Charakterisierung und Kristallisation des peripheren Arms von Komplex I aus der Neurospora crassa-Mutante nuo20.9:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
1
2.
EINLEITUNG
2.1
DAS
SYSTEM
DER
OXIDATIVEN
PHOSPHORYLIERUNG
3
2.2
DIE
NADH:UBICHINON
OXIDOREDUKTASE
(KOMPLEX
I)
5
2.3
SUBKOMPLEXE
DER
NADH:UBICHINON
OXIDOREDUKTASE
9
2.4
UV-VIS-SPEKTROSKOPISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DES
KOMPLEX
I
12
2.5
KRISTALLISATION
VON
PROTEINEN
15
2.6
THEMA
DIESER
ARBEIT
18
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
3.1
ANZUCHT
VON
NEUROSPORA
CRASSA
20
3.2
PRAEPARATION
DER
MITOCHONDRIENMEMBRANEN
AUS
N.
CRASSA
20
3.3
ISOLIERUNG
DES
KOMPLEX
I
AUS
N.
CRASSA
WILDTYP
21
3.4
ISOLIERUNG
DES
PERIPHEREN
ARMS
VON
KOMPLEX
I
AUS
DER
N.
CRASSA-MUTANTE
NUO20.9
22
3.5
ESR-SPEKTROSKOPIE
23
3.6
UV-VIS-SPEKTROSKOPIE
24
3.6.1
DIE
POTENTIALEINGESTELLTE
LACTATDEHYDROGENASE-REAKTION
24
3.6.2
REDOXTITRATION
MIT
DER
LDH-REAKTION
25
3.6.3
UNTERSUCHUNG
DER
REDUKTIONSKINETIK
MIT
DER
HYDROXYBUTYRATDEHYDROGENASE-REAKTION
25
3.7
FAELLUNGSSTUDIEN
DES
PERIPHEREN
ARMS
27
3.8
KRISTALLISATION
DES
PERIPHEREN
ARMS
27
3.9
VERSCHIEDENE
ANALYTISCHE
METHODEN
28
4.
ERGEBNISSE
4.1
ISOLIERUNG
DES
KOMPLEX
I
AUS
N.
CRASSA
WILDTYP
31
4.2
ISOLIERUNG
DES
PERIPHEREN
ARMS
VON
KOMPLEX
I
AUS
DER
N.
CRASSA-MUTANTE
NUO20.9
33
4.3
VERGLEICH
DER
ESR-SPEKTROSKOPISCH
DARSTELLBAREN
FES-ZENTREN
VON
KOMPLEX
I
UND
PERIPHEREM
ARM
37
4.4
VERGLEICH
DER
UV-VIS-SPEKTROSKOPISCHEN
EIGENSCHAFTEN
DES
WILDTYP
KOMPLEX
I
UND
DES
PERIPHEREN
ARMS
AUS
DER
MUTANTE
NUO20.9
39
4.4.1
VERGLEICH
DER
LUFTOXIDIERTEN
ABSOLUTSPEKTREN
39
4.4.2
DIE
POTENTIALEINGESTELLTE
LDH-REAKTION
41
4.4.3
REDOXTITRATION
DER
FES-ZENTREN
N-6A
UND
N-6B
MIT
DER
LDH-REAKTION
45
4.4.4
REDUKTION
VON
KOMPLEX
I
UND
PERIPHEREM
ARM
MIT
DER
HYDROXYBUTYRATDEHYDROGENASE-REAKTION
48
4.5
KRISTALLISATION
DES
PERIPHEREN
ARMS
51
5.
DISKUSSION
5.1
IST
DER
VERSUCH
,
DEN
PERIPHEREN
ARM
VON
KOMPLEX
I
ZU
KRISTALLISIEREN,
56
GERECHTFERTIGT?
5.2
PRAEPARATION
DES
PERIPHEREN
ARMS
57
5.3
KRISTALLISATION
DES
PERIPHEREN
ARMS
60
6.
LITERATUR
62 |
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