Untersuchungen zur Signaltransduktion bei der Adhärenz und Internalisation von harnwegspathogenen Escherichia coli-Stämmen an humanen Epithelzellen:
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1999
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Beschreibung: | Jena, Univ., Diss., 2000 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1. EINFUEHRUNG ZUM THEMA UND AUFGABENSTELLUNG 1
1.1 HAMWEGSINFEKTIONEN 4
1.1.1 ABWEHRMECHANISMEN DES WIRTES * 5
1.1.2 PRAEDISPOSITION UND INFEKTIONSBEGUENSTIGENDE FAKTOREN 6
1.2 E.COLI ALS HAMWEGSPATHOGENER ERREGER 7
1.2.1 BAKTERIELLE PATHOGENITAETSFAKTOREN 8
1.2.2 VIRULENZFAKTOREN VON E.COLI 8
1.2.2.1 GEISSELN (H-ANTIGEN) 8
1.2.2.2 O-ANTIGEN ' 9
1.2.2.3 KAPSELANTIGEN (K- ANTIGEN) 9
1.2.2.4 FIMBRIENANTIGEN (F-ANTIGEN) 10
1.2.2.4.1 TYP 1 FIMBRIEN 10
1.2.2.4 2 P-FIMBRIEN 11
1.2.2.4 3 S- UND FIC-FIMBRIEN 12
1.2.2.5 HAEMOLYSIN 12
1.2.3 SEROGRUPPEN UND SERUMRESISTENZ 13
1.3 ADHAERENZ AN EPITHELIALEN ZELLEN 14
1.4 INTEMALISATION 16
1.5 HEMMUNG DER INTEMALISATION VON E.COLI 19
1.5.1 TYRPHOSTINE 19
1.5.2 WORTMANNIN 21
1.6 EGF-REZEPTOR 22
2. MATERIAL UND METHODEN 23
2.1 ZELLKULTUREN 23
2.2 VERWENDETE ESCHERICHIA COLI-STAEMME 25
2.3 VERSUCHSPLANUNG UND INFEKTION DER ZELLEN 26
2.3.1 VORBEHANDLUNG DER ZELLEN 26
2.3.2 INFEKTIONSANSAETZE 27
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.3.3 ZUSATZ VON EGF, TYRPHOSTINEN UND WORTMANNIN 27
2.3.4 INFEKTION DER ZELLEN 29
2.4 BES
TIMMUNG VON ADHAERENZ UND INTEMALISATION DER E.COLI 29
2.4.1 ADHAERENZ 29
2.4.2 INTEMALISATION 30
2.5 UNTERSUCHUNG DES PHOSPHORYLIERUNGSMUSTERS DURCH AUTORADIOGRAPHIE 31
2.6 UNTERSUCHUNG DES PHOSPHORYLIERUNGSMUSTERS DURCH IMMUNFLUORESZENZ 32
2.6.1 LYSE DER ZELLEN 32
2.6.2 ELEKTROPHORESE 34
2.6.3 BLOTTING UND IMMUNOBLOT 36
2.7 PROTEINBESTIMMUNG 38
2.8 MEMBRANPRAEPARATION 39
3. ERGEBNISSE 41
3.1 UNTERSUCHUNGEN ZUR ABHAENGIGKEIT VON ADHAERENZ UND INTEMALISATION 41
VON E.COLI-STAEMMEN MIT VERSCHIEDENEN VIRULENZFAKTOREN
3.2 UNTERSUCHUNG DES PHOSPHORYLIERUNGSMUSTERS RUHENDER UND 45
INFIZIERTER HEP-2 ZELLEN
3.3 UNTERSUCHUNG DER TYROSINPHOSPHORYLIERUNG INFIZIERTER HEP-2 ZELLEN 50
SOWIE DES EINFLUSSES VON EGF UND TYRPHOSTINEN
3.4 WIRKUNG DES TYRPHOSTINS AG1478 AUF INTEMALISATION UND 57
TYROSINPHOSPHORYLIERUNG
3.5 HEMMUNG DER INTEMALISATION VON E.COLI IN A431-ZELLEN DURCH 61
WORTMANNIN UND AG1478
3.6 FEHLERBETRACHTUNG 66
J
4. DISKUSSION 68
4.1 SIGNALTRANSDUKTION IN INFIZIERTEN ZELLEN 69
4.2 DER EGF-REZEPTOR 70
4.3 VERSUCHSPLANUNG UND VORVERSUCHE 71
4.4 PHOSPHORYLIERUNGSMUSTER RUHENDER INFIZIERTER HEP-2 ZELLEN 72
4.5 INTEMALISATION UND EGF 74
4.6 HEMMUNG DER INTEMALISATION 75
4.6.1 TYRPHOSTINE 75
4.6.2 WORTMANNIN 77
4.6.3 KOMBINATION VON TYRPHOSTIN UND WORTMANNIN 78
4.7 SCHLUSSFOLGERUNGEN 79
4.8 AUSBLICK 82
5. LITERATURVERZEICHNIS ' 84
6
. ANHANG 93
6.1 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 93
6.2 SELBSTAENDIGKEITSERKLAERUNG 95
6.3 ANTEILSERKLAERUNG 96
6.4 DANKSAGUNG 97
LEBENSLAUF 98
7. THESEN
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