Metabolisierung von Arabinose in der Hepatom-tragenden Ratte: Ausschluß der Existenz von Nukleosiddiphosphoarabinose
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
5
1
EINLEITUNG
6
1.1
ARABINOSE
7
1.1.1
STRUKTUR
7
1.1.2
VORKOMMEN
UND
VERHALTEN
IM
SAEUGETIERORGANISMUS
7
1.1.3
BEKANNTE
NUKLEOTIDZUCKER
DER
ARABINOSE
8
1.2
GLYKOSYLIERUNG
VON
PROTEINEN
8
1.2.1
BIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
GLYKOSYLIERUNG
9
1.2.2
GLYKOSYLIERUNG
IN
NEOPLASMEN
9
1.2.3
VOM
MONOSACCHARID
ZUM
NUKLEOTIDZUCKER
,
10
1.3
ZIELSETZUNG
DIESER
ARBEIT
12
2
MATERIAL
UND
METHODEN
13
2.1
MATERIAL
13
2.1.1
GERAETE
13
2.1.2
CHEMIKALIEN
14
2.1.3
RADIOAKTIVITAET
14
2.1.4
ZELLKULTUR
15
2.1.5
VERSUCHSTIERE
UND
HEPATOME
16
2.2
METHODEN
16
2.2.1
RADIOAKTIVITAETSBESTIMMUNG
16
2.2.2
PROTEINBESTIMMUNG
16
2.2.3
ORGANGEWINNUNG
17
2.2.4
EXTRAKTION
WASSERLOESLICHER
METABOLITE
AUS
ORGANEN
UND
ZELLEN
17
2.2.5
ENZYMATISCH
KATALYSIERTE
REAKTIONEN
18
2.2.5.1
ALKALISCHE
PHOSPHATASE
18
2.2.5.2
PHOSPHODIESTERASE
18
2.2.5.2.
1
ENZYMATISCHE
SYNTHESE
VON
L-[L-^C]FUCOSE-L-PHOSPHAT
18
2.2.5.3
ADENOSINDESAMINASE
UND
NUKLEOSIDPHOSPHORYLASE
18
2.2.5.4
SULFATASE
19
2.2.6
CHEMISCHE
METHODEN
19
2.2.6.1
HYDROLYSE
19
2.2.6.2
REDUKTION
VON
MONOSACCHARIDEN
ZU
ZUCKERALKOHOLEN
19
2.2.6.2.
1
REDUKTION
VON
D-[L-^C]ARABINOSE
ZU
D-[L-^C]ARABINITOL
20
2
2.2.6.3
2.2.7
2.2.7.1
2.2.7.2
2.2.7.3
2.2.8
3
3.1
3.2
3.2.1
3.2.1.1
3.2.1.2
3.2.1.3
3.2.1.4
3.2.2
3.3
3.3.1
3.3.2
3.4
3.4.1
3.4.1.1
3.4.1.2
3.4.1.3
3.4.1.4
3.4.2
3.4.2.1
3.4.2.2
3.5
REDUKTION
VOM
ZUCKERLACTON
ZU
MONOSACCHARID
UND
ZUCKERALKOHOL
20
CHROMATOGRAPHISCHE
METHODEN
20
SAX-HPLC
20
HPAEC-PAD
21
HPTLC
23
GC-MS
24
ERGEBNISSE
25
OPTIMIERTE
TRENNUNG
VON
NUKLEOTIDZUCKEM,
NUKLEOSIDPHOSPHATEN
UND
MONOSACCHARIDPHOSPHATEN
DURCH
SAX-HPLC
25
UNTERSUCHUNG
DER
RATTENMILZ
AUF
NUKLEOSIDDIPHOSPHOARABINOSE
27
PRAEPARATIVE
TRENNUNG
DER
NUKLEOTIDZUCKER
DURCH
SAX-HPLC
27
ANALYSE
DER
MONOSACCHARIDBESTANDTEILE
IM
HYDROLYSAT
DURCH
HPAEC-PAD
2
ANALYSE
DER
MONOSACCHARIDHESTANDTEILE
DURCH
GC-MS
31
ANALYSE
DER
NUKLEOTIDBESTANDTEILE
IM
HYDROLYSAT
DURCH
SAX-HPLC
32
NACHGEWIESENE
NUKLEOTIDZUCKER
32
NUKLEOTIDZUCKERKONZENTRATION
IN
DER
MILZ
NACH
IN
VIVO-BELASTUNG
MIT
D-ARABINOSE
33
METABOLISIERUNG
VON
'
4
C-D-ARABINOSE,
^C-ARABINITOL
UND
14
C-RIBITOL
DURCH
PC
12-ZELLEN
34
TRENNUNG
DER
WASSERLOESLICHEN
METABOLITE
DURCH
SAX-HPLC
35
ZEITABHAENGIGKEIT
36
METABOLISIERUNGSSTUDIEN
IN
MORRIS
HEPATOM
7777-ZELLEN
37
METABOLISIERUNG
VON
'
4
C-D-ARABINOSE,
L
4
C-ARABINITOL
IMD
1
4
C-RIBITOL
DURCH
A
UND
N-ZELLEN
37
TRENNUNG
DER
WASSERLOESLICHEN
METABOLITE
DURCH
SAX-HPLC
37
AUSSCHLUSS
DER
EXISTENZ
EINES
RADIOAKTIVEN
NUKLEOTIDZUCKERS
39
IDENTIFIZIERUNG
VON
PEAK
8
ALS
'
4
C-RIBOSE
ENTHALTENES
ATP
39
UNTERSUCHUNG
DER
NICHTIONISCHEN
METABOLITE
DURCH
HPAEC-PAD
39
METABOLISIERUNG
VON
'
4
C-L-ARABINOSE,
L
4
C-ARABINITOL
UND
'
4
C-RIBITOL
DURCH
A
UND
N-ZELLEN
40
TRENNUNG
DER
WASSERLOESLICHEN
METABOLITE
DURCH
SAX-HPLC
40
AUSSCHLUSS
DER
EXISTENZ
EINES
RADIOAKTIVEN
NUKLEOTIDZUCKERS
42
VERHAELTNIS
DER
NUKLEOTIDZUCKER
IN
MH
7777
A
UND
N-ZELLEN,
LEBER
UND
HEPATOM
43
3
3.6
METABOLISIERUNG
VON
^C-L-ARABINOSE,
L^C-ARABINITOL
UND
L^C-RIBITOL
IN
VIVO
44
3.6.1
TRENNUNG
DER
WASSERLOESLICHEN
METABOLITE
DER
LEBER
DURCH
SAX-HPLC
44
3.6.1.1
METABOLITE
MIT
TERMINALEM
PHOSPHATREST
46
3.6.1.1.1
IDENTIFIZIERUNG
DER
METABOLITE
DURCH
HPAEC-PAD
46
3.6.1.2
METABOLITE
MIT
PHOSPHORSAEUREANHYDRIDBINDUNG
47
3.6.1.3
HYDROLYSESENSIBLE
METABOLITE
49
3.6.1.4
NICHTIONISCHE
METABOLITE
50
3.6.1.5
ZUSAMMENFASSUNG
DER
PEAKIDENTIFIZIERUNG
AUS
3.6.1
50
3.6.2
SAX-HPLC
VOM
HEPATOM
51
3.6.3
BESTIMMUNG
DER
PROTEINGEBUNDENEN
AKTIVITAET
IM
SERUM
51
3.7
REINIGUNG
VON
L^C-D-ARABINOSE
52
3.8
METABOLISIERUNG
VON
^C-D-ARABINOSE
IN
VIVO
53
3.8.1
TRENNUNG
DER
WASSERLOESLICHEN
METABOLITE
DURCH
SAX-HPLC
AM
BEISPIEL
DER
LEBER
53
3.8.1.1
ANALYSE
DER
NICHTIONISCHEN
METABOLITE
DURCH
HPAEC-PAD
54
3.8.1.2
METABOLITE
MIT
TERMINALEM
PHOSPHATREST
54
3.8.1.2.1
IDENTIFIZIERUNG
DER
METABOLITE
DURCH
HPAEC-PAD
55
3.8.1.3
AUSSCHLUSS
VON
METABOLITEN
MIT
PHOSPHORSAEUREANHYDRIDBINDUNG
55
3.8.1.4
IDENTIFIZIERUNG
DES
METABOLITEN
ARABONSAEURE
55
3.8.1.4.1
ANALYSE
DER
REDUKTIONSPRODUKTE
VON
PEAK
2
DURCH
HPAEC-PAD
57
3.8.2
EIGENSCHAFTEN
EINES
IM
HEPATOM
DETEKTIERBAREN
METABOLITEN
58
3.8.3
VERGLEICH
WASSERLOESLICHER
METABOLITE
IN
ANDEREN
ORGANEN
58
3.8.4
AUSSCHLUSS
LIPOPHILER
METABOLITE
IN
LEBER,
HEPATOM
UND
NIERE
DURCH
HPTLC
59
4
4
DISKUSSION
60
4.1
NUKLEOSIDDIPHOSPHOARABINOSE
60
4.2
NACHWEIS
VON
I^C-D-ARABINOSEMETABOLITEN
63
4.2.1
ARABONSAEURE
63
4.2.2
ARABINITOL
64
4.2.3
ARABINITOLMONOPHOSPHAT
66
4.2.4
ARABINOSEMONOPHOSPHAT
67
4.2.5
ANDERE
METABOLITE
67
4.3
METALLISIERUNG
VON
^C-L-ARABINOSE
68
4.4
METABOLISIERUNG
VON
L^C-RIBITOL
69
4.5
UDP-N-ACETYLHEXOSAMINE
UND
DIFFERENZIERUNG
70
5
ZUSAMMENFASSUNG
71
6
LITERATUR
73
ANHANG
77
LEBENSLAUF
77
DANKSAGUNG
78 |
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