Kontextspezifität der Notch-Signaltransduktion während der Imaginalentwicklung von Drosophila melanogaster:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1999
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 155 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1
DIE
IMAGINALENTWICKLUNG
1
1.2
DER
NOTCH-SIGNALWEG
AM
BEISPIEL
DER
LATERALEN
INHIBITION
6
1.3
DIE
KOMPONENTEN
DES
N-SIGNAL
WEGES
UND
IHRE
ROLLE
BEI
DER
SIGNALTRANSDUKTION
10
1.3.1
DER
N-REZEPTOR
UND
SEINE
AKTIVIERUNG
10
1.3.2
DIE
LIGANDEN
VON
N
SOWIE
WEITERE
EXTRAZELLULAERE
MODULATOREN
DES
N
SIGNALWEGS
11
1.3.3
DIE
WEITERLEITUNG
DES
N-SIGNALS
12
1.3.4
N-ZIELGENE
14
1.3.5
DIE
REPRESSION
DES
N-SIGNALS
16
1.4
KATALOGISIERUNG
WEITERER
N-VERMITTELTER
PROZESSE
17
1.4.1
ZELLTYPSPEZIFIZIERUNG
/
ASYMMETRISCHE
ZELLTEILUNG
17
1.4.2
INDUKTIVE
WIRKUNG
20
1.4.2.1
PRONEURALE
SIGNALWIRKUNG
WAEHREND
DER
AUGENENTWICKLUNG
20
1.4.2.2
ETABLIERUNG
DER
D/V-GRENZE
DES
FLUEGELS
21
1.4.3
PROLIFERATION
UND
APOPTOSE
23
1.5
ZIELE
DER
ARBEIT
24
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
25
2.1
COMPUTERGESTUETZTE
ARBEITEN
25
2.1.1
INTERNET-ADRESSEN
25
2.1.2
PROGRAMME
ZUR
BILD
UND
TEXTVERARBEITUNG
25
2.2
MOLEKULARGENETISCHE
ARBEITSTECHNIKEN
25
2.2.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
MATERIALIEN
26
2.2.1.1
KITS
UND
CHEMIKALIEN
26
2.2.1.2
BAKTERIENSTAEMME
26
2.2.1.3
HEFESTAEMME
26
2.2.1.4
VEKTOREN
27
2.2.1.5
PRIMER
(OLIGONUKLEOTIDE)
27
2.2.1.6
SUBKLONE
29
2.2.2
DNA-PLASMIDKONSTRUKTE
30
2.2.2.1
LISTE
DER
ERZEUGTEN
ENDKONSTRUKTE
31
2.2.2.1.1
BTKS
UND
PUAST-KONSTRUKTE
31
2.2.2.1.2
HEFEVEKTORENKONSTRUKTE
32
2.2.3
IN
VITRO-MUTAGENESE
33
2.2.4
ERZEUGUNG
VON
DSRNA
34
2.2.5
FLIEGEN-PCR
ZUR
GENOTYPISIERUNG
EINZELNER
FLIEGEN
35
2.2.6
INTERAKTIONSSTUDIEN
IM
YEAST
TWO-HYBRID
SYSTEM
36
2.2.6.1
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
HEFEZELLEN
UND
TRANSFORMATION
37
2.2.6.2
NACHWEIS
DER
EXPRESSION
DER
LEXA
BZW.
B42-FUSIONSPROTEINE
37
2.2.6.3
INTERAKTIONSSTUDIEN
AUF
X-GAL-INDIKATORPLATTEN
37
2.2.6.4
QUANTIFIZIERUNG
DER
SS-GALAKTOSIDASE-AKTIVITAET
38
2.3
ENTWICKLUNGSGENETISCHE
ARBEITEN
38
2.3.0
UEBERSICHT
UEBER
DIE
WICHTIGSTEN
GENNAMEN
38
2.3.1
ALLGEMEINE
METHODEN
40
2.3.2
KEIMBAHNTRANSFORMATION
41
2.3.3
DSRNA-INJEKTIONEN
41
2.3.4
EKTOPISCHE
FEHLEXPRESSION
MIT
HILFE
DES
GAL4/UAS
SYSTEMS
41
2.3.5
ERZEUGUNG
VON
MITOTISCHEN
REKOMBINANTEN
MITTELS
FLP/FRT
TECHNIK
42
2.3.5.1
ERZEUGUNG
MUTANTER
ZELLKLONE
IN
IMAGINALEM
UND
PUPALEM
GEWEBE
42
2.3.5.2
ERZEUGUNG
VON
SU(H)
MUTANTEN
KEIMBAHNKLONEN
PER
DSF-TECHNIK
42
2.3.6
VERWENDETE
FLIEGENSTAEMME
UND
BALANCERCHROMOSOMEN
42
2.3.7
HISTOLOGISCHE
ARBEITSTECHNIKEN
45
2.3.7.1
PRAEPARATION
VON
EMBRYONEN,
IMAGINALSCHEIBEN
UND
PUPALEN
RUECKENSCHILDEM
45
2.3.7.1.1
ABSAMMELN,
DECHORIONIEREN,
FIXIEREN
UND
DEVITELLINISIEREN
VON
EMBRYONEN
45
2.3.7.1.2
FIXIERUNG
UND
DEVITELLINISIERUNG
VON
DSRNA
INJIZIERTEN
EMBRYONEN
45
2.3.7.1.3
PRAEPARATION
UND
FIXIERUNG
VON
IMAGINALSCHEIBEN
46
2.3.7.1.4
PRAEPARATION
UND
FIXIERUNG
VON
PUPALEN
RUECKENSCHILDEM
46
2.3.7.2
ANTIKOERPERFAERBUNGEN
46
2.3.7.3
LISTE
DER
VERWENDETEN
ANTIKOERPER
47
2.3.7.3.1
PRIMAERE
ANTIKOERPER
47
2.3.7.3.2
SEKUNDAERE
ANTIKOERPER
48
2.3.7.4
IN
SITU
HYBRIDISIERUNGEN
48
2.3.7.4.1
HERSTELLUNG
UND
MARKIERUNG
DER
VERWENDETEN
SONDEN
48
2.3.7.4.2
IN
SITU
HYBRIDISIERUNGEN
AUF
EMBRYONEN
48
2.3.7.4.3
IN
SITU
HYBRIDISIERUNGEN
AUF
IMAGINALSCHEIBEN
49
2.3.7.4.4
B-GAL-AKTIVITAETSFAERBUNGEN
VON
IMAGINALSCHEIBEN
49
2.3.7.5
APOPTOSIS-FAERBUNG
AN
IMAGINALGEWEBE
50
2.3.7.6
BRDU-MARKIERUNG
IMAGINALEN
GEWEBES
50
2.3.1.
7
KUTIKULA-PRAEPARATION
VON
EMBRYONEN
50
2.4
DOKUMENTATION
51
3.
ERGEBNISSE
52
3.1
DIE
VERMITTLUNG
DER
ZELLTYPSPEZIFIZIENING
BERUHT
AUF
EINER
MOLEKULAR
ANDERSARTIGEN
N-SIGNALTRANSDUKTION
ALS
DIE
LATERALE
INHIBITION
52
3.1.1
ANALYSEN
ZUR
ROLLE
DES
E(SPL)
GENKOMPLEXES
SOWIE
DES
PRONEURALEN
GENS
L
'
SC
BEI
DER
BORSTENENTWICKLUNG
53
3.1.2
IST
SU(H)
NICHT
DER
ZENTRALE
UEBERMITTLER
ALLER
N-ABHAENGIGEN
ENTSCHEIDUNGEN
BEI
DER
BORSTENENTWICKLUNG?
57
3.1.3
DER
N-ANTAGONIST
H
BESITZT
SU(H)-UNABHAENGIGE
FUNKTION
BEI
DER
BORSTENENTWICKLUNG
59
3.1.4
DIE
ROLLE
DER
N-SIGNALWEGKOMPONENTEN
DELTEX
(DX)
UND
MASTERMIND
(MAM)
62
3.1.5
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
FUNKTIONELLEN
UND
MOLEKULAREN
BEZIEHUNG
ZWISCHEN
NUMB
(NB),
H
UND
SU(H)
63
3.2
NEUARTIGE
N-ZIELGENE
IM
E(SPL)-C
WIRKEN
IM
PROZESS
DER
LATERALEN
INHIBITION
65
3.2.1
UEBEREXPRESSION
VON
M2
UND
M4/MA
MIT
HILFE
DES
GAL4/U
AS
SYSTEMS
66
3.2.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
ANTAGONISTISCHEN
WIRKUNGSWEISE
VON
M4/MA
68
3.2.2.1
BESITZT
M4/MA
PRONEURALEN
ODER
ANTAGONISTISCHEN
CHARAKTER?
68
3.2.2.2
WIE
WIRKT
M4/MA
DER
LATERALEN
INHIBITION
WAEHREND
BORSTENENTWICKLUNG
ENTGEGEN?
68
3.2.2.3
MOLEKULARE
INTERAKTIONSSTUDIEN
ZU
M2,
M4
UND
MA:
M4
IST
EIN
CYTOSOLISCHES
PROTEIN
70
3.2.2.4
BLOCKIERUNG
DER
M4/MA
GENAKTIVITAET
DURCH
RNA-INTERFERENZ
(RNAI)
72
3.3
DAS
REZESSIVE
TV-ALLEL
SPLIT
(SPL)
BETRIFFT
PRIMAER
DIE
PRONEURALE
N-AKTIVITAET
WAEHREND
DER
AUGENENTWICKLUNG
75
3.3.1
DAS
W^-ALLEL
VERHAELT
SICH
IM
PRONEURALEN
INDUKTIONSPROZESS
WIE
EINE
VERLUSTMUTATION
VON
N
76
3.3.2
AUF
WELCHER
EBENE
INTERFERIERT
E(SPL)
D
MIT
N
SPL
?
77
3.3.3
DIE
DOMINANTE
VERSTAERKUNG
VON
N^'
IST
DURCH
PRONEURALE
GENE
BEEINFLUSSBAR
79
3.3.4
VERAENDERTE
PROTEIN-PROTEIN
WECHSELWIRKUNGEN
LIEGEN
DER
WIRKUNG
VON
E(SPL)
D
ZUGRUNDE
81
3.4
EIN
GEGABELTES
N-SIGNAL
VERURSACHT
DIE
INDUKTION
DER
CUT
(CT)-EXPRESSION
ENTLANG
DER
ZUKUENFTIGEN
FLUEGELKANTE
82
3.4.1
ANALYSEN
ZUR
BEDEUTUNG
VON
SU(H)
ALS
N-SIGNALVERMITTLER
BEI
DER
CT
AKTIVIERUNG
83
3.4.2
UEBERPRUEFUNG
DER
FUNKTIONELLEN
AKTIVITAET
DES
PUAST-SUH-KONSTRUKTES
85
3.4.3
STUDIEN
ZUR
N
BZW.
SU(H)-ABHAENGIGKEIT
VON
GENEN,
DIE
EINE
BEKANNTE
ODER
POSTULIERTE
FUNKTION
BEI
DER
ETABLIERUNG
DER
KANTENSPEZIFISCHEN
CT-EXPRESSION
HABEN
86
3.4.3.1
EINFLUSS
AUF
WINGLESS(WG)
REGULATION
86
3.4.3.2
DIE
ROLLE
VON
MASTERMIND
(MAM)
88
3.4.3.3
EINFLUSS
AUF
SCALLOPED
(SD)
90
3.4.3.4
EINFLUSS
AUF
STRAWBERRY
NOTCH(SNO)
91
3.4.4
MOLEKULARE
INTERAKTIONEN
ZWISCHEN
DEN
POTENZIELLEN
CT-REGULATOREN
92
3.4.5
KO-EXPRESSIONSVERSUCHE
MIT
WG
UND
SU(H)
93
3.4.6
ANALYSEN
VON
N/SU(H)
ABHAENGIGKEIT
VON
SD,
SNO,
WG
UND
CT
IN
ANDEREN
ZELL
UND
GEWEBETYPEN
95
3.5
EINFLUSS
DES
N-SIGNALWEGS
AUF
PROLIFERATIONSPROZESSE
96
3.5.1
ROLLE
DER
MORPHOGENE
WG
UND
DPP
AUF
DIE
SU(H)
VERMITTELTEN
PROLIFERATIONSPROZESSE
100
3.5.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
INTERAKTION
VON
H
MIT
DEM
DER-SIGNALWEG
102
3.5.3
BEEINFLUSST
DIE
FEHLERHAFTE
AKTIVIERUNG
DES
N-SIGNALWEGS
DEN
ZELLZYKLUS?
103
3.5.4
UEBT
DAS
N-SIGNAL
EINEN
EINFLUSS
AUF
APOPTOTISCHE
PROZESSE
AUS?
106
4.
DISKUSSION
109
4.1
DAS
ZELLULAERE
WIRKUNGSSPEKTRUM
DES
N-SIGNALWEGS
110
4.1.1
NEUARTIGE
N-ZIELGENE
IM
E(SPL)-C
WIRKEN
IM
PROZESS
DER
LATERALEN
INHIBITION
110
4.2
EINFLUSS
DES
N-SIGNALWEGS
AUF
DIE
SPEZIFIZIERUNG
UNTERSCHIEDLICHER
ZELLTYPEN
114
4.2.1
DER
N-ANTAGONIST
H
WIRKT
AUF
ALLEN
EBENEN
DER
BORSTENENTWICKLUNG
115
4.2.2
VERGLEICH
DER
ANTAGONISTISCHEN
WIRKUNGSWEISE
VON
H
UND
NB
115
4.2.3
H
BEEINFLUSST
DIE
PLLB
DIFFERENZIERUNG
NICHT
UEBER
SU(H)
116
4.2.4
UNTERSCHIEDLICHE
INTRAZELLULAERE
N-SIGNALTRANSDUKTOREN
VERMITTELN
DIE
SPEZIFISCHEN
DIFFERENZIERUNGSPROZESSE
IM
BORSTEN-ZELLSTAMMBAUM
117
4.3
ROLLE
DES
N-SIGNALWEGS
BEI
DER
DIFFERENZIERUNG
DER
AUGENIMAGINALSCHEIBE
118
4.3.1
N*
PL
BETRIFFT
SPEZIFISCH
DAS
PRONEURALE
N-SIGNAL
119
4.3.2
DIE
VERSTAERKUNG
DES
SPL
AUGENPHAENOTYPS
DURCH
E(SPL)
D
WIRD
AUF
EBENE
DER
LATERALEN
INHIBITION
VERMITTELT
120
4.4
DIE
AKTIVIERUNG
VON
CT
ENTLANG
DER
D/V
GRENZE
DES
FLUEGELS
WIRD
DURCH
EIN
GEGABELTES
N-SIGNAL
VERMITTELT
122
4.4.1
DIE
CT-EXPRESSION
IST
NUR
AN
DER
FLUEGELKANTE
FUER
DAS
N-SIGNAL
SENSITIV
124
4.5
WIRKUNGEN
DES
N-SIGNALWEGS
AUF
PROLIFERATION
UND
APOPTOSE
125
4.5.1
N-INDUZIERTE
PROLIFERATION
IST
ZEIT
UND
GEWEBESPEZIFISCH
UND
NICHT
NUR
DURCH
DIE
INDUKTION
DER
MORPHOGENE
WG
UND
DPP
ZU
ERKLAEREN
126
4.5.2
DER
N-SIGNALWEG
BEEINFLUSST
DEN
ZELLZYKLUS
UND
APOPTOSE
127
4.6
AUSBLICK
130
5.
ZUSAMMENFASSUNG
133
6.
LITERATUR
135 |
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| author | Nagel, Anja Christina |
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