In-vitro-Epidermis versus Zellsuspension in Fibrinmatrix: experimentelle Untersuchungen an definierten serumfreien Keratinozyten zu Wachstum und Differenzierung in den verschiedenen Applikationsformen
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2000
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INHALTSVERZEI EHNI S
BIBLIOGRAPHISCHE BESCHREIBUNG. II
INHALTSVERZEICHNIS. III
. \ BKUE RZUNGSVERZEICHNIS. VI
1. HINLEITUNG. 1
1.1. DIE ENTWICKLUNG DER ZELLKULTUR HUMANER EPIDERMALER KERATINOZYTEN. 1
1.1.1. DIE ENTWICKLUNG TRANSPLANTATIONSFAEHIGER
IN VITRO EPIDERMIS. 1
1.1.2. SERUMLIEIE KULTUREN HUMANER EPIDERMALER KERATINOZYTEN. 4
1.1.3. SUSPENSIONSKULTUREN HUMANER EPIDERMALER KERATINOZYTEN. 7
1.2. STRUKTUR UND FUNKTION DER EPIDERMALEN KERATINOZYTEN. 9
1.2.1. STRUKTUR DER MENSCHLICHEN HAUT. 9
1.2.2. DIE TERMINALE DIFF ERENZIERUNG HUMANER EPIDERMALER
KERATINOZYTEN. 11
1.3. ADHAESIONSMECHANISMEN EPIDERMALER KERATINOZYTEN. 14
1.3.1. DER REZEPTORAPPARAT HUMANER EPIDERMALER KERATINOZYTEN. 14
1.3.2. DIE ROLLE VON FIBRONEKTIN UND DEM FIBRONEKTIN-REZEPTOR FUER DIE
ZELLULAEREN FUNKTIONEN HUMANER EPIDERMALER KERATINOZYTEN. 19
2. AUFGABENSTELLUNG. 25
3. MATERIAL UND METHODEN. 27
3.1. MATERIAL. 27
3.1.1. /EILEN UND ZELLINIEN. 27
3.1.2. WASCH-UND KULTURLOESUNGEN. 27
3.1.3. ENZYME ZUR/ELLPRAEPARATION. 27
3.1.4. KULTURMEDIEN UND SUPPLEMENTE. 28
3.1.5. ANTIBIOTIKAZUSAETZE ZU MEDIENKOMBINATIONEN. 28
3.1.6. CHEMIKALIEN. LOESUNGEN UND PUFFER. 29
3.1.7. GERAETE UND XELLKULTURMATERIALIEN. 30
3.1.8. NONNALSEREN UND ANTIKOERPER. 31
3.2. METHODEN. 32
3.2.1. I.AGERUNG UND TRANSPORT DER HAUTPROBEN. 32
3.2.2. PRIMAERPRAEPARATION HUMANER EPIDERMALER KERATINOZYTEN. 32
3.2.3. ANLAGE SERIELLER SUBKULTUREN HUMANER EPIDERMALER KERATINOZYTEN.
33
3.2.4. DIE UNTERSUCHUNG DER WACHSTUMSKINETIK SERIELLER
KERATINOZVTENKULTUREN. 33
111
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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ILLHCILLSVFCLYCICLUILS
3.2.5. DIE ENTWICKLUNG STRATIFIXIERTER KERATINOZYLENKULTUREN UNTER
SERUMLIEIEN MEDIENKONDITIONEN. 34
3.2.6. DIE PRAEPARATION HUMANER EPIDERMALER KERATINOZYTEN IN
EIBRINSUSPENSION. 35
3.2.7. DIE KONSERVIERUNG VON GEVVEBEPRAEPARATEN FUER
IMMUNHISLOEHEMISEHE L NTERSUEHUNGEN. 36
3.2.8. DIE IMMUNZYTOCHEMISCHE FAERBUNG VON GEFRIERSCHNITTEN. 36
3.2.9. DURCHFIUSSZVTOMETRISCHE L NTERSUEHUNGEN. 37
3.2.10. STATISTISCHE UNTERSUCHUNGEN. 38
4. ERGEBNISSE.
39
4.1. WACHSTUNISKINETIK UND MORPHOLOGIE SERUML'REI KULTIVIERTER HUMANER
EPIDERMAIER KERATINOZYTEN. 39
4.1.1. AE LOTPHOLOGIE UND \ ITAIITAET VON KERATINOZYTEN-
PRIMAEIPRAEPARATIONEN.
39
4.1.2. MORPHOLOGIE VON SERUMFREIEN IN VITRO KERATINOZVTEN IN
PRIMAERKULTUREN.
39
4.1.3. WACHSTUMSKINELIK VON PRIMAERKULLUREN SERUMLRCIER
IN VURO
KERATINOZYTEN. 4
1
4.1.4. DIE MORPHOLOGIE SERIELLER SUBKULTUREN HUMANER EPIDERMALER
KERATINOZVTEN. 42
4.1.5. WACHSTUMSKINETISCHE ERHEBUNGEN AN SERUMLIEIEN KERATINOZYTEN
SERIELLER SUBKULTUREN.
43
4.1.6. DIE DIFFERENZIERUNG SERUMFREIER
M VITRO EPIDERMIS. 45
4-1.7. MORPHOLOGIE SERUMFREIER
IN VITRO KERATINOZVTEN IN EINER EIBRIN-
EIBRONEKTIN-SUSPENSION. 46
4 E
8
. WAEHSTUMSKINELIK SERUMIREIER IN VITRO KERATINOZYTEN ALS ZOLL
SUSPENSION IN FIBRIN-FIBRINOGEN-MATRIX.
47
4.2. IINMUNZVTOCHEINISCHE UNTERSUCHUNGEN VON ZYTOSKELCTTPROTEINEN AN
X
NORMALER HUMANER EPIDERMIS IM VERGLEICH ZU IN VITRO KERATINOZYTEN.
49
4.2.1. ZYTOKERATIN 10-\ ERTEILUNG AUL VERSCHIEDENEN KUITURLONNEN
EPIDERMALER
KERATINOZYTEN.
49
4
-
2
.
2
. I )IE \ ERTEILUNG DES ZYTOSKELETTPROLEINS ZYTOKERATIN 14 AUL
VERSCHIEDENEN KUITURLONNEN EPIDERMAIER KERATINOZVTEN. 50
R V YY
1
\
INHALTSVERZEICHNIS
4.2.3. DIE VIMONTIN-VORTEILUNG IN DER EPIDERMIS
IN VIVO
UND
IN VITRO
. 51
4.2.4. INVOLUERIN IN DER EPIDERMIS IN VIVO
UND IN SERUMFREIEN KERATINOZYTEN-
KULTURON VERSCHIEDENER KULTURSTADIEN. 52
4.3. DIE VERTEILUNG VON INTEGRINEN UND DESNIOSOMALEN PROTEINEN IN
HUMANER
EPIDERMIS IM VERGLEICH ZU
IN VITRO
KERATINOZVTEN. 53
4.3.1. DIE VERTEILUNG DER A^-LNTEGRINKETTE IN VIVO
UND
IN VITRO
. 53
4.3.2. DIE VERTEILUNG DER (X,-INTEGRINKETTE
IN VIVO
UND
IN VITRO
. 54
4.3.3. DIE VERTEILUNG DER A
5-INTEGRINKETTE
IN VIVO
UND
IN VITRO
. 55
4.3.4. DIE VERTEILUNG DER (VINTEGRINKETTE
IN VIVO
UND
IN VITRO
. 56
4.3.5. DIE VERTEILUNG DES RLNTEGRINREZEPTORS IN VIVO
UND
IN VITRO
. 57
4.3.6. DIE VERTEILUNG DESMOSOMALER STRUKTUREN
IN VIVO
UND
IN VITRO
. 58
5. DISKUSSION. 59
5.1. WACHSTUMSKINETIK UND KLONHILDUNGSVERHALTEN VON SERUMFREIEN
IN VITRO
KERATINOZVTEN. 59
5.2. DIE TERMINALE DIFFERENZIERUNG SERUMFREIER KERATINOZYTENKULTUREN. 62
5.3. DIE BEDEUTUNG VON ADHAESIONSMOLEKUELEN FUER DIFFERENZIERUNGSVORGAENGE
UND STRUKTUR DER EPIDERMIS
IN VIVO
UND
IN VITRO
. 67
5.4. DER EINFLUSS EINER KIBRIN-EIBRINOGEN-HALTIGEN EXTRAZELLULAERMATRIX
AUF
DAS KULTURVERHALTEN SERUMFREIER
IN VITRO
KERATINOZVTEN . 71
6. ZUSAMMENFASSUNG. 74
7. VERZEICHNIS DER ABBILDUNGEN UND TABELLEN. 78
7.1. TABELLENVERZEICHNIS. 78
7.2. ABBILDUNGSVERZEICHNIS. 78
8. ANHANG-ABBILDUNGEN. 81
9. LITERATURVERZEICHNIS. 103
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