Herstellung und Charakterisierung Tachyzoiten-spezifischer monoklonaler Antikörper aus der Ratte gegen Toxoplasma gondii:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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INHALT
TABELLEN
UND
ABBILDUNGEN
ABKUERZUNGEN
1.
EINLEITUNG
SEITE
1.1
EPIDEMIOLOGIE
DER
TOXOPLASMOSE
1
1.2
MORPHOLOGIE
VON
TOXOPLASMA
GONDII
2
1.3
LEBENSZYKLUS
DES
PARASITEN
5
1.4
PATHOGENESE
DER
ERKRANKUNG
7
1.5
KLINIK
10
1.6
DIAGNOSTIK
12
1.7
THERAPIE
13
1.8
EXPOSITIONSPROPHYLAXE
15
1.9
FRAGESTELLUNG
16
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1
MATERIAL
18
2.1.1
MEDIEN
FUER
DIE
FUSION
BZW.
ZELLKULTUR
18
2.1.2
ANTIKOERPER
20
2.1.3
ZELLREIHEN
UND
VERSUCHSTIERE
20
2.1.4
TOXOPLASMA
GONRFN-ISOLATE
21
2.1.5
LOESUNGEN
FUER
SDS-GELELEKTROPHORESE
21
2.1.6
LOESUNGEN
FUER
IMMUNOBLOT
22
2.1.7
GERAETE
24
2.2
METHODEN
26
2.2.1
ZYSTENISOLIERUNG
26
2.2.2
ISOLIERUNG
VON
TACHYZOITEN
27
2.2.3
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
(MAK)
NACH
DER
FUSIONSMETHODE
VON
KOEHLER
UND
MILSTEIN
27
2.2.4
SUBKLONIERUNG
30
2.2.5
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
31
2.2.6
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
32
2.2.7
PROBENVORBEREITUNG
FUER
SDS-PAGE
33
2.2.8
IMMUNOBLOT
33
2.2.9
KRYOSCHNITTE
35
2.2.10
IMMUNHISTOCHEMISCHE
FAERBUNG
(PAP-METHODE)
36
2.2.11
ISOTYPISIERUNG
37
2.2.12
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
37
2.2.13
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
38
2.2.14
BETREUUNG
DER
ZELLKULTUREN
39
3.
ERGEBNISSE
3.1
ANTIKOERPERKINETIK
DER
MIT
T.
GONDII
INFIZIERTEN
RATTEN
40
3.2
SCREENING
41
3.3
ISOTYPISIERUNG
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
42
3.4
STADIENSPEZIFITAET
43
3.5
STAMMSPEZIFITAET
43
3.6
CHARAKTERISIERUNG
DER
TACHYZOITEN-SPEZIFISCHEN
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
AD11,
EE8
UND
DC2:
44
3.6.1
REAKTION
IM
WESTEMBLOT:
MAK
AD11
44
3.6.2
REAKTION
IN
DER
INDIREKTEN
IMMUNFLUORESZENZ:
MAK
EE8
UND
MAK
DC2
45
3.7
CHARAKTERISIERUNG
DER
MIT
TACHYZOITEN
UND
BRADYZOITEN
REAGIEREN
DEN
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER:
MAK
EE5
UND
MAK
CC2
48
3.7.1
MAKEE5
48
3.7.2
MAKCC2
49
3.8
IMMUNHISTOLOGIE
50
4.
DISKUSSION
4.1
STADIENKONVERSION
IN
VITRO
-
IN
VIVO
52
4.2
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
AUS
DER
RATTE
-
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
AUS
DER
MAUS
54
4.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
55
4.4
STAMMUNTERSCHIEDE
58
5.
ZUSAMMENFASSUNG
61
6.
LITERATUR
63
7.
ANHANG
WISSENSCHAFTLICHE
BEITRAEGE
DANKSAGUNG
LEBENSLAUF
72 |
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