Molekulare Mechanismen im hämorrhagischen Schock: Initialisierung und Charakterisierung der inflammatorischen Antwort ; neue therapeutische Strategien
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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| Beschreibung: | München, Techn. Univ., Habil.-Schr., 2000 |
| Beschreibung: | 126 Bl. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
A EINLEITUNG 6
A. 1 HISTORISCHER UEBERBLICK 7
B ZIEL DER UNTERSUCHUNG 8
C MATERIAL UND METHODEN 8
C.1 EXPRESSION VON G-CSF IM BRONCHIALEPITHEL IM HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK 8
C.L.L EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 8
C.1.2 MATERIAL UND METHODEN 9
C. 1.2.1 HS PROTOKOLL. 9
C. 1.2.2 BLUTGAS ANALYSEN, ORGAN- UND ZELLGEWINNUNG 10
C. 1.2.3 AMPLIFIKATION VON G-CSF MRNA MIT POLYMERASE KETTEN REAKTION
(PCR) 11
C. 1.2.4 DNA SUBKLONIERUNG UND SEQUENZIERUNG 12
C.1.2.S IN SITU HYBRIDISIERUNG 12
C. 1.2.6 SYNTHESE DER RIBOPROBE UND LICHT IN SITU HYBRIDISIERUNG 12
C. 1.2.7 STATISTIK 13
C.2 PRODUKTION VON GRANULOZYTEN COLONY-STIMULIERENDEN FAKTOR (G-CSF) IM
HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK
WAEHREND ISCHAEMIE- UND REPERFUSIONSPHASE 14
C.2.1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 14
C.2.2 MATERIAL UND METHODEN 14
C.2.2.1 HAEMORRHAGISCHES SCHOCKMODELL MIT UND OHNE VOLUMENSUBSTITUTION 14
C.2.2.2 AMPLIFIKATION VON G-CSF MRNA MIT POLYMERASE KETTEN REAKTION
(PCR) 13
CJ INSTILLATION VON GRANULOZYTEN COLONY-STIMULIERENDEM FAKTOR (G-CSF) IN
DIE LUNGE VON RATTEN 15
C.3.1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 15
C.3.2 MATERIAL UND METHODEN 16
C.3.2.1 ZYTOKINE 16
C.3.2.2 PROTOKOLL DER G-CSF INSTILLATION IN DIE LUNGEN VON NORMALEN
RATTEN 16
C.3.2.3 MAKRO- UND MIKROSKOPISCHE BEURTEILUNG DER LUNGENSCHAEDIGUNG 17
C.4 BEDEUTUNG DER INTERLEUKIN-6 PRODUKTION IM HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK 17
C.4.1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 17
C.4.2 MATERIAL UND METHODEN 18
C.4.2.1 HS PROTOKOLLE 18
C.4.2.2 PROTOKOLL DER IL-6 INSTILLATION IN DIE LUNGEN VON NORMALEN
RATTEN 18
C.4.2.3 RNA-EXTRAKTION, BAL UND LUNGENSCHAEDIGUNG 18
C.4.2.4 AMPLIFIKATION VON IL-6 MRNA MIT POLYMERASE KETTEN REAKTION (PCR)
18
C.4.2.5 SEMI-QUANTITATIVE RT-PCR 19
C.4.2.6 IMMUNHISTOCHEMIE 19
C.5 AKTIVIERUNG VON STAT (SIGNALTRANSDUKTOREN UND AKTIVATOREN VON
TRANSKRIPTION) PROTEINEN IN DER
LUNGE NACH HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK 20
C.5.1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 20
C.5.2 MATERIAL UND METHODEN 20
2
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/962102393
C.S.2.1 HAEMORRHAGISCHES SCHOCKPROTOKOLL MIT UND OHNE VOLUMENSUBSTITUTION
20
C.5.2.2 ISOLIERUNG VON ORGANEN UND ZELLEN 20
C.5.2.3 ELEKTROPHORETISCHER MOBILITAETS SHIFT ASSAY (EMSA) 20
C.S.2.4 IN SITU HSIE BINDUNGS ASSAY 21
C
.6
INFLAMMATION UND FUNKTIONSSTOERUNGEN IM JEJUNUM NACH HAEMORRHAGISCHEM
SCHOCK 22
C.6.1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 22
C.6.2 MATERIAL UND METHODEN 22
C.
6
.2.1 PRAEPARATION DES JEJUNUM 22
C.6.2.2 HISTOLOGIE UND IMMUNHISTOCHEMIE 23
C.
6
.2.3 FUNKTION DER INTESTINALEN GLATTEN MUSKULATUR 24
C.6.2.4 AMPLIFIKATION VON G-CSF UND IL
-6
MRNA MIT POLYMERASE KETTEN REAKTION (PCR) 25
C.6.2.5 IN SITU HYBRIDISIERUNG 25
C.
6
.2.6 ELEKTROPHORETISCHER MOBILITAETS SHIFT ASSAY (EMSA) 25
C.7 ESSENTIELLE ROLLE VON INDUZIERTEM NO FUER DIE INITIIERUNG DER
INFLAMMATORISCHEN ANTWORT NACH
HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK 25
C.7.1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 25
C.7.2 MATERIAL UND METHODEN 26
C.7.2.1 HAEMORRHAGISCHES SCHOCKPROTOKOLL MIT VOLUMENSUBSTITUTION 26
C.7.2.2 MURINES HAEMORRHAGISCHES SCHOCKPROTOKOLL MIT VOLUMENSUBSTITUTION
26
C.7.2.3 LEBERSCHAEDIGUNG 27
C.7.2.4 ISOLIERUNG VON ORGANEN UND ZELLEN 27
C.7.2.5 WET-TO-DRY RATIO 27
C.7.2.6 HISTOLOGISCHE BEURTEILUNG 27
C.7.2.7 PMN INFILTRATION 27
C.7.2.8 AMPLIFIKATION VON IL
6
, INOS UND G-CSF MRNA MIT POLYMERASE KETTEN REAKTION (PCR) 27
C.7.2.9 ELEKTROPHORETISCHER MOBILITAETS SHIFT ASSAY (EMSA) 28
C.
8
WIRKUNG EINES NEUEN NITRIC OXIDE SCAVENGERS (NOX) AUF LEBERSCHAEDIGUNG
UND UEBERLEBEN NACH
HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK 28
C.8.1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 28
C. 8.2 MATERIAL UND METHODEN
30
C.8.2.1 HS PROTOKOLL
30
C.8.2.2 GEWEBEPROBEN
30
C.8.2.3 NO HAEMOGLOBIN
30
D RESULTATE 31
D. 1 EXPRESSION VON G-CSF IM BRONCHIALEPITHEL IM HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK
31
D. 1.1 AKUTE LUNGENSCHAEDIGUNG NACH HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK 31
D.1.2 G-CSF MRNA SPIEGEL IN DER LUNGE NACH HAEMORR
HAGISCHEM SCHOCK 33
D. 1.3 G-CSF MRNA PRODUKTION IN DER LUNGE 36
D-2 PRODUKTION VON GRANULOZYTEN COLONY-STIMULIERENDEN FAKTOR (G-CSF) IM
HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK
WAEHREND ISCHAEMIE- UND REPERFUSIONSPHASE
3
G
D.2.1 CHARAKTERISTIKA DER HS PROTOKOLLE
3
G
D.2.2 EXPRESSION VON G-CSF MRNA NACH HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK OHNE
VOLUMENSUBSTITUTION 40
D.2.3 EXPRESSION VON G-CSF MRNA NACH HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK MIT
VOLUMENSUBSTITUTION 40
DJ INSTILLATION VON GRANULOZYTEN COLONY-STIMULIERENDEM FAKTOR (G-CSF) IN
DIE LUNGE VON RATTEN 41
D.3.1 LUNGENSCHAEDIGUNG NACH INTRATRACHEALE INSTILLATION VON G-CSF 41
D.3.2 PMN
REKRUTIERUNG IN DAS INTERSTITIUM UND DEN ALVEOLARRAUM NACH G-CSF
INSTILLATION
43
D.3.3 BESTIMMUNG VON SYSTEMISCHEN, ARTERIELLEN BLUTGASEN
43
3
D.4 BEDEUTUNG DER INTERLEUKIN
-6
PRODUKTION IM HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK 46
D.4.1 IL
-6
MRNA UND PROTEIN EXPRESSION IN DEN LUNGE NACH HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK 46
D.4.2 IL
-6
IMMUNHISTOCHEMIE
49
D.4.3 KINETIK DER IL
-6
EXPRESSION IM HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK SO
D.4.4 LUNGENSCHAEDIGUNG NACH INTRATRACHEALER IL-6
INSTILLATION 52
D.4.5 MYELOPEROXIDASE (MPO) UND H+E FAERBUNG
53
D.4.6 HISTOLOGIE UND WET-TO-DRY RATIO 55
DJ AKTIVIERUNG VON STAT PROTEINEN IM HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK 56
D.5.1 STAT3 AKTIVIERUNG IM HS
56
D.5.2 STAT3 AKTIVIERUNG IM HS OHNE VOLUMENSUBSTITUTION 58
D.5.3 STAT3 AKTIVIERUNG IM HS MIT VOLUMENSUBSTI TUTION WEIST EINE IL
-6
UND G-CSF AEHNLICHE KINETIK AUF59
D.5.4 STAT3 AKTIVIERUNG IST VON DER SCHOCKSCHWERE ABHAENGIG 60
D.5.5 AKTIVIERUNG VON STAT3 ISOFORMEN 61
D.5.6 STAT3 IN SITU
BINDUNGSASSAY 62
D.6
INFLAMMATION UND FUNKTIONSSTOERUNGEN IM JEJUNUM NACH HS 63
D.
6
.1 PMN INFILTRATION IM JEJUNUM NACH HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK 63
D.6.2 KONTRAKTILITAET DER ZIRKULAEREN MUSKULATUR 65
D.6.3 IL
-6
WIRD IM JEJUNUM VON RATTEN MIT HS PRODUZIERT
66
D.6.4 G-CSF WIRD IM JEJUNUM VON RATTEN MIT HS PRODUZIERT 67
D.
6
.5 NF-KB AKTIVIERUNG IM JEJUNUM IM HS 70
D.
6.6
STAT3 AKTIVIERUNG IM JEJUNUM IM HS
71
D.
6
.7 AKTIVIERUNG VON STAT3 IN MUSKULARIS GEWEBEKULTUREN
73
D.7 ESSENTIELLE ROLLE VON INDUZIERTEM NO (SR DIE INITIIERUNG DER
INFLAMMATORISCHEN ANTWORT NACH HS 74
D.7.1 INOS AKTIVITAET UND HOCHREGULIERUNG DER MRNA SPIEGEL VON IL
-6
UND G-CSF IM HAEMORRHAGISCHEM
SCHOCK
74
D.7.2 INDUZIERTES NO FUEHRT ZUR AKTIVIERUNG VON
NF-KB UND STAT3 IM HS 78
D
7
3
G :SF PROMOTER ANALYSE: CK-1 BINDUNGSAKTIVITAET 81
D.7.4 AKTIVIERUNG VON STAT3 G
3
D.7.5 INOS INHIBITION REDUZIERT DIE LUNGENSCHAEDIGUNG IM HS 85
D.7.6 ZYTOKIN EXPRESSION UND AKTIVIERUNG VON TRANSKRIPTIONSFAKTOREN IN
DER LEBER NACH INOS INHIBITIAN87
D.7.7 STUDIEN MIT INOS KNOCKOUT MAEUSEN G
9
D.
8
WIRKUNG EINES NEUEN NITRIC OXIDE SCAVENGERS (NOX) AUF LEBERSCHAEDIGUNG
UND UEBERLEBEN WICH
HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK
91
D.8.1 HAEMDYNAMISCHE PARAMETER
91
D.
8
.2 DER NO SCAVENGING EFFEKT VON NOX: HAEMOGLOBIN GEBUNDENES NO 92
D.8.3 LEBERSCHAEDIGUNG: OCT PLASMA SPIEGEL
93
D.8.4 NIERENSCHAEDIGUNG: KREATININ PLASMA SPIEGEL , 94
D.8.5 PMN INFILTRATION IN DIE LEBER
94
D.
8.6
24 STUNDEN UEBERLEBEN
95
E DISKUSSION 96
E. 1 EXPRESSION VON G-CSF IM BRONCHIALEPITHEL IM HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK
96
IL2 PRODUKTION VON GRANULOZYTEN COLONY-STIMULIERENDEN FAKTOR (G-CSF) IM
HAEMORRHAGISCHEN,SCHOCK
WAEHREND ISCHAEMIE- UND REPERFUSIONSPHASE
97
EJ INSTILLATION VON GRANULOZYTEN COLONY-STIMULIERENDEM FAKTOR (G-CSF) IN
DIE LUNGE VON PNTTCN 98
E.4 BEDEUTUNG DER INTERLEUKIN
-6
PRODUKTION IM HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK 100
4
E.5 AKTIVIERUNG VON STAT PROTEINEN IN DER LUNGE NACH HAEMORRHAGISCHEN
SCHOCK 101
E.6 INFLAMMATION UND FUNKTIONSSTOERUNGEN IM JEJUNUM NACH HAEMORRHAGISCHEN
SCHOCK 103
E.7 ESSENTIELLE ROLLE VON INDUZIERTEM NO FUER DIE INITIIERUNG DER
INFLAMMATORISCHEN ANTWORT NACH
HAEMORRHAGISCHEN SCHOCK 106
EJJ WIRKUNG EINES NEUEN NITRIC OXIDE SCAVENGERS (NOX) AUF
LEBERSCHAEDIGUNG UND UEBERLEBEN NACH
HAEMORRHAGISCHEM SCHOCK * 108
G ZUSAMMENFASSUNG 111
H LITERATUR 113
5 |
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