Etablierung einer Zellbank kryokonservierter porkiner Hepatozytenkulturen:
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Veröffentlicht: |
2001
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INHALT
1
EINLEITUNG
_
_
_
6
2
MATERIAL
UND METHODIK
.
11
2.1
ZELLISOLATION
.
11
2.2
K
ULTURTECHNIK
.
14
2.3
I
NKUBATION
MIT
D
IMETHYLSULFOXID
(MEJSO)
.
17
2.4
G
EFRIERPROTOKOLL
UND
T
EMPERATURREGISTRIERUNG
.
18
2.5
V
ERSUCHSGRUPPEN
UND
VERWENDETE
G
EFRIERPROGRAMME
.
21
25.7
LINEARES
GEFTIERPROGRAMM
(10C/MIN)
.
22
2.5.2
ADAPTIERTES
GEFRIERPROGRAMM
.
23
2.6
AUFTAUEN
DER
K
ULTUREN
.
25
2.7
H
ISTOLOGISCHE
U
NTERSUCHUNGEN
.
26
2.7.1
LICHTMIKROSKOPIE
.
26
2.7.2
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
26
2.
8
B
EURTEILUNG
DER
Z
ELLINTEGRITAET
UND
-F
UNKTIONALITAET
ANHAND
TYPISCHER
P
ARAMETER
.
27
2.8.1
LDH-FREISETZUNG
IN
DAS
KULTURMEDIUM
.
27
2.8.2
ALBUMINPRODUKTION.
.
28
2.8.3
CYTOCHROM
P
4501
AI
AKTIVITAET:
DEETHYLIERUNG
VON
7-ETHOXYCUMARIN
.
28
2.8.4DNA-GEHALT
.
29
2.9
A
USWERTUNG
UND
STATISTISCHE
M
ETHODEN
.
29
3
E
]RGEBNISS
E
-----
R
-
-.
I
.
III
YY
I
-
II
.
-'
M
.
IN
.
'
ITI
I'-T
IIII
II
II,
30
3.1
V
ORVERSUCHE
ZUR
O
PTIMIERUNG
DER
K
ONSERVIERUNGSMETHODIK
.
30
3.1.1
BESTIMMUNG
DES
GEFRIERPUNKTS
DES
KULTURSYSTEMS
.
30
3.1.2
LINEARES
GEFRIERPROGRAMM
.
31
3.1.2.1
MORPHOLOGIE
.
32
3.1.2.2
ZELLFUNKTION
.
33
3.1.3
EINFLUSS
EINER
PLATEAUPHASE
.
37
3.1.4
EINFLUSS
DER
POSITIONIERUNG
DER
KULTUREN
INNERHALB
DES
METALLTRAEGERS
.
39
3.2
E
RGEBNISSE
DER
Z
ELLBANK
-L
AGERUNG
.
43
3.2.1
MORPHOLOGIE
DER
ZELLEN
.
43
3.2.2
BEURTEILUNG
DER
ZELLINTEGRITAET
UND
-FUNKTIONALITAET
.
48
3.2.2.1
LDH-FREISETZUNG
IN
DEN
UEBERSTAND
.
48
3.2.2.2
ALBUMINSEKRETION
.
50
3.2.2.3
CYTOCHROM
P
450
-1
AI-AKTIVITAET:
DEETHYLIERUNG
VON
ETHOXYCUMARIN
.
51
3.2.2.4
DNA-GEHALT
.
52
3.2.3
EINFLUSS
DER
LAGERUNGSDAUER
AUF
DIE
FUNKTIONSPARAMETER
.
53
3.2.3.1
LDH-FREISETZUNG
.
53
3.2.3.2
ALBUMINSEKRETION
.
55
3.2.3.3
CYTOCHROM
P
450
1A1
-AKTIVITAET:
DEETHYLIERUNG
VON
ETHOXYCUMARIN
.
56
3.2.3.4
DNA-GEHALT
.
57
4
DISKUSSION
59
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
82
4
86
6
LITERATURVERZEICHNIS
_
7
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
93
8
GLOSSAR
VERWENDETER
ABKUERZUNGEN
_
96
9
DANKSAGUNG
.
97
10
LEBENSLAUF
.
.
.
_
.
.
98
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