Die Expression von Vimentin-Protein und -mRNA in der humanen Primärzellkultur von Muskelgewebe und bei kindlichen neuromuskulären Erkrankungen:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
2
AUFBAU
UND
ZIEL
DER
ARBEIT
4
3
LITERATURUEBERSICHT
5
3.1
VIMENTIN
.
5
3.1.1
VIMENTIN
ALS
INTERMEDIAERFILAMENT
UND
TEIL
DES
ZYTOSKELETTES
.
5
3.1.1.1
ZUSAMMENSETZUNG
DES
ZYTOSKELETTES
.
5
3.1.1.2
EINTEILUNG
DER
INTERMEDIAERFILAMENTE
.
6
3.1.1.3
STRUKTUR
UND
AUFBAU
DER
INTERMEDIAERFILAMENTE
.
6
3.1.1.4
POLYMERISATION
DER
INTERMEDIAERFILAMENTE
.
7
3.1.1.5
BIOCHEMISCHE
UND
PHYSIOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
.
8
3.1.1.6
MORPHOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
-
ZYTOPLASMATISCHES
NETZWERK
9
3.1.2
VIMENTM-GEN
.
9
3.1.3
VIMENTIN-MRNA
.
10
3.1.4
VIMENTIN-PROTEIN
.
10
3.1.5
REGULATION
DER
GENEXPRESSION
UND
PROTEINEXPRESSION
.
12
3.2
DER
GESUNDE
SKELETTMUSKEL
.
14
3.2.1
MORPHOLOGISCHE
MERKMALE
REIFEN
SKELETTMUSKELS
.
14
3.2.2
VERLAUF
DER
NORMALEN
MUSKELENTWICKLUNG
.
15
3.2.3
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
NORMALE
MUSKELENTWICKLUNG
-
DIE
ROLLE
VON
INNERVATION
UND
DENERVATION
.
16
3.3
REGENERATION
VON
MUSKELGEWEBE
.
18
3.3.1
VERLAUF
DER
MUSKELREGENERATION
.
18
3.3.2
INNERVATION
UND
ANDERE
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
MUSKELREGENERATION
19
3.3.3
UNTERSCHIED
ZWISCHEN
REGENERIERTEM
UND
FETAL
AUSGEREIFTEM
MUSKEL
.
20
3.4
REGENERATMARKER
.
21
II
INHALTSVERZEICHNIS
3.5
MYOPATHOLOGIE
.
22
3.5.1
EINTEILUNG
DER
MUSKELKRANKHEITEN
.
22
3.5.2
DYSTROPHE
MYOPATHIEN
.
22
3.5.2.1
MUSKELDYSTROPHIE
DUCHENNE
.
22
3.5.2.2
CONGENITALE
MUSKELDYSTROPHIE
.
24
3.5.3
CONGENITALE
STRUKTURMYOPATHIEN
.
24
3.5.3.1
ZENTRONUKLEAERE
MYOPATHIE
.
25
3.5.4
SPINALE
MUSKELATROPHIE
.
26
3.5.5
RHABDOMYOLYSE
.
27
4
MATERIAL
UND
METHODEN
29
4.1
UNTERSUCHTE
GEWEBEPROBEN
.
29
4.1.1
ZELLKULTUREN
.
29
4.1.2
PATIENTENKOLLEKTIV
.
30
4.2
METHODEN
.
30
4.2.1
PRIMAERZELLKULTUREN
VON
MUSKELGEWEBE
.
30
4.2.2
AUFBEREITUNG
DER
KRYOSTATSCHNITTE
VON
MUSKELGEWEBE
.
33
4.2.3
IMMUNHISTOCHEMIE
.
33
4.2.3.1
ANTIKOERPER
FUER
DIE
IMMUNHISTOCHEMIE
.
33
4.2.3.2
PRINZIP
DER
INDIREKTEN
PEROXIDASETECHNIK
.
33
4.2.3.3
FAERBE
VERFAHREN
.
35
4.2.4
NICHT-RADIOAKTIVE
IN-SITU
HYBRIDISIERUNG:
.
35
4.2.4.1
VIMENTIN-PROBE
FUER
DIE
IN-SITU
HYBRIDISIERUNG
.
36
4.2.4.2
HERSTELLUNG
DER
SONDE
IN
EINER
MAXIPRAEPARATION
.
36
4.2.4.3
YYRANDOM
PRIMED
LABELING
"
DER
PROBE
.
38
4.2.4.4
HYBRIDISIERUNG
DER
KRYOSTATSCHNITTE
UND
KULTUREN
.
41
4.2.4.5
KONTROLLEN
.
43
4.2.4.6
SENSITIVITAET
UND
SPEZIFITAET
DER
HYBRIDISIERUNGSREAKTION
.
.
45
4.3
LICHTMIKROSKOPISCHE
AUSWERTUNG
.
46
5
ERGEBNISSE
47
5.1
ZELLKULTUR
.
47
5.1.1
NICHT-INNERVIERTE
ZELLKULTUR
.
47
5.1.2
INNERVIERTE
ZELLKULTUR
.
54
5.2
NORMALES
MUSKELGEWEBE
.
58
INHALTSVERZEICHNIS
III
5.3
MYOPATHIEN
.
60
5.3.1
MUSKELDYSTROPHIE
DUCHENNE
.
61
5.3.1.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
61
5.3.1.2
FALLDARSTELLUNGEN
.
64
5.3.2
CONGENITALE
MUSKELDYSTROPHIE
.
68
5.3.2.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
68
5.3.2.2
FALLDARSTELLUNG
.
70
5.3.3
ZENTRONUKLEAERE
MYOPATHIE
.
71
5.3.3.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
71
D.3.3.2
FALLDARSTELLUNGEN
.
73
5.3.4
SPINALE
MUSKELATROPHIE
.
75
5.3.4.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
75
5.3.4.2
FALLDARSTELLUNGEN
.
78
5.3.5
RHABDOMYOLYSE
.
82
5.3.5.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
82
5.3.5.2
FALLDARSTELLUNGEN
.
85
6
DISKUSSION
87
6.1
DIE
VIMENTIN-EXPRESSION
IN
DER
HUMANEN
PRIMAERZELLKULTUR
VON
MUSKELGEWEBE
87
6.1.1
VIMENTIN-PROTEIN
.
87
6.1.2
PARALLELES
VERHALTEN
VON
MRNA
UND
PROTEIN-EXPRESSION
.
91
6.1.3
EINFLUSS
DER
INNERVATION/DENERVATION
AUF
DIE
VIMENTIN-EXPRESSION
IN
DER
MUSKELZELLKULTUR
.
94
6.2
ENTSPRECHUNGEN
ZWISCHEN
DEM
ZELLKULTUR-MODELL
UND
DER
SITUATION
IN-VIVO
95
6.3
DIE
VIMENTIN-EXPRESSION
BEI
NEUROMUSKULAEREN
ERKRANKUNGEN
.
96
6.3.1
VIMENTIN
ALS
REGENERATMARKER
BEI
NEUROMUSKULAEREN
ERKRANKUNGEN
96
6.3.2
VIMENTIN
IM
VERHAELTNIS
ZU
ANDEREN
REGENERATMARKEM
.
98
6.3.3
INTERPRETATION
DER
VIMENTIN-EXPRESSION
BEI
KINDLICHEN
UND
FRUEHKIND
LICHEN,
NEUROMUSKULAEREN
ERKRANKUNGEN
.
100
6.4
VIMENTIN-EXPRESSION
BEI
DER
SPINALEN
MUSKELATROPHIE
.
102
6.5
DER
PROTEIN/MRNA-VERGLEICH
FUER
DIE
HISTOLOGISCHE
BEURTEILUNG
ENTWICK
LUNGSREGULIERTER
PROTEINE
.
105
7
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
107
LITERATURVERZEICHNIS
109
FV
INHALTSVERZEICHNIS
A
120
A.L
ABKUERZUNGEN
.
120
A.2
MEDIEN
FUER
DIE
ZELLKULTUR
.
121
A.3
LOESUNGEN
FUER
DIE
MAXIPRAEPARATION
.
122
A.4
HYBRIDISIERUNGSMIX
.
123
A.5
PUFFER
.
123 |
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