Amotio retinae und proliferative Vitreoretinopathie: neue pathophysiologische und therapeutische Aspekte
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
I. EINLEITUNG G
1. AMOTIO RETINAE 8
2. PROLIFERATIVE VITREORETINOPATHIE 8
2.1. PATHOGENESE DER PROLIFERATIVEN VITREORETINOPATHIE 9
V
2.1.1. ZUSAMMENBRUCH DER BLUT-RETINA-SCHRANKE 9
2.1.2. MIGRATION UND PROLIFERATION 9
2.1.3. EXTRAZELLULAERE MATRIX 10
2.1.4 KONTRAKTION 10
2.2. KLASSIFIKATION DER PROLIFERATIVEN VITREORETINOPATHIE 11
2.2.1. DEFINITION DER POSTERIOREN PROLIFERATIVEN VITREORETINOPATHIE 12
\
2.2.2. DEFINITION DER ANTERIOREN PROLIFERATIVEN VITREORETINOPATHIE 12
2.3. PRAEVALENZ DER PROLIFERATIVEN VITREORETINOPATHIE 12
3. MUELLERZELL VERAENDERUNGEN BEI AMOTIO RETINAE UND PVR 12
3.1. MORPHOLOGISCHE UND IMMUNZYTOCHEMISCHE VERAENDERUNGEN DER 14
MUELLERZELLE BEI AMOTIO RETINAE UND PVR
3.2. ELEKTROPHYSIOLOGISCHE VERAENDERUNGEN DER MUELLERZELLE BEI AMOTIO 15
RETINAE UND PVR
4. MEDIKAMENTOESE THERAPIEANSAETZE ZUR BEHANDLUNG DER PVR 15
4.1. MEDIKAMENTOESE BEEINFLUSSUNG DER MIGRATION UND PROLIFERATION 16
4.2. MEDIKAMENTOESE BEEINFLUSSUNG DER BILDUNG DER EXTRAZELLULAEREN MATRIX
16
4.3. MEDIKAMENTOESE BEEINFLUSSUNG DER KONTRAKTION 16
5. DER KALZIUMANTAGONIST VERAPAMIL 17
5.1. DER KALZIUMANTAGONIST VERAPAMIL ZUR BEHANDLUNG DER KONTRAKTION 18
DER PVR
6. 360-RETINEKTOMIE ZUR BEHANDLUNG DER SCHWEREN ANTERIOREN PVR 19
7. NETZHAUTABLOESUNG MIT NACHFOLGENDER MAKULATRANSLOKATION ZUR 20
BEHANDLUNG DER ALTERSABHAENGIGEN MAKULADEGENERATION: EINFLUSS
VERSCHIEDENER SPUELLOESUNGEN
3
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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II. MATERIAL UND METHODE 23
1. TIERMODELL ZUR UNTERSUCHUNG DER MUELLERZELLVERAENDERUNGEN BEI 23
AMOTIO RETINAE UND PVR
1.1. EXPERIMENTELLE NETZHAUTABLOESUNG 23
1.2. OPHTHALMOLOGISCHE BEFUNDE DER VERSUCHSTIERE NACH EXPERIMENTELLER -
24
AMOTIO RETINAE
1.3. PRAEPARATION DES RETINALEN GEWEBES FUER DIE IMMUNHISTOCHEMISCHEN 25
UNTERSUCHUNGEN
1.4. IMMUNHISTOCHEMIE UND LICHTMIKROSKOPIE DER RETINALEN GEWEBE 25
1.4.1. FIXIERUNG 25
1.4.2. EINBETTEN UND SCHNEIDEN 26
1.4.3. IMMUNHISTOCHEMIE DER PARAFFINSCHNITTE 26
1.4.4. IMMUNHISTOCHEMIE DER KRYOSCHNITTE* ~ 27
1.4.4.1. PRIMAERANTIKOERPER 28
1.4.4.2. SEKUNDAERANTIKOERPER 28
1.5. IMMUNHISTOCHEMIE DER ISOLIERTEN MUELLERZELLEN 29
1.6. MIKROSKOPIE UND BILDVERARBEITUNG 29
1.7. ELEKTRONENMIKROSKOPIE 30
1.7.1. FIXIERUNG UND KONTRASTIERUNG 30
1.7.2. EINBETTUNG 30
1.7.3. SEMI- UND ULTRADUENNSCHNITTE 31
1.7.4. ELEKTRONENMIKROSKQPIE UND BILDVERARBEITUNG 31
2. ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EXPERIMENTE ZUR BESTIMMUNG DER 31
KALIUMLEITFAEHIGKEIT UND DES MEMBRANPOTENTIALS DER MUELLERZELLE
2.1. ISOLIERUNG DER MUELLERZELLEN 31
2.3. ELEKTROPHYSIOLOGISCHE MESSUNGEN 32
2.4. AUSWERTUNG UND DATENANALYSE 33
3. VERAPAMIL ZUR BEHANDLUNG DER KONTRAKTION DER PVR 34
3.1. IN-VITRO-RPE-ZELLKULTUR 34
3.1.1. SPENDERAUSWAHL UND SPENDERDATEN 34
3.1.2. KULTIVIERUNG DER HUMANEN RETINALEN PIGMENTEPITHELZELLEN 34
3.2. HERSTELLUNG DER VERAPAMIL-GEBRAUCHSLOESUNG 35
3.3. ANFERTIGUNG DER KOLLAGENGELE 36
3.3.1. HERSTELLUNG DER GEL-GEBRAUCHSLOESUNG 36
4
3.3.2. EINBRINGEN DER ZELLEN UND POLYMERISATION 36
3.3.3. INKUBATION DER GELE 37
3.4. QUANTIFIZIERUNG DER GELKONTRAKTION 38
3.5. STATISTIK 40
4. 360-RETINEKTOMIE ZUR BEHANDLUNG DER SCHWEREN ANTERIOREN PVR - 41
5. KALZIUM- UND MAGNESIUMFREIE SPUELLOESUNG ZUR ERLEICHTERUNG EINER 42
NETZHAUTABLOESUNG BEI DER MAKULATRANSLOKATIONSCHIRURGIE
5.1. INDUZIERUNG EINER NETZHAUTABLOESUNG 42
5.2. PRAEPARATION DER ABGELOESTEN NETZHAUT 43
5.3. MIKROSKOPIE UND RPE-QUANTIFIZIERUNG 43
5.4. ELEKTRONENMIKROSKOPIE 44
5.4.1. FIXIERUNG UND KONTRASTIERUNG 44
5.4.2. EINBETTUNG ~ 44
5.4.3. SEMI- UND ULTRADUENNSCHNITTE 45
5.4.4. MIKROSKOPIE 45
III. ERGEBNISSE 46
1. ERGEBNISSE DER MUELLERZELLVERAENDERUNGEN BEI AMOTIO RETINAE UND PVR 46
1.1. MORPHOLOGISCHE DARSTELLUNG EINER GESUNDEN HUMANEN NETZHAUT 46
1.2. MORPHOLOGISCHE DARSTELLUNG EINER GESUNDEN KANINCHENNETZHAUT 47
1.3. MORPHOLOGISCHE VERAENDERUNGEN DER MUELLERZELLE BEI AMOTIO RETINAE 48
DER KANINCHENRETINA
\
1.3.1. LICHTMIKROSKOPIE DER KANINCHENRETINA NACH NETZHAUTABLOESUNG 48
1.3.2. ULTRASTRUKTURELLE VERAENDERUNGEN DER MUELLERZELLE BEI AMOTIO 49
RETINAE DER KANINCHENRETINA
1.3.3. ULTRASTRUKTURELLE VERAENDERUNGEN DER MUELLERZELLE IN DER 50
UNMITTELBAR DER NETZHAUTABLOESUNG BENACHBARTEN ANLIEGENDEN NETZHAUT
1.4. MORPHOLOGISCHE VERAENDERUNGEN DER MUELLERZELLE BEI PVR DER 52
KANINCHENRETINA
1.4.1. MIGRATION EINER MUELLERZELLE 52
1.4.2. PHAGOZYTOTISCHE AKTIVITAET DER MUELLERZELLEN BEI PVR 53
1.5. IMMUNHISTOCHEMIE DER HUMANEN NETZHAUT 55
1.5.1. IMMUNHISTOCHEMIE DER GESUNDEN HUMANEN NETZHAUT 55
1.5.2. IMMUNHISTOCHEMIE DER HUMANEN NETZHAUT BEI PVR 56
5
1.5.3. AKUT ISOLIERTE HUMANE MUELLERZELLEN 57
1.6. IMMUNHISTOCHEMIE DER KANINCHENRETINA BEI AMOTIO RETINAE UND PVR 58
1.6.1. VIMENTIN-IMMUNREAKTIVITAET DER KANINCHENRETINA BEI AMOTIO 58
RETINAE
1.6.2. GFAP-IMMUNREAKTIVITAET DER KANINCHENRETINA BEI AMOTIO RETINAE - 59
1.6.3. IMMUNREAKTIVITAET DER KANINCHENNETZHAUT BEI PVR 61
1.6.4. PCNA-IMMUNREAKTIVITAET DER KANINCHENETZHAUT BEI AMOTIO RETINAE 61
UND PVR
1.7. EINWAERTS-YYGLEICHRICHTENDE" KALIUMSTROEME DER MUELLERZELLE BEI AMOTIO
63
UND PVR
1.8. KORRELATION ZWISCHEN STROMDICHTE UND MEMBRANPOTENTIAL BEI AMOTIO 64
RETINAE UND PVR BEIM KANINCHEN
2. KONTRAKTIONSHEMMENDE WIRKUNG DES VERAPAMILS UND SEINER' 66
ENANTIOMERE IN EINEM KONTRAKTIONSMODELL DER PVR
2.1. KOLLAGENGEL-KONTRAKTIONSMODELL 66
2.1.1. AUSWAHL DER ZELLEN 66
2.1.2. HERSTELLUNG DER KOLLAGENGELE 67
2.1.3. KINETIK DER KONTRAKTION 67
2.2. ZUBEREITUNG DER VERAPAMILGEBRAUCHSLOESUNG 68
2.3. KONTRAKTIONSHEMMUNG DURCH VERAPAMIL 68
2.4. STATISTISCHE AUSWERTUNG 72
2.4.1. KONTRAKTIONSHEMMQNG DURCH VERAPAMIL 72
2.4.2. KONTRAKTIONSHEMMUNG DER ISOFORMEN DES VERAPAMILS 72
2.4.3. EINFLUSSGROESSE VON ALTER UND GESCHLECHT 72
3. 360-RETINEKTOMIE BEI SCHWERER ANTERIORER PVR 73
4. NETZHAUTABLOESUNG MIT NACHFOLGENDER MAKULATRANSLOKATION ZUR 76
BEHANDLUNG DER ALTERSABHAENGIGEN MAKULADEGENERATION: EINFLUSS
VERSCHIEDENER SPUELLOESUNGEN
4.1. RPE-ZELLVERLUST: KALZIUMCHLORID- UND MAGNESIUMCHLORIDHALTIGE VERSUS
76
KALZIUMCHLORID- UND MAGNESIUMCHLORIDFREIE SPUELLOESUNG
4.2. RPE-ZELLVERLUST DER KALZIUMCHLORID- UND MAGNESIUMCHLORIDFREIEN 81
SPUELLOESUNG BEI RAUMTEMPERATUR UND BEI KOERPERTEMPERATUR
IV. DISKUSSION 82
1. MUELLERZELLVERAENDERUNGEN BEI AMOTIO RETINAE UND PVR 82
6
2. KALZIUMANTAGONIST VERAPAMIL ZUR BEHANDLUNG DER KONTRAKTION DER PVR 85
3. 360-RETINEKTOMIE ZUR BEHANDLUNG DER SCHWEREN ANTERIOREN PVR 90
4. NETZHAUTABLOESUNG MIT NACHFOLGENDER MAKULATRANSLOKATION ZUR BEHANDLUNG
92
DER ALTERSABHAENGIGEN MAKULADEGENERATION : EINFLUSS VERSCHIEDENER
SPUELLOESUNGEN
V. ZUSAMMENFASSUNG 95
VI. LITERATUR 98
ERKLAERUNG UEBER DIE EIGENSTAENDIGE ABFASSUNG DER ARBEIT 105
LEBENSLAUF 107
DANKSAGUNG 109 |
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