Modell zum Nachweis von im Blut zirkulierenden Tumorzellen bei Mammakarzinom-Patientinnen:
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| Format: | Buch |
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
_
A
INHALTSVERZEICHNIS
A
ABKUERZUNGEN
%
1.
EINLEITUNG
1
1.1
DAS
MAMMAKARZINOM
1
1.2.
NACHWEIS
DER
TUMORDISSEMINISATION
DURCH
IM
BLUT
ZIRKULIERENDE
TUMORZELLEN
2
1.3.
HOCHSENSITIVE
RT-PCR-SYSTEME
5
1.4.
MESS-PARAMETER
7
1.5.
ZIELSETZUNG
UND
FRAGESTELLUNG
9
2.
MATERIALIEN
UND
METHODEN
10
2.1.
REAGENZIEN
10
2.2.
GERAETE
12
2.3.
PUFFER
13
2.4.
KOPPLUNG
VON
PEPTIDE
NUCLEIC
ACIDS
(PNA)
AN
MAGNETPARTIKEL
16
2.5.
ZELLKULTUR
18
2.6.
EXTRAKTION
DER
GESAMT
RNA
MIT
TRIZOL
(STANDARDVORSCHRIFT)
18
2.7.
EXTRAKTION
VON
POLYADENYLIERTER
RNRNA
MIT
OLIGO
DT
(25!
-
MAGNETPARTIKELN
AUS
EINEM
POOL
EXTRAHIERTER
GESAMT
RNA
19
2.8.
CDNA
-
SYNTHESE
(
STANDARDVORSCHRIFT)
21
2.9.
PCR
FUER
MDR
1
(STANDARDVORSCHRIFT)
23
2.10.
ELEKTROPHORESE
UND
DETEKTION
DER
PCR-PRODUKTE
24
2.11.
CHARAKTERISIERUNG
DER
HYBRIDISIERUNGSBEDINGUNGEN
VON
DNA
SONDEN
AN
PNA-MAGNETPARTIKEL
UNTER
VERWENDUNG
DES
QPCR-SYSTEMS
25
2.12.
OPTIMIERUNG
DER
EXTRAKTION
POLYADENYLIERTER
MRNA
AUS
EXTRAHIERTER
GESAMT
RNA
MITTELS
BISPNA-MAGNETPARTIKELN
27
2.13.
EXTRAKTION
VON
POLYADEYNIERTER
MRNA
AUS
ZELLEN
MIT
BISPNA
MAGNETPARTIKELN
UNTER
VERWENDUNG
UNTERSCHIEDLICHER
DETER
GENTIEN
IM
LYSEPUFFER
32
2.14.
MODELL
ZUM
NACHWEIS
VON
TUMORZELLEN
AUS
BLUT
33
2.15.
VERGLEICH
DER
MRNA-EXTRAKTIONSQUALITAET
DER
METHODEN
VON
QUIAGEN
UND
DYNAL
3
8
2.16.
BRAUCHBARKEIT
DER
PRIMER
ZUR
AMPLIFIKATION
VON
BIOLOGISCHEN
MATERIALIEN
38
2.17.
AMPLIFIKATION
VON
MDRI
UND
BETA
2-MICROGLOBULIN
NACH
TUMORZELL
ISOLIERUNG
AUS
VOLLBLUT
38
IFIHAUSVIZIHNI
_
SS
3.
ERGEBNISSE
40
3.1
SYNTHESE,
QUALITAETSKONTROLLE,
QUANTITATIVE
UND
QUALITATIVE
CHARAKTERISIERUNG
DER
PNA-MAGNETPARTIKEL
40
3.2.
CHARAKTERISIEREN
DER
HYBRIDISIERUNGSEIGENSCHAFTEN
EINER
TBR-MARKIERTEN
POLY
A-SONDE
AN
BISPNA-MAGNETPARTIKEL
MITTELS
QPCR
-
SYSTEM
43
3.3.
CHARAKTERISIERUNG
DER
HYBRIDISIERUNGSEIGENSCHAFTEN
POLYADENYLIERTER
MRNA
AN
BISPNA-MAGNETPARTIKEL
47
3.4.
ABLOESEN
DER
POLYADENYLIERTEN
MRNA
VON
DEN
BISPNA
MAGNETPARTIKEL
49
3.5.
RT-PCR
MIT
AN
BISPNA-MAGNETPARTIKEL
IMMOBILISIERTER
MRNA
50
3.6.
OPTIMIERUNG
DER
PCR
FTIR
MDR
1
51
3.7.
EXTRAKTION VON
POLYADENYLIERTER
MRNA
AUS
ZELLEN
53
3.8.
NACHWEIS TUMORSPEZIFISCHER
MRNA
DURCH
TUMORZELLISOLATION
UND
RT-PCR
54
4.
DISKUSSION
57
4.1.
NUCLEASE-RESISTENTE
DNA-ANALOGA
57
4.2.
BISPNA
ZUR
EXTRAKTION
VON
MRNA
59
4.3.
KOPPLUNG
VON
BISPNA-MOLEKILLEN
AN
MAGNETPARTIKEL
60
4.4.
HYBRIDISIERUNGSEIGENSCHAFTEN
DER
BISPNA-MAGNETPARTIKEL
61
4.5.
EXTRAKTION
VON
MRNA
AUS
ZELLEN
63
4.6.
NACHWEIS
VON
IN
BLUT
ZIRKULIERENDEN
TUMORZELLEN
64
4.7.
OPTIMIERUNG
DER
NESTED
PCR
FTIR
BETA
2-MIKROGLOBULIN
UND
MDR
1
67
4.8.
NACHWEIS
VON
TUMORZELLEN
IN
EDTA-BLUT
DURCH
ANTI-EPITHELZELL
MAGNETPARTIKEL
MIT
NACHFOLGENDER
AMPLIFIKATION
VON
BETA
2-MICROGLOBULIN
UND
MDR
1
68
S.
ZUSAMMENFASSUNG
70
6.
LITERATUR
72
7.
DANKSAGUNG
87
8.
CURRICULUM
VITAE
88 |
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