Identifizierung an der Neurogenese von Drosophila melanogaster beteiligter Gene:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1
SPEZIFIZIERUNG
DER
MECHANOSENSORISCHEN
BORSTEN
1
1.1.1
DIE
PRONEURALEN
GENE
2
1.1.2
REGULATION
DER
PRONEURALEN
GENE
3
1.1.3
MUTUELLE
INHIBITION
5
1.1.4
LATERALE
INHIBITION
5
1.2
EXPERIMENTELLE
ANSAETZE
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
BISHER
UNBEKANNTER
FAKTOREN
7
1.2.1
EKTOPISCHE
EXPRESSION
VON
L'SC
FUHRT
ZU
DOMINANTEN
PHAENOTYPEN
7
1.2.2
METHODE
DER
GENDOSIS-TITRATION
8
1.2.3
SUPPRESSIONS
SUBTRAKTIVE
HYBRIDISIERUNG/PCR-SELECT
9
1.3
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
9
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
11
2.1
GENETISCHE
METHODEN
11
2.1.1
GENETISCHE
VARIATIONEN
11
2.1.2
FLIEGENZUCHT
UND
EMBRYONEN
13
2.1.3
MUTAGENESEN
14
2.1.3.1
EMS-MUTAGENESE
14
2.1.3.2
ROENTGENMUTAGENESE
14
2.1.3.3
P-ELEMENT-INDUZIERTE
MUTATIONEN
15
2.1.4
KOMPLEMENTATIONSANALYSE
16
2.1.5
MEIOTISCHE
KARTIERUNG
17
2.1.6
A
2
'
3
-RE
VERSION
18
2.1.7
INDUKTION
VON
KLONEN
MIT
DEM
FRT/FLP-SYSTEM
20
2.2
HISTOCHEMISCHE
METHODEN
22
2.2.1
DECHORIONISIERUNG
VON
EMBRYONEN
23
2.2.2
FIXIEREN
UND
DEVITELLINISIEREN
VON
EMBRYONEN
23
2.2.3
ANTIKOERPERFARBUNGEN
23
2.2.4
SS-GAL-AKTIVITAETSFAERBUNGEN
AN
IMAGINALSCHEIBEN
24
2.2.5
KUTIKULA-PRAEPARATION
25
2.2.6
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
25
2.3
MOLEKULARBIOLOGISCHE
MATERIALIEN
27
2.3.1
CHEMIKALIEN
27
2.3.2
ENZYME
27
2.3.3
HAEUFIG
VERWENDETE
PUFFER
UND
MEDIEN
27
2.3.4
BAKTERIENSTAEMME
29
2.3.5
VEKTOREN
30
2.3.6
DNA-KLONE
31
H
2.4
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
33
2.4.1
ISOLIERUNG VON DNA
33
2.4.1.1
PLASMID-DNA-MINIPRAEPARATION
33
2.4.1.2
PLASMID-DNA-MIDI/MAXIPRAEPARATION
34
2.4.1.3
PRAEPARATION
VON
P]-PHAGEN
DNA
34
2.4.2
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
34
2.4.3
KLONIERUNG
GENOMISCHER
REGIONEN,
DIE
DIE
INSERTIONSSTELLE
DER
P-ELEMENTE
FLANKIEREN
35
2.4.4 PRAEPARATION
VON
GESAMT-RNA
37
2.4.5
PRAEPARATION
VON
POLY
A+-RNA
38
2.4.6
TRANSFER
VON
DNA
AUF
NYLONMEMBRANEN
(SOUTHERN
BLOT)
38
2.4.7
TRANSFER
VON
RNA
AUF
NYLONMEMBRANEN
(NORTHERN
BLOT)
39
2.4.8
KOLONIE-HYBRIDISIERUNG.
39
2.4.9
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA-SONDEN
40
2.4.10
DIGOXIGENIN-MARKIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
40
2.4.11
HYBRIDISIERUNG
RADIOAKTIV
MARKIERTER
SONDEN
AN
FILTERGEBUNDENE
DNA
ODER
RNA
41
2.4.12
HYBRIDISIERUNG
DIG-MARKIERTER
SONDEN
AN
FILTERGEBUNDENE
DNA
41
2.4.13
SEQUENZIERUNG
42
2.4.14
COMPUTERGESTUETZTE
ANALYSE
DER
SEQUENZDATEN
43
III
2.5
HERSTELLUNG
DER
SUBTRAKTIVEN
CDNA
BANKEN
44
2.5.1
CDNA-SYNTHESE
MIT
SMART-PCR
44
2.5.2
SUPPRESSIONS
SUBTRAKTIVE
HYBRIDISIERUNG/PCR-SELECT-TECHNIK
45
2.5.3
EFFIZIENZANALYSE
DER
SUPPRESSIONS
SUBTRAKTIVE
HYBRIDISIERUNG/PCR-SELECT-TECHNIK
48
2.5.4
ANALYSE
DER
SUBTRAHIERTEN
CDNA-BANK
48
3.
ERGEBNISSE
49
3.1
SUCHE
NACH
GENEN,
DIE
AN
DEN
ERSTEN
PHASEN
DER
NEUROGENESE
IN
DROSOPHILA
BETEILIGT
SIND
49
3.1.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
MUTAGENESEDATEN
51
3.1.2
ERGEBNIS
DER
KOMPLEMENTATIONSANALYSE
52
3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
IDENTIFIZIERTEN
P-ELEMENT
INDUZIERTEN
ALLELE
54
3.2.1
P-ELEMENT
INDUZIERTE
ALLELE
DES
ZWEITEN
CHROMOSOMS
54
3.2.2
P-ELEMENT
INDUZIERTE
ALLELE
DES
DRITTEN
CHROMOSOMS
58
3.2.2.1
42%
DER
P-INSERTIONEN
SIND
MEHRFACHINSERTIONEN
65
3.2.2.2
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKANALYSE
66
3.3
VORSTELLUNG
DER
NEU
IDENTIFIZIERTEN
GENE
69
3.3.1
EIF-4A
69
3.3.2
PATCHED
69
3.3.3
1(2)02647
71
IV
3.3.3.1
1(2)02467
LIEGT
IN
UNMITTELBARER
NAEHE
ZWEIER
TRANSKRIPTIONSEINHEITEN
71
3.3.3.21(2)02647
IST
EIN
ALLEL
DES
GENS
HRP48
72
3.3.4
1(2)05847
73
3.3.4.1
ISOLATION
VON
27.5
KB
GENOMISCHER
DNA
DURCH
"CHROMOSOMALES
WANDERN"
75
3.3.4.2
DIE
GENOMISCHE
REGION
VON
1(2)05847
76
3.3.4.3
DIE
P-INSERTIONEN
BEFINDEN
SICH
IM
NICHT
KODIERENDEN
BEREICH
DER
ACYL-COA
SYNTHETASE
79
3.3.5
L(2)K09242
80
3.3.6
1(3)06)42
81
3.3.6.1
DIE
P-INSERTION
LIEGT
IM
ERSTEN
INTRON
DES
GENS
DOMINA
82
3.3.7
TRAMTRACK
84
3.4
HERSTELLUNG
DER
SUPPRESSIONS
SUBTRAKTIVEN
HYBRIDISIERUNGS
BANK
SCUTE
UEBEREXPRIMIERENDER
FLIEGEN
85
3.4.1
SYNTHESE
DER
DOPPELSTRAENGIGEN
CDNA
86
3.4.2
UEBERPRUEFUNG
DER
LIGATIONSEFFIZIENZ
88
3.4.3
G537.4-SC
S
-
2
UND
SC
101
SSH-BANKEN
89
3.4.4
ANALYSE
DER
SUBTRAKTIONSEFFIZIENZ
92
3.5
ANALYSE
DER
SSH-BANK
G537.4-SC
S
-
2
94
3.5.1
SEQUENZANALYSE
DER
SSH-FRAGMENTE
94
V
3.5.2
EINSATZ
DER
SSH-FRAGMENTE
ALS
SONDEN:
VIRTUELLE
NORTHERN
BLOTS
95
4.
DISKUSSION
100
4.1
ANALYSE
DER
DURCHGEFUEHRTEN
SICHTUNGEN
AUF
MODIFIKATOREN
DES
"ZOTTELBAER"-PHAENOTYPS
100
4.2
ERGEBNISSE
DER
DURCHGEFUEHRTEN
CHARAKTERISIERUNGEN
DER
P-ELEMENT
INDUZIERTEN
EINZELALLELE
101
4.2.1
DIE
ERGEBNISSE
DER
INTERAKTIONSKREUZUNGEN
GEGEN
N
55EI
1
UND
UEBEREXPRIMIERTEN
E(SPL)
101
4.2.2
DIE
ERGEBNISSE
DER
VERIFIZIERUNG
DER
P-ELEMENT
INDUZIERTEN
ALLELE
102
4.2.3
DIE
ERGEBNISSE
DER
DURCHGEFUEHRTEN
PLASMID-RETTUNGSEXPERIMENTE
103
4.3
DIE
NEU
IDENTIFIZIERTEN
GENE
105
4.3.1
ELF4A
106
4.3.2
PATCHED
107
4.3.3
HRP
48
108
4.3.4
1(2)05847
108
4.3.5
L(2)K09242
108
4.3.6
1(3)06142
109
4.3.7
TRAMTRACK
110
4.4
SSH/PCR-SELECT TECHNIK
110
4.4.1
MODIFIKATIONEN
DER
PCR-SELECT
TECHNIK
110
VI
4.4.2
UEBERPRUEFUNG
DER
SUBTRAKTIONSEFFIZIENZ
112
4.4.3
ANALYSE
DER
SSH-BANK
G537.4-SC
5
-
2
112
4.4.4
UEBERPRUEFUNG
DER
SSH-FRAGMENTE
113
4.4.5
DIE
DIFFERENTIELL
EXPRIMIERTEN
CDNAS
114
4.5
WIRKEN
DIE
PRONEURALEN
UND
NEUROGENEN
PROTEINE
AUF
DIE
GLEICHEN
ZIELGENE?
115
4.6
ANMERKUNGEN
ZU
DEN
ANGEWENDETEN
EXPERIMENTELLEN
ANSAETZEN
117
5.
ZUSAMMENFASSUNG
119
6.
LITERATURVERZEICHNIS
120
7.
ANHANG
136
VII |
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| topic_facet | Genprodukt Mutagenese Imaginalscheibe Taufliege Hochschulschrift |
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