Rasterkraftmikroskopie und Laser-gestützte Mikromanipulation - Einsatzmöglichkeiten in der molekularen Zytogenetik:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
München
Diss.-Verl. NG-Kopierladen
2001
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: München, Univ., Fak. für Geowiss., Diss., 2001 |
| Beschreibung: | 107 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
DANKSAGUNG
3
1.
ZUSAMMENFASSUNG
4
2.
ABKUERZUNGEN
6
3.
EINLEITUNG
8
4.
METHODEN
11
4.1.
DAS
RASTERKRAFTMIKROSKOP (RKM)
11
4.1.1.
DAS
FUNKTIONSPRINZIP
DES
RKM
12
4.1.2.
DIE BILDENTSTEHUNG
IM
RKM
16
4.1.3.
VERSCHIEDENE
BETRIEBSMOEGLICHKEITEN
DES
RKM
19
4.1.4.
BIOLOGISCHE
ANWENDUNG
DER
RASTERKRAFTMIKROSKOPIE
21
4.1.5.
DAS
RASTERKRAFTMIKROSKOP
ALS
MIKROMANIPULATOR
23
4.1.6.
VERWENDETE RASTERKRAFTSPITZEN
23
4.1.7.
VOLUMENMESSUNG
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
IN
FLUESSIGKEIT
MIT
DEM
RKM
24
4.1.8.
MIKRODISSEKTION
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
MITTELS
RKM
24
4.2.
DAS
LASER-GESTUETZTE
MIKROSKOP
25
4.2.1.
LASER
ALS
WERKZEUG
ZUR
MIKROMANIPULATION
25
4.2.2.
MIKRODISSEKTION
MIT
HILFE
DES
LASER-GESTUETZTEN
MIKROSKOPS
26
4.2.3.
PRINZIP
DER
LASER-MIKROSTRAHL-MANIPULATION
(LMM)
27
4.2.4.
PRINZIP
DES
LASER
PRESSURE
CATAPULTING
(LPC)
28
4.3.
DIE
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
30
4.4.
KONTROLLAUFNAHMEN
MIT
DEM ELEKTRONENMIKROSKOP
30
4.5.
VERWENDETE COMPUTERSOFTWARE
31
4.6.
ALLGEMEINE HANDHABUNG
DER
NUKLEINSAEUREN
31
4.6.1.
ETHANOLFAELLUNG
31
4.6.2.
TRENNUNG
DURCH
EIN
NATIVES
AGAROSEGEL
31
4.7.
GEWINNUNG
UND
VORBEREITUNG
DER
CHROMOSOMENPRAEPARATE
ZUR
MIKROSKOPIE
UND
MANIPULATION
32
4.7.1.
PRIMAERE
LYMPHOZYTENKULTUR
32
4.7.2.
PRIMAERE
FIBROBLASTENKULTUR
32
4.7.3.
PRAEPARATION
DER
METAPHASECHROMOSOMEN
32
4.7.4.
VORBEREITUNG
DER
MEMBRAN
FUER
DAS
LASER-GESTUETZTE
MIKROSKOP
33
4.7.5.
GIEMSA-FAERBUNG
UND
GTG-BAENDERUNG
DER
CHROMOSOMENPRAEPARATE
34
4.7.6.
CHROMOSOMENSPEZIFISCHE
VORHYBRIDISIERUNG
FUER
DIE
MIKRODISSEKTION
MITTELS
RKM
34
4.8.
ENZYMATISCHER
VERDAU
DER
CHROMOSOMENFRAGMENTE
NACH
DER
MIKRODISSEKTION
35
4.8.1.
TOPOISOMERASEL-VERDAU
35
4.8.2.
PROTEINASEK-VERDAU
35
INHALTSVERZEICHNIS
4.9.
DEGENERATED
OLIGONUCLEOTID
PRIMED-POLYMERASEKETTENREAKTION
(DOP-PCR)
36
4.9.1.
PRIMAERE
DOP-PCR
36
4.9.2.
SEKUNDAERE
DOP-PCR
38
4.9.3.
DOP-PCR
FUER
DIE
MIKRODISSEKTION
MIT
DEM
LASER-GESTUETZTEN
MIKROSKOP
39
4.10.
DIE
FLUORESZENZ-IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
(FISH)
39
5.
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSION
42
5.1.
RASTERKRAFTMIKROSKOPISCHE
ABBILDUNGEN
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
AN
LUFT
42
5.2.
RASTERKRAFTMIKROSKOPISCHE
ABBILDUNGEN
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
IN
FLUESSIGKEIT
48
5.3.
KARYOTYPISIERUNG
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
MIT
DEM
RKM
51
5.4.
MIKRODISSEKTION
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
MIT
DEM
RKM
55
5.4.1.
MIKRODISSEKTION
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
AN
LUFT
56
5.4.1.1.
MIKRODISSEKTION
OHNE
VERTIKALE
MODULATION
DER
BALKENFEDER
56
5.4.1.2.
MIKRODISSEKTION
MIT
VERTIKALER
MODULATION
DER
BALKENFEDER
58
5.4.2.
ABLAUF
DER
MIKRODISSEKTION
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
MIT
DEM RKM
AN
LUFT
62
5.4.3.
MIKRODISSKETION
VON
METAPHASECHROMOSOMEN
IN
FLUESSIGKEIT
66
5.5.
FLUORESZENZ
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
DER
ISOLIERTEN
PROBEN
MIT
DEM
RKM
70
5.6.
ANALYSE
DER
LASER-GESTUETZTEN MIKRODISSEKTION
MIT
DEM
RKM
75
5.7.
ANALYSE
DES
LASER
PRESSURE
CATAPULTING
MIT
DEM
RKM
79
5.8.
FLUORESZENZ
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
DER
ISOLIERTEN
PROBEN
NACH
LASER
PRESSURE
CATAPULTING
84
5.8.1.
MENSCHLICHES
METAPHASECHROMOSOM
84
5.8.2.
METAPHASECHROMOSOMEN
VON
GALLUS
DOMESTICUS
85
5.9.
AUSBLICK
89
6.
LITERATUR
90
7.
VEROEFFENTLICHUNGEN
100
8.
LEBENSLAUF
103
9.
ANHANG:
MATERIAL
104
2 |
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