Klonierung der Transposoninsertionsstellen Biofilm-nagativer Staphylococcus-epidermidis-Transposonmutanten:
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| Sprache: | German |
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1999
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1. KOAGULASENEGATIVE STAPHYLOKOKKEN 1
1.2. ERKRANKUNGEN DURCH KOAGULASENEGATIVE STAPHYLOKOKKEN 2
1.3. PATHOGENESE VON FREMDKOERPERINFEKTIONEN DURCH
S. EPIDERMIDIS 4
1.4. VORAUSSETZUNGEN FUER DIESE ARBEIT 7
1.5. ZIELE DIESER ARBEIT 10
2. MATERIAL UND METHODEN 11
2.1. MATERIAL 11
2.1.1. GERAETE 11
2.1.2. CHEMIKALIEN 11
2.1.3. NAEHRMEDIEN 12
2.1.4. ENZYME 12
2.1.5 BAKTERIENSTAEMME 12
2.2. METHODEN 14
2.2.1 PROTOPLASTENPRAEPARATION 14
2.2.2. PROTOPLASTENTRANSFORMATION 15
2.2.3. ANALYTISCHE PLASMIDISOLIERUNG AUS STAPHYLOKOKKEN 17
2.2.4. PRAEPERATIVE PLASMIDISOLIERUNG 18
2.2.5. ISOLIERUNG CHROMOSOMALER DNA 20
2.2.6. DNA-FRAGMENTAUFTRENNUNG IN DER AGAROSE-GELELEKTROPHORESE 21
2.2.7. SPALTUNG VON DNA MIT HILFE VON RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN 22
2.2.8. LIGATION VON DNA FRAGMENTEN 22
2.2.9. PHENOLEXTRAKTION 23
2.2.10. SOUTHERN BLOT HYBRIDISIERUNG VON PLASMID- UND CHROMOSOMALER DNA
23
2.2.11. RESISTENZBESTIMMUNG DER BAKTERIENSTAEMME AUF MUELLER-HINTON-AGAR
26
2.2.12. PULSFELDGELELEKTROPHORESE 27
3. ERGEBNISSE 29
3.1. RESTRIKTION UND REPRODUKTION DER DAS TRANSPOSON FLANKIERENDEN
GENBEREICHE 29
3.2. CHARAKTERISIERUNG DER NEUENTSTANDENEN PLASMIDE MIT
RESTRIKTIONSENDONUCLEASEN 37
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.3. ERSTELLEN EINER SONDE NACH ENTFERNUNG DES TRANSPOSONS UND
ANSCHLIESSENDE
SOUTHERN BLOTS 46
3.4. ANSATZ ZUR WEITEREN ANALYSE DER DEM SPEZIFISCHEN ANTIGEN
ZUGRUNDELIEGENDEN GENBEREICHE 48
3.5. PULSFELDGELELEKTROPHORESE UND SOUTHERN BLOTS MIT PTVL UND DEN NEUEN
SONDEN 50
4. DISKUSSION
57
5. ZUSAMMENFASSUNG 64
6. LITERATURVERZEICHNIS 66
7. DANKSAGUNG 78
8. LEBENSLAUF
79
9. ERKLAERUNG 81 |
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