Charakterisierung des photosynthetischen Elektronentransportes in transgenem Tabak mit antisense-Hemmung der Ferredoxin-NADP+-Oxidoreduktase:
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2000
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II
2.9 BESTIMMUNG DER ELEKTRONENTRANSPORTRATEN UEBER POLAROGRAPHISCHE 0
2-MESSUNGEN 33
2.10 BESTIMMUNG DER FNR-EXPRESSION 34
2.10.1 RNA-ISOLATION 34
2.10.2 ELEKTROPHORETISCHE RNA-TRENNUNG 3 5
2.10.3 NORTHEM-BLOTTING 36
2.10.4 AMPLIFIZIERUNG UND BIOTINYLIERUNG DER DNA-SONDE 37
2.10.5 DNA-RNA-HYBRIDISIERUNG 38
2.10.6 DETEKTION DER DNA-RNA-HYBRIDE MITTELS CHEMILUMINESZENZ 38
2.11 QUANTIFIZIERUNG PHOTOSYNTHETISCHER PROTEINKOMPLEXE 39
2.11.1 DIFFERENZSPEKTROSKOPIE ZUR QUANTIFIZIERUNG DES CYT BF-KOMPLEXES
UND CYT B
559
3 9
2.11.2 DIFFERENZSPEKTROSKOPIE ZUR QUANTIFIZIERUNG DES PHOTOSYSTEMS I
UEBER P70O 41
2.11.3 QUANTIFIZIERUNG DER LICHTSAMMELKOMPLEXE (LHC) 44
2.11.4 BERECHNUNG DER KONZENTRATION VON PIGMENT-PROTEINKOMPLEXEN IN
MECHANISCH PRAEPARIERTEN
GRANAMEMBRANEN 45
2.12 DIFFERENZSPEKTROSKOPIE IM NAHEN IR: UNTERSUCHUNG DER P
7M-REDUKTIONSKINETIK NACH
SAETTIGENDEM LICHTPULS 47
2.13 CHI A-FIUORESZENZSPEKTROSKOPIE 49
2.13.1 STATIONAERE CHI A-FLUORESZENZ, FLUORESZENZRELAXATION 50
2.13.2 CHLOROPHYLL A-FLUORESZENZINDUKTION 53
3. ERGEBNISSE 57
3.1 CHARAKTERISIERUNG DES FNR-ANTISENSE 57
3.1.1 PFLANZENHABITUS 57
3.1.2 CHLOROPHYLLGEHALT IN BLAETTERN 57
3.1.3 FNR-EXPRESSION 5 8
3.1.4 FNR-AKTIVITAET 59
3.1.5 PHOTOSYNTHETISCHE NADP
+-REDUKTION 61
3.1.6 VERGLEICH DER FNR-AKTIVITAET IN CHLOROPLASTEN UND THYLAKOIDEN 62
3.1.7 NADP
+-REDUKTION UND LINEARER ELEKTRONENTRANSPORT 64
3.1.8 ABHAENGIGKEIT ZWISCHEN FNR-AKTIVITAET UND LINEAREM
ELEKTRONENTRANSPORT 65
3.1.9 NADPH-DEHYDROGENASEAKTIVITAET IN CHLOROPLASTEN 66
3.2 QUANTIFIZIERUNG VON PHOTOSYNTHETISCHEN PROTEINKOMPLEXEN IN
THYLAKOIDEN 67
3.2.1 PHOTOSYSTEM I 68
3.2.2 CYTOCHROM B
6F-KOMPLEX 70
3.2.3 PHOTOSYSTEM II 75
3.2.4 LHC 77
3.2.5 ZUSAMMENFASSUNG: KONZENTRATION DER PHOTOSYNTHETISCHEN
PROTEINKOMPLEXE IN THYLAKOIDEN 78
3.2.6 EINFLUSS DER LICHTSTAERKE AUF DEN PSII-UND CYT BF-GEHALT 79
3.3 LATERALE VERTEILUNG PHOTOSYNTHETISCHER KOMPLEXE IN DER
THYLAKOIDMEMBRAN 81
3.3.1 CHARAKTERISIERUNG DER MEMBRANFRAKTIONIERUNG 81
CHEMISCHE FRAKTIONIERUNG (UEBER DIGITONIN/TRITON-INKUBATION) 81
MECHANISCHE FRAKTIONIERUNG (UEBER DRUCK-BEHANDLUNG, YEDA-PRESSE) 82
3.3.2 LOKALISATION VON PHOTOSYSTEM II 84
3.3.3 LOKALISATION VON PHOTOSYSTEM I 85
3.3.4 LOKALISATION DES CYTOCHROM BF-KOMPLEXES 88
3.3.5 LOKALISATION DER LHC'S 90
3.3.6 ZUSAMMENFASSUNG: LOKALISATION VON PIGMENT-PROTEINKOMPLEXEN 92
3.4 PHOTOSYNTHETISCHER ELEKTRONENTRANSPORT 93
3.4.1 QUANTENAUSBEUTE DES LINEAREN ELEKTRONENTRANSPORTES 93
3.4.2 QUANTENAUSBEUTE VON PHOTOSYSTEM II 94
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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III
3.4.3 FLUORESZENZINDUKTION 96
3.4.4 AKTIVITAET DES CYTOCHROM BF-KOMPLEXES 99
3.4.5 EINFLUSS DER MEMBRANSTAPELUNG AUF DEN LINEAREN ELEKTRONENTRANSPORT
101
3.4.6 ELEKTRONENFLUSS VOM PHOTOSYSTEM II ZUM CYT BF-KOMPLEX 105
3.4.7 ELEKTRONENFLUSS VOM CYT BF-KOMPLEX ZUM PHOTOSYSTEM I 108
3.5 PROTEINPHOSPHORYLIERUNG 112
3.5.1 KAPAZITAET VON LINEAREM UND PSII-GETRIEBENEM ELEKTRONENTRANSPORT
113
3.5.2 CHI A/B-VERHAELTNISSE UND MEMBRANSTAPELUNG 113
3.5.3 LATERALE VERTEILUNG DES CYT BF-KOMPLEXES 114
3.5.4 VERGLEICH PROTEINPHOSPHORYLIERUNG - FNR-ANTISENSE 115
4. DISKUSSION H7
4.1 FNR-AKTIVITAET UND PHOTOSYNTHETISCHER ELEKTRONENTRANSPORT 117
4.2 INTERAKTION ZWISCHEN FNR UND PHOTOSYSTEM I US
4.3 REGULATION DES LINEAREN ELEKTRONENTRANSPORTES 121
4.3.1 KOMPARTIMENTIERUNG DES ELEKTRONENTRANSPORTES 122
4.3.2 ELEKTRONENTRANSPORT IN FNR-ANTISENSE-PFLANZEN - 124
4.4 EINFLUSS DER PROTEINPHOSPHORYLIERUNG 126
4.5 PHYSIOLOGISCHE BEDEUTUNG DER ANPASSUNG DES ELEKTRONENTRANSPORTES 128
4.6 VERGLEICH ZWISCHEN FNR-UND RIESKE-ANTISENSE-TRANSFORMANTE 128
5. ZUSAMMENFASSUNG 130
LITERATURVERZEICHNIS
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