Molekulargenetische Untersuchungen zum Mechanismus von Organfusionen bei Mutanten von Arabidopsis thaliana:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2000
|
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Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 1999 |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
DIE
PFLANZLICHE
EPIDERMIS
.
1
1.2
AUFGABEN
UND
ZUSAMMENSETZUNG
DER
PFLANZLICHEN
CUTICULA
.
2
1.3
ORGANFUSIONEN
WAEHREND
DER
PFLANZLICHEN
ONTOGENESE
.
4
1.4
POSTGENITALE
ORGANFUESIONEN
BEI
MUTANTEN
VON
ARABIDOPSIS
THALIANA
UND
ZEA
MAYS
.
5
1.5
ARABIDOPSIS
THALIANA
ALS
MODELLSYSTEM.
.
8
1.6
NUTZUNG
VON
TRANSPOSON-MUTAGENESE
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
NEUER
GENE
.
8
1.7
ZIELE
DER
ARBEIT
.
10
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
1
1
2.1
CHEMIKALIEN,
ENZYME
UND
RADIOISOTOPE
.
11
2.2
MEDIEN,
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
11
2.3
BAKTERIENSTAEMME,
BAKTERIOPHAGEN
UND
PLASMIDVEKTOREN.
.
12
2.3.1
BAKTERIENSTAEMME
.
12
2.3.2
BAKTERIOPHAGEN
.
12
2.3.3
PLASMIDVEKTOREN
.
13
2.4
HERSTELLUNG
UND
TRANSFORMATION
ELEKTROKOMPETENTER
BAKTERIEN.
.
13
2.5
PFLANZENMATERIAL
.
14
2.6
KULTIVIERUNG
VON
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
14
2.7
IN
PLANTA
TRANSFORMATION
VON
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
14
2.8
HISTOCHEMISCHE
FAERBUNG
VON
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
14
2.9
GFP-EXPRESSIONSANALYSE
.
15
2.10
ISOLIERUNG
VON
PLASMID-DNA
.
15
2.11
ISOLIERUNG
VON
GENOMISCHER
PFLANZEN-DNA
.
15
2.12
ISOLIERUNG
VON
PFLANZEN-RNA
.
16
2.13
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSEGELEN.
.
16
2.14
HERSTELLUNG
EINER
GROESSENSELEKTIONIERTEN
GENOMISCHEN
GENBANK
.
16
2.15
DURCHMUSTERN
VON
GENBANKEN
.
17
2.16
PRIMER
.
17
2.17
POLYMERASE-KETTENREAKTION
.
17
2.18
SYNTHESE
VON
ERSTSTRANG-CDNA
.
18
2.19
BESTIMMUNG
DES
5
'-ENDES
VON
MRNA
MITTELS
5
'-RACE
.
18
2.20
BESTIMMUNG
DES
3
'-ENDES
VON
MRNA
MITTELS
3
'-RACE
.
19
2.21
RADIOAKTIVE
UND
NICHT-RADIOAKTIVE
MARKIERUNGEN
.
19
2.22
DNA-SEQUENZANALYSE
.
20
2.23
SOUTHERN
UND
NORTHERN-ANALYSEN
.
20
2.24
COMPUTERANALYSEN.
.
21
2.25
SONSTIGES
.
21
3.
ERGEBNISSE
.
22
3.1
ANALYSE
DES
FDH-PROMOTORS
.
22
3.1.1
BESTIMMUNG
DES
TRANSKRIPTIONSSTARTPUNKTS
DES
FDH-GENS
.
22
3.1.2
IDENTIFIZIERUNG
PUTATIVER
TRANSKRIPTIONSFAEKTOR-BINDESTELLEN
.
23
3.1.3
VERGLEICH
DER
PROMOTORSEQUENZEN
VON
FDH
UND
AFI.
.
25
3.1.4
HERSTELLUNG
VON
PROMOTOR-DELETIONSDERIVATEN.
.
26
INHALTSVERZEICHNIS
3.1.5
GUS-EXPRESSION
UNTER
DER
KONTROLLE
VERSCHIEDENER
FDH-PROMOTORFRAGMENTE.
28
3.1.6
GFP-EXPRESSION
UNTER
DER
KONTROLLE
VERSCHIEDENER
FD/Z-PROMOTORFRAGMENTE.
30
3.2
ANALYSE
DER
LACERA/A-MUTNATE
UND
KLONIERUNG
DES
LACERAPA-GENS
.
33
3.2.1
ISOLIERUNG
WEITERER
FLDDLEHEAD-AEHNLICHER
MUTANTEN
VON
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
33
3.2.2
BESCHREIBUNG
DES
PHAENOTYPS
DER
/ACERATA-4P77-MUTANTE
.
37
3.2.3
KLONIERUNG
DES
LACERATA-GENS
AUS
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
41
3.2.4
ANALYSE
DER
EN/
SJOM-INSERTION
IM
CKPM4-GENLOCUS
.
44
3.2.5
ISOLIERUNG
EINES
WEITEREN
LACERATA
ALLELS
.
46
3.2.6
BESTIMMUNG
DER
KOPIENZAHL
DES
CYP86A8-GENS
IM
GENOM
VON
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
47
3.2.7
IDENTIFIZIERUNG
DES
5
'-UND
3
'-ENDES
DER
CKP&WI-MRNA.
.
49
3.2.8
EXPRESSIONSANALYSE
DES
CYP86A8-GENS
.
51
3.2.9
HOMOLOGIEVERGLEICHE
UND
DOMAENENSTRUKTUR
DES
CYP86A8-PROTEINS
.
54
3.2.10
ANRZSENSE-EXPRESSION
VON
CYP86A8
IN
TRANSGENEN
WILDTYP-PFLANZEN
.
56
3.2.11
KOMPLEMENTATION
DER
ZACERATA-MUTATION
DURCH
DAS
CYP86A8-GEN.
.
59
4.
DISKUSSION
.
62
4.1
DER
FDFZ-PROMOTOR
STEUERT
EPIDERMISSPEZIFISCHE
REPORTERGENEXPRESSION
IN
ALLEN
OBERIRDISCHEN
ORGANEN
.
62
4.2
DAS
FDZZ-PROMOTORFRAGMENT
FPM4
ENTHAELT
PUTATIVE
M-REGULATORISCHE
ELEMENTE
.
64
4.3
DIE
LACERATA-MUTANTE
ZEIGT
POSTGENITALE
ORGANFIISIONEN
.
66
4.4
DIE
DSPM-4P77-INSERTION
IM
CYP86A8-GEN
DER
LACERATA-4P77-MUTANTE
BEWIRKT
DEN
ZACERATA-PHAENOTYP
.
69
4.5
DIE
DSPM-4P77-INSERTION
BEFINDET
SICH
WAHRSCHEINLICH
IM
5
'-NICHTTRANSLATIERTEN
BEREICH
DES
CKPM4S-TRANSKRIPTS
.
71
4.6
AUCH
IN
DER
LACERATA-4P77-MUTANTE
WIRD
CYPS64S-MRNA
GEBILDET
.
72
4.7
DAS
LACERATA-GEN
KODIERT
FIIR
EINE
CYTOCHROM-P450-MONOOXYGENASE
.
74
4.8
FUEHREN
VERAENDERUNGEN
DER
CUTICULA
ZU
POSTGENITALEN
ORGANFIISIONEN?
.
76
4.9
AUSBLICK
.
79
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
81
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
83
7.
ANHANG
.
94
7.1
LISTE
DER
VERWENDETEN
PRIMER
.
94
7.2
ZUR
TRANFORMATION
VON
ARABIDOPSIS
THALIANA
VERWENDETE
KONSTRUKTE
.
98
7.3
VEKTORKARTEN
.
99
7.4
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
100
7.5
NOMENKLATUR
VON
GENEN
UND
GENPRODUKTEN.
.
101 |
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