Durchflußzytometrische Funktionstests von Blutzellen zur Bestimmung der Phagozytose von Saccharomyces cerevisiae: eine praxisbezogene Analyse unter besonderer Berücksichtigung von Fremdkörper-Adhäsion, -Ingestion und "respiratory burst"
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2000
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11
INHALTEVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
15
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
17
T
ABELLENVERZEICHNIS
18
1
EINFUEHRUNG
19
1.1
DIE
PHAGOZYTOSE
20
1.1.1
GRUNDSYSTEME
DER
IMMUNABWEHR
20
1
1
2
MECHANISMEN
DER
PHAGOZYTOSE
21
1.1.2.1
ABTOETUNGSMECHANISMEN
23
1.1.2.1.1
SAUERSTOFFUNABHAENGIGE
ABTOETUNG
23
1.1.21.2
SAUERSTOFFABHAENGIGE
ABTOETUNG,
YYRESPIRATORY
BUERST
"
24
1
1.3
ADJUVANTE
AKTIVIERUNG
VON
PHAGOZYTEN
26
1.2
STOERUNGEN
DER
PHAGOZYTOSE
26
1.2.1
WECHSELWIRKUNG
ZWISCHEN
WIRT
UND
ERREGER
26
1.2.2
INFEKTIONSKRANKHEITEN
27
1.2.3
DEFEKTE
DER
IMMUNABWEHR
27
2
THEORETISCHE
GRUNDLEGUNG
DES
EXPERIMENTELLEN
TEILS
29
2.1
STOERUNGEN
DER
PHAGOZYTENFUNKTION
30
2
1.1
STOERUNGEN
DER
PHAGOZYTEN-ADHAESION
UND
DER
CHEMOTAXIS
30
2.1.1
1
LEUKOZYTEN-ADHAESIONS-DEFEKTE
31
2
1.1.2
BIOLOGIE
DER
LEUKOZYTEN-ADHAESIONS-DEFEKTE
31
12
2.1.1.3
KLINISCHE
ZEICHEN
VON
LEUKOZYTEN-ADHAESIONS-DEFEKTEN
32
2.1.2
AKTIN-POLYMERISATIONS-DEFEKT
32
2.1.3
HYPERIMMUNGLOBULIN-E-SYNDROM
(JOB'S
SYNDROME)
33
2.1.3.1
BIOLOGIE
DES
HYPERIMMUNGLOBULIN-E-SYNDROMS
33
2.1.3.2
KLINISCHE
ZEICHEN
DES
HYPERIMMUNGLOBULIN-E-SYNDROMS
33
2.1.4
GEMISCHTE
STOERUNG
DER
CHEMOTAXIS
33
2.2
FUNKTIONELLE
UND
STRUKTURELLE
STOERUNGEN
DER
LYSOSOMALEN
GRANULA
34
2.2.1
CHEDIAK-HIGASHI-SYNDROM
34
2.2.1
1
BIOLOGIE
DES
CHEDIAK-HIGASHI-SYNDROMS
34
2.2.1.2
KLINISCHE
ZEICHEN
DES
CHEDIAK-HIGASHI-SYNDROMS
34
2.2.2
GRISCELLI-SYNDROM
35
2.2.3
SPEZIFISCHER
GRANULA-MANGEL
36
2.3
STOERUNGEN
DES
YYRESPIRATORY
BUERST
"
UND
DER
MIKROBIZIDEN
STOFFWECHSELWEGE
36
2.3.1
SEPTISCHE
GRANULOMATOSE
(CHRONIC
GRANULOMATOUS
DISEASE,
CGD)
36
2.3.1.1
BIOLOGIE
DER
SEPTISCHEN
GRANULOMATOSE
36
2.3.1.2
KLINISCHE
ZEICHEN
DER
SEPTISCHEN
GRANULOMATOSE
37
2.3.2
GLUKOSE-6-PHOSPHAT
DEHYDROGENASE
(G6PD)-MANGEL
DER
NEUTROPHILEN
GRANULOZYTEN
38
2.3.3
STOERUNGEN
DES
GLUTATHION-METABOLISMUS
'
38
2.3.4
MYELOPEROXIDASE
(MPO)-MANGEL
39
2.4
SACCHAROMYCES
CEREVISIAE
39
2.4.1
ALLGEMEINE
EINFUEHRUNG
39
2.4.2
KLASSIFIKATION
VON
PILZEN
UND
HEFEN
40
2.4.3
EIGENSCHAFTEN
VON
HEFEZELLEN
41
13
2.5
FLUORESCEIN
ISOTHIOCYANAT,
FITC
43
26
2
'
,7
'
-DICHLOROFLUORESCEIN
DIACETAT
43
2.7
GRUNDLAGEN
DER
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
45
2.7.1
PHYSIKALISCHE
GRUNDLAGEN
45
2.7.1.1
LICHTQUELLE
45
2
7
1.2
LICHTSTREUUNG
46
2.7.1
3
FLUORESZENZ
46
2.7.2
AUFBAU
UND
FUNKTION
EINES
DURCHFLUSSZYTOMETERS
47
2.7.3
DARSTELLUNG
DER
MESSERGEBNISSE
49
2.7.3.1
EINPARAMETERDARSTELLUNG
UND
KORRELIERTE
ZWEIPARAMETERDARSTELLUNG
49
2.7.3.2
BEISPIELE
FUER
DIE
DARSTELLUNG
VON
MESSERGEBNISSEN
49
2.7.4
DEFINIEREN
VON
AUSWERTEFENSTERN
(GATING)
55
3
PRAKTISCHE
DURCHFUEHRUNG
DES
EXPERIMENTELLEN
TEILS
61
3.1
ZIELSETZUNG
62
3.2
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
BESTIMMUNG
DER
ADHAESION
VON
FITC
62
MARKIERTEN
SACCHAROMYCES
CEREVISIAE-PARTIKELN
AN
PHAGOZYTEN
3.21
MATERIAL
UND
METHODEN
62
3.2.1.1
DEGENERATION
UND
VORBEREITUNG
DER
HEFE
62
3.2.1.2
GRANULOZYTENGEWINNUNG
UND
INKUBATIONSANSATZ
63
3.2.1.3
DURCHFUEHRUNG
DER
MESSUNG
AM
DURCHFLUSSZYTOMETER
64
3
2
2
ERGEBNISSE
64
3.3
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
DIFFERENZIERUNG
ZWISCHEN
ADHAERIERTEN
68
UND
INGESTIERTEN
HEFEZELLEN
MITTELS
YYQUENCHING
"
3.3.1
MATERIAL
UND
METHODEN
68
14
3.3.2
ERGEBNISSE
69
3.4
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
BESTIMMUNG
DES
YYRESPIRATORY
BUERST
"
MITTELS
2',7
'
-DICHLOROFLUORESCEIN
DIACETAT
71
3.4.1
MATERIAL
UND
METHODEN
71
3.4.2
ERGEBNISSE
71
3.5
ZUSATZUNTERSUCHUNGEN
72
3.5.1
MESSUNG
DER
EIGENFLUORESZENZ
DER
GRANULOZYTEN
72
3.5.2
LANGZEITMESSUNG
VON
FITC-MARKIERTEN
SACCHAROMYCES
CEREVISIAE-PARTIKELN
74
4
DISKUSSION
77
5
ZUSAMMENFASSUNG
87
6
LITERATURVERZEICHNIS
89
LEBENSLAUF
115 |
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