Etablierung und Charakterisierung eines Mausmodells für die Helicobacter-pylori-Infektion:
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2000
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| adam_text | Titel: Etablierung und Charakterisierung eines Mausmodells für die Helicobacter-pylori-Infektion
Autor: Janke, Claudia
Jahr: 2000
INHALTSVERZEICHNIS
J___________EINLEITUNG________________________________________________13
2___________LITERATURÜBERSICHT______________________________________15
2.1 Helicobacter (H.) pylori 15
2.1.1 Geschichtlicher Überblick 15
2.1.2 Taxonomie 17
2.1.2.1 Helicobacter Spezies 17
2.1.3 Morphologie, kulturelle und biochemische Charakteristika 19
2.2 Bedeutung der H. pylori Infektion für den Menschen 20
2.2.1 Epidemiologie 20
2.2.2 Virulenz- und Pathogenitätsfaktoren 21
2.2.3 H. pylori assoziierte Erkrankungen 23
2.2.4 Immunologische Reaktionen 25
2.3 Tiermodelle für die H. pylori Infektion 26
2.3.1 Frettchen 27
2.3.2 Schweine 28
2.3.3 Primaten 29
2.3.4 Hunde und Katzen 30
2.3.5 Ratten 30
2.3.6 Gerbil 31
2.3.7 Mäuse 31
2.3.7.1 Ä/e ModeU 31
2.3.7.2 Gaflra^Hri/fton-ähnliche Bakterien 33
2.3.7.3 H. pylori Modell 34
2.4 Geoetische Wirtsfaktoren mit Bedeutung für die/f. |^toi Infektion 35
2.4.1 Mensch 35
2.4.2 Mause 40
44
3.1 ¦ .HJUHJJ WX1« »MUMM ¦^^^.¦»¦»-.J. mm i_____________________________----------------------i--- Material 44
3.1.1 Mäuse 44
3.1.1.1 Verwendete Inzuchtstämme 44
3.1.1.1.1 BALB/cJ 44
3.1.1.1.2 C3H/HeNundC3H/HeJ 45
3.1.1.1.3 C57BL/6J 45
3.1.1.1.4 C57BU6]-IlHf Cg 46
3.1.1.1.5 C.B-n-PrhkT 46
3.1.1.1.6 DBA/2J 47
3.1.1.1.7 FVB/N 47
3.1.1.2 Herkunft 47
3.1.1.3 Haltung im Experiment 48
3.1.1.3.1 Haltung im Trockenbarrieresystem 48
3.1.1.3.2 Isolatorhaltung 49
3.1.2 Bakterien 49
3.1.2.1 Herkunft 49
3.2 Methoden 49
3.2.1 Anzucht und Vennehrung des H. pylori Stammes Sydney 49
3.2.1.1 Katalase-Test 51
3.2.1.2 Oridase-Test 51
3.2.1.3 Urease-Test 51
3.2.1.4 Gram-Präparat 51
3.2.2 Einfrieren und Aufbewahrung des H. pylori Stammes Sydney 51
3.2.3 Herstellung der Inokulationssuspension 52
3.2.4 Bestimmung der koloniebildenden Einheiten (KBE) 53
3.2.5 Bestimmung der Überlebensdauer des ff. pylori Stammes Sydney
in der Inokulationssuspension 53
3.2.6 Versuchsaufbau 53
3.2.6.1 Infektionsdauer: 1 Monat 55
Infektionsdauer. 4 Monate 56
Infektionsdauer: 6 Monate 57
Experimentelle Infektion der Mäuse 57
Postmortale Untersuchung 58
Tötung 58
Sektion 58
Präparation des Magens 58
Bakteriologische Untersuchung des Magens 60
Molekularbiologische Untersuchung des reisolierten
H. pylori Stammes Sydney 61
Histologische Untersuchung des Magens 63
Beurteilung des Grades der H. pylori Stamm Sydney Kolonisation 64
Beurteilung der leukozytären Infiltrationen 65
Statistische Methoden 67
3.2.6.2
3.2.6.3
3.2.7
3.2.8
3.2.8.1
3.2.8.2
3.2.9
3.2.10
3.2.11
3.2.12
3.2.12.1
3.2.12.2
3.2.13
4___________ERGEBNISSE______________________________________________69
4.1 Vorversuche zur Methodik 69
4.1.1 Anzucht des H. pylori Stammes Sydney 69
4.1.2 Ubedebensdauer des//./ yfori Stammes Sydney in der
Inokulationssuspension 69
4.2 Infektionsversueh 70
42.1 Allgemeinbefinden der Mäuse im Verlauf der Infektion 70
4.2.2 Untersuchung der Mäuse bei der Sektion 73
4.3 NachweismethodeD der H. pylori Stamm Sydney Infektion 75
4.3.1 Makroskopische Untersuchung der Mäusemägen 75
4.3.2 Bakteriologische Untersuchung der Mausemägen 75
4 3.2.1 Urease-Sehnelltest (HUT-Test) 75
4.3.2.2 Bakterielle Kultur 75
4.3.3 Molekularbiologische Untersuchung 76
4.3.4 Histologische Untersuchung 77
4.3.4.1 Grad der H. pylori Stamm Sydney Kolonisation 83
4.3.4.2 Grad der leukozytären Infiltrationen 85
4.3.5 Konkordanz, Diskordanz, Sensitivität und Spezifität der
bakteriologischen und histologischen Nachweismethoden 87
4.4 Vergleich des Grade» der H. pylori Kolonisation zwischen
keimfreien und kennbesiedelten Mäusen 89
4.5 Vergleich des Grades der lenkozytären Infiltrationen zwischen
keimfreien und keimbesiedehen Mäusen 90
4.6 Stammesspezifische Unterschiede 91
4.6.1 Stammesspezifische Unterschiede im Grad der H. pylori Kolonisation
des Einmonatsversnches 91
4.6.2 Stammesspezifische Unterschiede im Grad der leakozytären
Inffitratioaen des Einmomtoversuchej 94
4.6.3 Stammesspezifische Unterschiede im Grad der H. pylori Kolonisation
des Viennonatsversnches 95
4.6.4 Stammesspezifische Unterschiede im Grad der leukozytären
Infiltrationen des Viermonatsversuches 98
4.6.5 Stammesspezifische Unterschiede im Grad der H. pylori Kolonisation
des Sechsmonatsversuches 102
4.6.6 Stammesspezifische Unterschiede im Grad der leukozytären
Infiltrationen des Sechsmonatsversuches 104
4.7 Vergleich der leukozytären Infiltrationen zwischen den infizierten
Mäusen und den Kontrollmäusen 107
4.7.1 Einmonatsversuch 107
4.7.2 Viennonatsversuch 111
4.7.3 Sechsmonatsversuch 115
4.8 Zeitlicher Verlauf des Grades der leukozytären Infiltrationen
der infiziertes Mäuse und der KontroUmänse 117
4.9 Zeitlicher Verlauf des Grades der H. pylori Kolonisation
der infizierten Mäuse 126
4.10 Korrelation der KBE/ml der Inokulationssuspension mit dem Grad
der ff. pylori Kolonisation und dem Grad der leukozytären
Infiltrationen 130
4.11 Korrelation des Grades der H. pylori Kolonisation mit dem Grad
der lenkozytären Infiltrationen 131
5___________DISKUSSION________________________________________________133
5.1 Diskussion der Methode 133
5.1.1 Verwendete Mäuseinzuchtstamme 133
5.1.2 Haltung der Mäuse unter verschiedenen hygienischen Bedingungen 136
5.1.3 Versuchsaufbau 137
5.1.4 Überlebensdauer des H. pylori Stammes Sydney in der
Inokulationssuspension 137
5.1.5 Inokulationsdosis 137
5.1.6 H. pylori Stamm Sydney 138
5.1.7 Untersuchung des Magens 139
5.1.7.1 Bakterieller Nachweis von H. pylori SS 139
5.1.7.2 Nachweis von H. pylori SS in histologischen Schnittpräparaten 140
5.1.7.3 Nachweis der leukozytären Infiltrationen in der Magenschleimhaut 141
5.2 Diskussion der Ergebnisse 142
5.2.1 Grad der H. pylori SS Kolonisation 143
5.2.2 Grad der leukozytären Infiltrationen 145
5.2.3 Ausblick 148
6 ZUSAMMENFASSUNG 150
7 SUMMARY 153
8 LITERATURVERZEICHNIS 156
ANHANG
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