Charakterisierung variabler Oberflächenproteine von Mycoplasma penetrans:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2001
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
V
I
EINLEITUNG
1
1
MYKOPLASMEN
1
1.1
ADHAERENS
AN
WIRTSZELLEN
1
1.2
INVASION
DER
MYKOPLASMEN
IN
WIRTSZELLEN
3
2
ANTIGENVARIATION
4
2.1
GENFAMILIEN
5
2.2
REGULATION
DER
ANTIGENVARIATION
7
2.3
FUNKTION
DER
ANTIGENVARIATION
8
3
MYCOPLASMA
PENETRANS
9
3.1
ADHAERENS
UND
INVASIONSVERHALTEN
VON
M.
PENETRANS
11
3.2
DIE
ZELLMEMBRAN
VON
M.
PENETRANS
12
3.3
M.
PENETRANS
UND
AIDS
14
4
ZIELSTELLUNG
DER
ARBEIT
15
II
MATERIAL
UND
METHODEN
17
1
UEBERSICHT
DER
VERWENDETEN
METHODEN,
ARBEITSSTRATEGIE
17
2
ORGANISMEN
UND
PLASMIDE
18
3
NAEHRMEDIEN
19
3.1
MYKOPLASMEN-MEDIUM
19
3.2
LURIA-BERTANI-MEDIUM
19
3.3
HYBRIDOMZELLMEDIUM
19
4
ANZUCHT
UND
ZELLERNTE
20
5
NUKLEINSAEUREN
20
5.1
PLASMIDE
20
5.2
PRIMER
20
6
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
23
6.1
IMMUNISIERUNG
VON
MAEUSEN
23
6.2
FUSIONIERUNG
DER
MILZSPLENOZYTEN
MIT
DEN
MYELOMZELLEN
23
63
AUSTESTUNG
DER
ANTIKOERPERPRODUKTION
24
INHALTSVERZEICHNIS
IN
19
AUFARBEITUNG
VON
DNA
40
19.1
ENZYMATISCHE
FRAGMENTIERUNG
VON
DNA
MIT
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
40
19.2
LIGATION
41
19.2.1
LIGATION
IN
PUCL
8
ODER
PQE30
41
19.2.2
LIGATION
MIT
DEM
TOPO
TA-CLONING-KIT
(INVITROGEN)
41
20
TRANSFORMATION
IN
E.
COLI
41
20.1
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
ZELLEN
41
20.2
TRANSFORMATION
42
20.3
TRANSFORMATION
MIT
DEM
TOPO
TA-CLONING-KIT
(INVITROGEN)
42
21
DNA-DNA-HYBRIDISIERUNG
42
21.1
TRANSFER
VON
NUKLEINSAEUREN
AUF
NYLONMEMBRANEN
IM
SOUTHEM-BLOT
42
21.2
5
'-MARKIERUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDEN
MIT
32
P
43
21.3
HYBRIDISIERUNG
MIT
32
P-MARKIERTEN
OLIGONUKLEOTIDEN
43
22
DNA-SEQUENZIERUNG
44
22.1
SEQUENZIERUNGSREAKTION
44
22.2
HERSTELLUNG
DER
POLYACRYLAMID-GELE
FUER
DIE
SEQUENZIERUNG
44
23
EXPRESSION
VON
M.
PENETRANS
PROTEINEN
IN
E.
COLI
M1S
45
23.1
AUSTAUSCH
EINES
NUKLEOTIDS
45
23.2
KLONIERUNG
47
23.3
EXPRESSION
48
23.4
ISOLIERUNG
VON
REKOMBINANTEN
PROTEINEN
MIT
HILFE
EINES
HISTIDINANKERS
48
24
EPITOPCHARAKTERISIERUNG
(PEPTIDSPOTANALYSE)
49
24.1
VORBEREITUNG
DER
AMINOSAEUREN
50
24.2
SYNTHESEZYKLUS
50
24.3
IMMUNREAKTION
MIT
PEPTIDEN
ALS
ANTIGENE
51
ID
ERGEBNISSE
52
1
ANTIKOERPERKINETIK
EINES
MIT
M.
PENETRANS
INFIZIERTEN
PATIENTEN
52
2
UNTERSUCHUNG
DES
PROTEINMUSTERS
VON
M.
PENETRANS
MIT
DEM
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
1E5
55
3
ETABLIERUNG
VON
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
GEGEN
DIE
HAUPTANTIGENE
VON
M.
PENETRANS
57
4
UNTERSUCHUNG
DER
VARIATION
VON
OBERFLAECHENPROTEINEN
59
4.1
IDENTIFIZIERUNG
VARIABLER
OBERFLAECHENPROTEINE
VON
M.
PENETRANS
59
4.2
DIE
VARIATIONSFTEQUENZ
VARIABLER
OBERFLAECHENMOLEKUELE
61
4.3
LOKALISATION
VON
P34B
UND
P38
AUF
DER
ZELLOBERFLAECHE
VON
M.
PENETRANS
61
4.4
IN
VITRO
PHASENVARIATION
VON
LAMP'S
IN
KLONALEN
POPULATIONEN
VON
M.
PENETRANS
63
INHALTSVERZEICHNIS
IV
5
CHARAKTERISIERUNG
AUSGEWAEHLTER
VARIABLER
PROTEINE
VON
M.
PENETRANS
66
5.1
ABBAU
MIT
PROTEINASE
K,
CARBOXYPEPTIDASE
Y
ODER
TRYPSIN
66
5.2
GASCHROMATOGRAPHIE
ZUM
NACHWEIS
VON
LIPIDEN
67
5.3
BESTIMMUNG
DES
ISOELEKTRISCHEN
PUNKTES
DER
LAMP'S
MIT
DER
2D-GELELEKTROPHORESE
68
5.4
SEQUENZIERUNG
VON
PROTEINEN
69
6
MOLEKULARBIOLOGISCHE
CHARAKERISIERUNG
DER
VARIABLEN
LIPOPROTEINE
70
6.1
IDENTIFIZIERUNG
VON
LIPOPROTEINGENEN
MIT
HILFE
VON
DEGENERIERTEN
PRIMERN
70
6.2
SOUTHEM-BLOT-HYBRIDISIERUNG
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
VON
LIPOPROTEINGENEN
73
6.3
SEQUENZIERUNG
WEITERER
DNA-ABSCHNITTE
77
6.4
EXPRESSION
AUSGEWAEHLTER
PUTATIVER
LIPOPROTEINE
VON
M.
PENETRANS
IN
E.
COLI
83
7
BESTIMMUNG
DER
MAK
BINDENDEN
EPITOPE
INNERHALB
DER
PROTEINSEQUENZ
84
7.1
EXPRESSION
VERKUERZTER
PROTEINSEQUENZEN
84
7.2
PEPTIDSPOTANALYSE
88
IV
DISKUSSION
90
1
ANPASSUNGSSTRATEGIEN
PATHOGENER
MIKROORGANISMEN
90
2
IMMUNREAKTION
EINES
PATIENTEN
GEGEN
M.
PENETRANS
92
3
ANTIGENVARIATION
VON
M.
PENETRANS
95
4
STRUKTUR
DER
VARIABLEN
PROTEINE
98
4.1
STRUKTUR
AUF
DNA-EBENE
98
4.2
STRUKTUR
AUF
PROTEINEBENE
101
5
FUNKTION
DER
LIPOPROTEINE
102
6
AUSBLICK
104
V
ZUSAMMENFASSUNG
106
VI
LITERATUR
109 |
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