
DER
VETERINAERMEDIZINISCHEN
FAKULTAET
LEIPZIG
.
42
3.3.3.
UNTERSUCHUNGEN
IN
BLUTSEREN
UND
IN
ROHMILCH
VON
RINDERN
.
43
3.3.3.1.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGG
UND
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGG
UND
IGM-ANTI-ENDOTOXIN-TITEM
IM
BLUTSERUM
VON
FAERSEN
NACH
EXPERIMENTELL
INDUZIERTER
ENDOTOXAEMIE
.
43
3.3.3.2.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGG-
UND
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGG
UND
IGM-ANTI-ENDOTOXIN-TITEM
IM
BLUTSERUM
VON
BULLEN
BEI
AKUTEM
HUNGER
ZUSTAND
.
43
3.3.3.3.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGM-ANTI
ENDOTOXIN-TITEM
IN
ROHMILCH
BEI
FETTANGEREICHERTER
RATION
.
44
3.4.
TITERBESTIMMUNG
.
44
C.
STATISTISCHE
ANALYSEN
.
45
3.5.
DESKRIPTIVE
STATISTIK
.
45
3.6.
ANALYTISCHE
STATISTIK
.
46
4.
ERGEBNISSE
.
47
4.1.
ERGEBNISSE
ZU
DEN
METHODISCHEN
UNTERSUCHUNGEN
BEIM
EQUINEN
ANTI-ENDOTOXIN-IGG
ELISA
.
47
4.1.1.
ERGEBNISSE
DER
EVALUIERUNG
DER
OPTIMALEN
REAKTIONSBEDINGUNGEN
.
47
4.1.1.1.
ERGEBNISSE
DER
COATINGVERFAHREN
.
47
4.1.1.2.
BLOCKIERUNG
.
49
4.1.1.3.
INKUBATIONSMEDIUM
FUER
STANDARD
UND
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
.
51
4.1.1.4.
EINFLUSS
VON
INKUBATIONSDAUER,
-TEMPERATUR
UND
PLATTENSHAKER
FUER
STANDARD
BZW.
NORMALSEREN
.
51
4.1.1.5.
KONJUGAT
.
54
4.1.1.6.
SUBSTRAT
.
54
4.1.2.
QUALITAETSPARAMETER
.
55
4.1.2.1.
SPEZIFITAET
.
55
4.1.2.2.
WIEDERFINDUNGSRATE
(RECOVERY)
.
56
4.I.2.3.
SENSITIVITAET
.
57
4.1.2.4.
LINEARITAETSBEREICH
(MESSBEREICH)
.
57
4.I.2.5.
PRAEZISION
.
58
4.2.
ERGEBNISSE
ZU
DEN
UNTERSUCHUNGEN
BEI
ELISAS
MIT
TITERBESTIMMUNGEN
.
60
4.2.1.
OPTIMALE
REAKTIONSBEDINGUNGEN
.
60
4.2.2.
KONTROLLEN
.
64
4.2.3.
QUALITAETSPARAMETER
.
65
4.3.
ERGEBNISSE
ZU
METHODISCHEN
UNTERSUCHUNGEN
MIT
DEM
LAL-TEST
.
67
4.3.1.
AUSWAHL
DES
TESTSYSTEMS
.
67
4.3.2.
STANDARDKURVEN
.
68
4.3.2.I.
STANDARDTEST
.
68
4.3.2.2.
LAL-TEST
MIT
HOHER
SENSITIVITAET
.
69
4.4.
ERGEBNISSE
DER
APPLIKATIVEN
UNTERSUCHUNGEN
.
70
4.4.1.
ERGEBNISSE
DER
APPLIKATIVEN
UNTERSUCHUNGEN
IN
BLUTPLASMA,
PERITONEALPUNKTAT,
BAL,
SYNOVIA
UND
KOTWASSER
VON
PFERDEN
.
70
4.4.1.1.
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
EINFLUSS
EINER
FETTANGEREICHERTEN
RATION
AUF
DEN
ENDOTOXIN
GEHALT
SOWIE
DIE
DYNAMIK
VON
IGG-ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
UND
IGG-ANTI
LIPID
A-TITEM
IM
BLUTPLASMA
VON
PFERDEN
.
70
4.4.1.2.
BEZIEHUNGEN
ZWISCHEN
STUTEN
UND
IHREN
FOHLEN
HINSICHTLICH
ENDOTOXIN
UND
IGG
ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
SOWIE
DEM
IGG-ANTI-LIPID
A-TITER
IM
BLUTPLASMA.73
4.4.1.3.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
ENDOTOXIN
UND
IGG-ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
SOWIE
DEM
IGG-ANTI-LIPID
A-TITER
IN
BLUTPLASMA,
PERITONEALPUNKTAT,
BAL,
SYNOVIA
UND
KOTWASSER
VON
EQUINEN
PATIENTEN
DER
MEDIZINISCHEN
UND
CHIRURGISCHEN
KLINIKEN
DER
VETERINAERMEDIZINISCHEN
FAKULTAET
LEIPZIG
.
76
4.4.2.
ERGEBNISSE
DER
APPLIKATIVEN
UNTERSUCHUNGEN
IN
BLUTSEREN
UND
IN
ROHMILCH
VON
RINDERN
.
77
4.4.2.1.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGG
UND
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGG
UND
IGM-ANTI-ENDOTOXIN-TITEM
IM
BLUTSERUM
VON
FAERSEN
NACH
EXPERIMENTELL
INDUZIERTER
ENDOTOXAEMIE
.
77
4.4.2.2.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGG
UND
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGG
UND
IGM-ANTI-ENDOTOXIN-TITEM
IM
BLUTSERUM
VON
BULLEN
BEI
AKUTEM
HUNGER
ZUSTAND
.
81
4.4.2.3.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGM-ANTI
ENDOTOXIN-TITEM
IN
ROHMILCH
BEI
FETTANGEREICHERTER
RATION
.
83
5.
DISKUSSION
.
88
5.1.
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
ZU
DEN
METHODISCHEN
UNTERSUCHUNGEN
.
88
5.2.
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
ZU
DEN
APPLIKATIVEN
UNTERSUCHUNGEN
.
89
5.2.1.
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
DER
APPLIKATIVEN
UNTERSUCHUNGEN
IN
BLUTPLASMA,
PERITONEALPUNKTAT,
BAL,
SYNOVIA
UND
KOTWASSER
VON
PFERDEN
.
'.
.
89
5.2.1.1.
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
EINFLUSS
EINER
FETTANGEREICHERTEN
RATION
AUF
DEN
ENDOTOXIN
GEHALT
SOWIE
DIE
DYNAMIK
VON
IGG-ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
UND
IGG-ANTI
LIPID
A-TITEM
IM
BLUTPLASMA
VON
PFERDEN
.
89
5.2.1.2.
BEZIEHUNGEN
ZWISCHEN
STUTEN
UND
IHREN
FOHLEN
HINSICHTLICH
ENDOTOXIN
UND
IGG
ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
SOWIE
DEM
IGG-ANTI-LIPID
A-TITER
IM
BLUTPLASMA.,92
5.2.1.3.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
ENDOTOXIN
UND
IGG-ANTI-ENDOTOXIN-KONZENTRATIONEN
SOWIE
DEM
IGG-ANTI-LIPID
A-TITER
IN
BLUTPLASMA,
PERITONEALPUNKTAT,
BAL,
SYNOVIA
UND
KOTWASSER
VON
EQUINEN
PATIENTEN
DER
MEDIZINISCHEN
UND
CHIRURGISCHEN
KLINIKEN
DER
VETERINAERMEDIZINISCHEN
FAKULTAET
LEIPZIG
.
94
5.2.2.
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
DER
APPLIKATIVEN
UNTERSUCHUNGEN
IN
BLUTSEREN
UND
IN
ROHMILCH
VON
RINDERN
.
98
5.2.2.1.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGG
UND
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGG
UND
IGM-ANTI-ENDOTOXIN-TITEM
IM
BLUTSERUM
VON
FAERSEN
NACH
EXPERIMENTELL
INDUZIERTER
ENDOTOXAEMIE
.
98
5.2.2.2.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGG
UND
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGG
UND
IGM-ANTI-ENDOTOXIN-TITEM
IM
BLUTSERUM
VON
BULLEN
BEI
AKUTEM
HUNGER
ZUSTAND
.
101
5.2.2.3.
DYNAMIK
VON
ENDOTOXINKONZENTRATIONEN,
IGM-ANTI-LIPID
A
UND
IGM-ANTI
ENDOTOXIN-TITEM
IN
ROHMILCH
BEI
FETTANGEREICHERTER
RATION
.
104
6.
ZUSAMMENFASSUNG.
.
106
6.1.
SUMMARY
.
108
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
110
ANHANG |
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| spelling | Röpke, Maik Verfasser aut Nachweis von Endotoxin, anti-Lipid-A- und anti-Endotoxin-Antikörpern in Körperflüssigkeiten von Pferd und Rind eingereicht von Maik Röpke 2000 109, [36] S. graph. Darst. : 21 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Leipzig, Univ., Diss., 2000 (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=009514617&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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