Selektive Messungen zur Induktion von DNA-Doppelstrangbrüchen durch Röntgenbestrahlung und 125J-Zerfälle:
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| Format: | Buch |
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2000
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-3
INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
11
1.1.
BEDEUTUNG
DER
STRAHLENTHERAPIE
BEI
DER
BEHANDLUNG
MALIGNER
TUMOREN
.
11
1.2.
DIE
BEDEUTUNG
DER
STRAHLENBIOLOGIE
.
12
1.2.1.
DNA-STRANGBRUECHE
UND
OBERLEBEN
.
12
1.2.2.
ERHOLUNG
UND
DNA-REPARATUR
.
14
1.3.
STRAHLENSENSIBILITAET
.
15
1.3.1.
THERAPIEPROGNOSE
MENSCHLICHER
TUMOREN
.
15
1.3.2.
STRAHLENEMPFINDLICHKEIT
BEI
MENSCHLICHEN
ERBKRANKHEITEN
.
19
1.3.3.
ENTWICKLUNG
PRAEDIKTIVER
TESTS
.
20
1.3.4.
CHO
ZELLEN
ALS
DEFINIERTE
MUTANTEN
.
21
1.4.
DNA-STRANGBRUCHANALYSEN
.
22
1.4.1.
BESTIMMUNGMETHODEN
VON
DNA-STRANGBRUECHEN
.
22
1.4.2.
DIE
SELEKTIVE
BESTIMMUNG
VON
DNA-DOPPELSTRANGBRUECHEN
MITTELS
DER
NICHT-DENATURIERENDE
ELUTION
.
23
1.4.3.
DIE
KALIBRIERUNG
DER
NICHT-DENATURIERENDE
ELUTION
.
25
1.5.
STAND
BISHERIGER
UNTERSUCHUNGEN
.
27
1.6.
ZIEL
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
.
28
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
29
2.1.
ZELLKULTUR
.
29
2.1.1.
ZELLINIEN
.
29
2.1.2.
KULTURGEFAESSE
.
29
2.1.3.
ZELLKULTURMEDIUM
UND
MEDIENZUSAETZE
.
30
2.1.4.
LOESUNGEN
.
30
2.1.5.
KULTURTECHNIK
.
33
2.1.5.1.
KULTURBEDINGUNGEN
.
33
2.1.5.2.
KULTIVIEREN
DER
ZELLEN
.
34
2.1.5.2.1.
ROUTINEMAESSIGE
SUBKULTIVIERUNG
.
34
2.1.5.2.2.
BESTIMMUNG
DER
ZELLVERMEHRUNG
.
34
2.1.5.3.
TEST
AUF
MYCOPLASMENBEFALL
.
35
2.1.5.4. GEFRIERKONSERVIERUNG
VON
ZELLEN
.
35
-4
2.1.6.
LICHTMIKROSKOPISCHE
DOKUMENTATION
.
38
2.2.
BESTIMMUNG
STRAHLENINDUZIERTER
DNA-SCHAEDEN
.
38
2.2.1.
INDUKTION
VON
STRAHLENINDUZIERTEN
DNA-DOPPELSTRANGBRUECHEN
.
38
2.2.1.1.
MARKIERUNG
DER
ZELLEN
MIT
[METHYL
3
H]-THYMIDIN
.
38
2.2.1.2.
BESTRAHLUNG
.
38
2.2.2.
DIE
NICHT-DENATURIERENDE
ELUTION
.
39
2.2.2.1
.
MATERIAL
UND
ZUBEHOER
FUER
DIE
NEUTRALE
ELUTION
.
39
2.2.2.2.
LOESUNGEN
.
39
2.2.2.3.
DURCHFUEHRUNG
DER
NEUTRALEN
ELUTION
.
40
2.2.2.4.
RADIOAKTIVITAETSMESSUNG
.
41
2.2.2.5.
AUSWERTUNG
.
42
2.2.3.
KALIBRIERUNG
DER
NICHT-DENATURIERENDEN
ELUTION
.
42
2.2.3.1
.
MARKIERUNG
DER
ZELLEN
MIT [
125
J]-JODODESOXYURIDIN
.
43
2.2.3.2.
LAGERUNG
DER
ZELLEN
ZUR
AKKUMULATION
VON
DOPPELSTRANGBRUECHEN
.
43
2.2.3.3.
BESTIMMUNG
DER
INITIALEN
ZERFALLSRATE
.
43
2.2.3.4.
DURCHFUEHRUNG
DER
NICHT-DENATURIERENDEN
ELUTION
.
44
2.2.3.5.
RADIOAKTIVITAETSMESSUNG
.
44
2.2.3.6.
AUSWERTUNG
.
46
2.3.
STATISTISCHE
BEHANDLUNG
DER
DATEN
.
46
2.3.1.
DNA-STRANGBRUECHE
DURCH
ROENTGENSTRAHLUNG
.
46
2.3.1.1.
DNA-STRANGBRUECHE
DURCH
125
J-ZERFAELLE
.
47
2.3.2.
DOSISEFFEKTKURVEN
.
47
2.3.3.
KALIBRIERUNG
DER
NICHT-DENATURIERENDEN
ELUTION
.
50
3.
ERGEBNISSE
.
51
3.1.
KULTIVIERUNG
DER
ZELLEN
.
51
3.1.1.
MORPHOLOGIE
DER
ZELLEN
IN
KULTUR
.
51
3.1.2.
VERMEHRUNGSVERHALTEN
DER
ZELLEN
IN
KULTUR
.
51
3.2.
BESTIMMUNG
VON
STRAHLENINDUZIERTEN
DNA-DOPPELSTRANGBRUECHEN
.
55
3.2.1.
SELEKTIVE
ERFASSUNG
VON
DOPPELSTRANGBRUECHEN
MITTELS
DER
NICHT
DENATURIERENDEN
ELUTION
.
55
3.2.1.1.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
ZELLEN
MIT
[METHYL
3
H]-THYMIDIN
.
55
3.2.1.2.
INDUKTION
VON
DOPPELSTRANGBRUECHEN
DURCH
ROENTGENSTRAHLEN
.
56
3.2.2.
KALIBRIERUNG
DER
NICHT-DENATURIERENDEN
ELUTION
.
60
3.2.2.1.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
ZELLEN
MIT
'
25
J-DEOXYURIDIN
.
60
3.2.2.2.
DER
EINFLUSS
DES
FRIERVORGANGS
AUF
DIE
ELUTION
BESTRAHLTER
DNA
.
62
3.2.2.3.
AKKUMULATION
VON
125
J-ZERFAELLEN
.
64
-5
3.2.2.4.
INDUKTION
VON
DOPPELSTRANGBRUECHEN
DURCH
125
J-ZERFAELLE
.
74
3.2.3.
NUMERISCHE
BESTIMMUNG
VON
DOPPELSTRANGBRUECHEN
.
87
4.
DISKUSSION
.
91
4.1.
WECHSELWIRKUNGEN
IONISIERENDER
STRAHLEN
MIT
ZELLEN
.
91
4.2.
STRAHLENSENSIBILITAET
.
92
4.3. CHO-ZELLINIEN
ALS
MODELLSYSTEM
ZELLULAERER
STRAHLENEMPFINDLICHKEIT
.
93
4.4.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
STRAHLENSENSIBILITAET
.
96
4.5.
ANALYSE
VON
DNA-DOPPELSTRANGBRUECHEN
.
97
4.5.1.
NICHT-DENATURIERENDE
ELUTION
.
98
4.5.2.
DIE
KALIBRIERUNG
DER
NICHT-DENATURIERENDEN
ELUTION
.
100
4.5.3.
DOPPELSTRANGBRUCH-INDUKTION
DURCH
ROENTGENBESTRAHLUNG
.
102
4.5.4.
DOPPELSTRANGBRUECHE
ALS
MOEGLICHE
MESSPARAMETER
FUER
PRAEDIKTIVE
TESTS
.
104
4.6.
AUSBLICK
.
106
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
109
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
110
DANKSAGUNG
LEBENSLAUF |
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