Transgene, Transgenese, transgene Tiere: Methoden der nichthomologen DNA-Rekombination ; 5 Tabellen
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Basel ; Freiburg ; Paris ; London ; New York ; New Delhi ; Bangkok
Karger
2001
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INHALT
VORWORT
.
IX
1.
DIE
LABORMAUS
IN
DER
EXPERIMENTELLEN
GENETIK
.
1
2.
ZUM
INHALT
DER
MONOGRAPHIE
.
5
3.
DIE
ENTWICKLUNG
VON
TECHNIKEN
ZUR
TRANSGENESE
BEI
LABORMAEUSEN
.
7
3.1.
GENTRANSFER
MIT
RETROVIRALEN
VEKTOREN
.
7
3.2.
DNA-MIKROINJEKTION
IN
DEN
VORKERN
VON
MAUSZYGOTEN
.
8
3.3.
TRANSFORMATION
EMBRYONALER
KARZINOMAF
EC
(-ZELLEN
.
9
3.4.
TRANSFORMATION
EMBRYONALER
STAMM(ES)-ZELLEN
.
11
3.5.
SPERMIEN
ALS
DNA-VEKTOREN
.
16
3.6.
TRANSGENE
ORGANISMEN:
EINE
DEFINITION
.
18
4.
DIE
VORKERNINJEKTION
ZUR
TRANSGENESE
BEI
SAEUGETIEREN
.
19
4.1.
DIE
TECHNIK
DER
VORKERNINJEKTION
BEI
DER
LABORMAUS
.
19
4.2.
WIE
ERFOLGT
DIE
INTEGRATION
PRONUKLEAR
INJIZIERTER
TRANSGENE?
.
25
4.2.1.
DNA-REKOMBINATIONEN
ZUR
TANDEMFORMATION
UND
INTEGRATION
PRONUKLEAR
INJIZIERTER
TRANSGENE
.
30
4.2.2.
BEISPIELE
FUER
INSERTIONSMUTATIONEN
DURCH
DIE
NICHTHOMOLOGE
INTEGRATION
TRANSGENER
DNA
.
34
4.3.
FAKTOREN,
DIE
DEN
PHAENOTYP
TRANSGENER
TIERE
BEEINFLUSSEN
.
37
4.3.1.
EFFEKTE
DES
GENETISCHEN
HINTERGRUNDES
AUF
DEN
PHAENOTYP
TRANSGENER
TIERE
.
39
4.3.2.
SCHUTZMECHANISMEN
DES
SAEUGERGENOMS
GEGEN
EXOGENE
DNA-SEQUENZEN
.
42
4.3.2.1.
DIE
DE
NOVO
METHYLIERUNG
ALS
SCHUTZMECHANISMUS
GEGEN
NICHTHOMOLOG
REKOMBINIERTE
DNA-SEQUENZEN
.
43
4.3.2.2.
GENOMISCHES
IMPRINTING
.
46
DIE
BEDEUTUNG
DES
IMPRINTINGS
FUER
TRANSGENE
SEQUENZEN
.
47
URSACHEN
FUER
DAS
IMPRINTING
TRANSGENER
SEQUENZEN
.
48
WARUM
ERFOLGT
IMPRINTING HAUPTSAECHLICH
BEI
MATERNAL
VERERBTEN
TRANSGENEN?
.
50
4.3.2.3.
DIE
INAKTIVIERUNG
VON
(TRANS-)GENEN
DURCH
MECHANISMEN
DER
CO-SUPPRESSION
.
52
4.3.3.
EINFLUESSE
DES
INTEGRATIONSORTES
(POSITIONSEFFEKTE)
AUF
DIE
AKTIVITAET
TRANSGENER
SEQUENZEN
.
54
4.3.3.1.
DIE
TRANSKRIPTIONSINTERFERENZ
ZWISCHEN
ENG
BENACHBARTEN
GENEN.
.
.
54
4.3.3.2.
DER
EINFLUSS
DER
CHROMATINSTRUKTUR
AM
INTEGRATIONSORT
.
56
POSITION
EFFECT
VARIEGATION
TRANSGENER
LOCI
.
56
AUSWIRKUNGEN
EINER
X
ODER
Y-CHROMOSOMALEN
INTEGRATION
FUER
TRANSGENE
SEQUENZEN
.
59
4.3.3.3.
STRATEGIEN
ZUR
VERMEIDUNG
VON
POSITIONSEFFEKTEN
DURCH
EINE
GEZIELTE
INTEGRATION
DER
TRANSGENE
.
61
TRANSGEN-INTEGRATION
DURCH
SEQUENZSPEZIFISCHE
REKOMBINATION
(CRE/LOXP)
.
63
4.3.4.
DIE
KORRELATION
ZWISCHEN
EXPRESSION
UND
DER
ANZAHL
INTEGRIERTER
KOPIEN
AM TRANSGENEN
LOCUS
.
69
4.3.5.
HERKUNFT
UND
KONSTRUKTION
TRANSGENER
SEQUENZEN
.
72
4.3.5.1.
GENOMISCHE
SEQUENZEN
VERSUS
CDNA
.
72
4.3.5.2.
DIE
BEDEUTUNG
VON
INTRONS
IN
TRANSGENEN
KONSTRUKTEN
.
77
4.3.5.3.
TRANSSGENE
CDNA
ALS
TEIL
GENOMISCHER
EXPRESSIONSVEKTOREN
.
80
4.3.5.4.
DIE
CO-INTEGRATION
VON
CDNA-KONSTRUKTEN
MIT
DEN
GENOMISCHEN
SEQUENZEN
DES
TRANSGENEN
PROMOTORS
.
81
4.3.5.5.
INTERNAL
RIBOSOME
ENTRY
SITES
IN
DICISTRONISCHEN
CDNA-KONSTRUKTEN
.
82
4.3.5.6.
DIE
WIRKUNG
DOMINANTER
KONTROLLREGIONEN
AUF
DIE
EXPRESSION
TRANSGENER
SEQUENZEN
.
84
4.3.5.7.
VERSUCHE
ZUR
ISOLATION
TRANSGENER
LOCI
GEGEN
POSITIONSEFFEKTE
MITTELS
MATRIX
ATTACHMENT
/
SCAFFOLD
ATTACHMENT
REGIONS
(MARS/SARS)
.
86
4.3.5.8.
KONSTRUKTION,
KLONIERUNG
U.
UEBERTRAGUNG
GROSSER
DNA-SEQUENZEN.
.
88
4.3.6.
STRATEGIEN
ZUR
KONTROLLIERTEN
EXPRESSION
TRANSGENER
SEQUENZEN
.
94
4,3.6.1.
DIE
NUTZUNG
EXOGENER
TRANSKRIPTIONSSCHALTER
ZUR
REGULATION
VON
TRANSGENEN
.
95
4.3.6.2.
MOEGLICHKEITEN
ZUR
TETRAZYKLIN-KONTROLLIERTEN
GENEXPRESSION
.
96
4.3.6.3.
DIE
AKTIVIERUNG
VON
TRANSGENEN
MITTELS
CRE/LOXP-VERMITTELTER
REKOMBINATION
.
99
VI
4.3.6.4.
MOEGLICHKEITEN
ZUR
POSTTRANSKRIPTIONELLEN
REGULATION
DER
CRE/LOXP-REKOMBINATION
.
101
4.3.6.5.
LIGANDEN-INDUZIERTE
TRANSKRIPTION
TRANSGENER
SEQUENZEN
.
102
5.
TRANSGENESE
VIA
RETROVIRALE
VEKTOREN
.
104
5.1.
WICHTIGE
EIGENSCHAFTEN
VON
RETROVIREN
FUER
IHRE
NUTZUNG
ALS
VEKTOREN
.
104
5.2.
ASPEKTE
DER
BIOLOGISCHEN
SICHERHEIT
BEIM
EINSATZ
RETROVIRALER
VEKTOREN
.
106
5.3.
DER
INTEGRATIONSMECHANISMUS
UND
DER
INTEGRATIONSORT
RETROVIRALER
VEKTOREN
IN
SAEUGERZELLEN
.
108
5.4.
BEISPIELE
FUER
INSERTIONSMUTATIONEN
DURCH
DIE
INTEGRATION
RETROVIRALER
VEKTOREN
.
109
5.5.
DIE
KAPAZITAET
RETROVIRALER
VEKTOREN
ZUR
AUFNAHME
TRANSGENER
SEQUENZEN
.
110
5.6. PROBLEME
BEI
DER
EXPRESSION
RETROVIRAL
UEBERTRAGENER
UND
INTEGRIERTER
TRANSGENE
.
110
5.7.
DIE
BEDEUTUNG
RETROVIRALER
VEKTOREN
ZUR
TRANSGENESE
BEI
LABORTIEREN
.
112
6.
SPERMIEN
ALS
VEKTOREN
FUER TRANSGENE
DNA-MOLEKUELE
.
115
6.1.
DIE
FAEHIGKEIT
VON
SPERMIEN
ZUR
BINDUNG
UND
AUFNAHME
EXOGENER
DNA
.
116
6.2.
OBERFLAECHENMOLEKUELE
DER
SPERMIENZELLEN
ALS
BINDUNGSSTELLE
FUER
EXOGENE
DNA
.
118
6.3.
DIE
CHROMOSOMALE
INTEGRATION
EXOGENER
DNA-MOLEKUELE
IM
SPERMIENKERN
.
118
6.4.
WIRD
DIE
BEFRUCHTUNGSFAEHIGKEIT
DER
SPERMIEN
DURCH
ASSOZIATION
ODER
INKORPORATION
EXOGENER
DNA
BEEINFLUSST?
.
119
6.5.
DIE
BEDEUTUNG
VON
SPERMIEN
ALS
VEKTOREN
ZUR
TRANSGENESE
BEI
LABOR
UND
NUTZTIEREN
.
120
7.
TRANSGENESE
DURCH
NICHTHOMOLOGE
REKOMBINATION
IN
ES-ZELLEN
.
123
8.
TRANSCHROMOSOMALE
LABORTIERE
.
125
9.
AUSBLICK
.127
DANK
.
131
10.
LITERATUR
.
132
11.
SACHWORTVERZEICHNIS
.
163
VII |
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