Somatische Embryogenese und Transformation bei der Europäischen Lärche (Larix decidua Mill.):
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG:
VERGLEICHENDE
BETRACHTUNGEN
ZUR
ZYGOTISCHEN
UND
1
SOMATISCHEN
EMBRYOGENESE
1.1
ZYGOTI
SEHE
EMBRYOGENESE
BEI
KONIFEREN
1
1.2
SOMATISCHE
EMBRYOGENESE
3
1.
2.
1
NATUERLICHE
NICHT-ZYGOTISCHE
EMBRYOGENESE
3
1.
2.
2
INDUZIERTE
SOMATISCHE
EMBRYOGENESE
4
1.
2.
2.
1
INDUKTION
DER
SOMATISCHEN
EMBRYOGENESE
5
1.
2.
2.
2
KULTUR
UND
VERMEHRUNG
SOMATISCHER
EMBRYONEN
7
1.
2.
2.
3
REIFUNG
SOMATISCHER
EMBRYONEN
8
1.
2.
2.
4
LAGERUNG,
KEIMUNG
UND
PFLANZENENTWICKLUNG
9
1.
2.
2.
5
SOMAKLONALE
VARIABILITAET
10
1.3
KUENSTLICHE
SAMEN
11
1.4
GENETISCHE
TRANSFORMATION
VON
KONIFEREN
12
2
AUFGABENSTELLUNG
14
3
MATERIAL
UND
METHODEN
16
3
1
MATERIAL
16
3.
1.
1
LARIX
DECIDUA
MILL.
16
3.1.2
PICEA
ABIES
L.
KARST
16
3.1.3
A
BIES
ALBA
MILL.
16
3.1.4
AGROBACTERIUM
TUMEFACIENS
16
3.2
NAEHRMEDIEN
UND
KULTURBEDINGUNGEN
17
3.
2.
1
ALLGEMEINE
ANGABEN
ZUR
HERSTELLUNG
VON
NAEHRMEDIEN
FUER
DIE
IN-VITRO-KULTUR
17
3.
2.
2
KULTURBEDINGUNGEN
17
3.3
METHODEN
UND
VERSUCHSVARIANTEN
19
3.
3.
1
OBERFLAECHENSTERILISATION
DER
SAMEN
UND
ISOLATION
DER
ZYGOTI
SEHEN
EMBRYONEN
19
3.3.2
INDUKTION
SOMATISCHER
EMBRYONEN
19
3.
3.
2.
1
INDUKTIONSMEDIEN
19
3.3
2.2
INDUKTIONSMETHODEN
20
3.
3.
2.
3
ERMITTLUNG
DER
INDUKTIONSFREQUENZ
20
3.3.3
ERHALTUNG
UND
VERMEHRUNG
SOMATISCHER
EMBRYONEN
20
3.
3.
3.
1
VERMEHRUNGSMEDIEN
20
3.
3.
3.
2
METHODEN
ZUR
VERMEHRUNG
UND
WACHSTUMSMESSUNG
21
3.
3.
3.
3
VERAENDERUNG
DER
FRISCHMASSE
DER
ESM
UND
DER
NAEHRMEDIEN
WAEHREND
DER
VERSUCHSDURCHFUHRUNG
UND
DER
LAGERUNG
22
3.3.4
REIFUNG
SOMATISCHER
EMBRYONEN
22
3.
3.
4.
1
REIFUNGSMEDIEN
22
3.
3.
4.
2
METHODEN
DER
EMBRYOREIFUNG
SOWIE
DER
QUANTITATIVEN
UND
QUALITATIVEN
BEWERTUNG
23
3.
3.
4.
2.
1
GENERELLER
ABLAUF
DER
EMBRYOREIFUNG
23
3.
3.
4.
2.
2
ERMITTLUNG
DER
ABA-AUFNAHME
AUS
DEM
REIFUNGSMEDIUM
23
3.
3.
4.
2.
3
KOHLENHYDRATDYNAMIK
UND
WASSERVERLUST
IM
REIFUNGSMEDIUM
23
3.
3.
4.
2.
4
ERMITTLUNG
DER
FRISCHMASSEZUNAHME
DER
ESM
24
3.
3.
4.
2.
5
ENTWICKLUNG
DER
SOMATISCHEN
EMBRYONEN
AUF
REIFUNGSMEDIUM
24
INHALTSVERZEICHNIS
3.3.5
KONVERSION
SOMATISCHER
EMBRYONEN
UND
AKKLIMATISIERUNG
VON
KEIMPFLANZEN
25
3.
3.
5.
1
MEDIEN
UND
KULTURSUBSTRATE
25
3.3.5
2
METHODEN
ZUR
KEIMUNG,
KONVERSION
UND
ANZUCHT
25
3.
3
5
3
KEIMFAEHIGKEIT,
KONVERSIONSRATE
UND
ANZAHL
DER
UEBERLEBENDEN
KEIMLINGE
26
3.
3.
6
ISOLATION
UND
KULTUR
DER
PROTOPLASTEN
26
3.3.6.
1
LOESUNGEN
UND
MEDIEN
ZUR
ISOLATION,
IMMOBILISIERUNG
UND
KULTUR
26
3.
3.
6.
2
METHODEN
ZUR
ISOLATION,
IMMOBILISIERUNG
UND
KULTUR
28
3.
3.
6.
2.
1
ISOLATION
28
3.
3.
6.
2.
2
IMMOBILISIERUNG
UND
KULTUR
29
3.
3.
6.
2.
3
APPLIKATION
VON
ANTIBIOTIKA
ZUM
MEDIUM
29
3.
3.
6.
2.
4
ERMITTLUNG
DER
PLATTIERUNGSEFFIZIENZ
30
3.3.7
ANATOMISCH
-
MORPHOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
30
3.
3.
7.
1
HISTORESIN-EINBETTUNG
UND
ANFERTIGUNG
VON
SEMIDUENNSCHNITTEN
30
3.
3.
7.
2
EPOXIDHARZ-EINBETTUNG
UND
ANFERTIGUNG
VON
ULTRADUENNSCHNITTEN
32
3.3.8
GENOMUNTERSUCHUNG
MITTELS
PCR-FINGERPRINTING
UND
DURCHFLUSSCYTOMETRIE
33
3.
3.
8.
1
LOSUNGEN
FUER
DIE
MOLEKULARBIOLOGISCHEN
UNTERSUCHUNGEN
33
3.
3.
8.
2
METHODE
ZUR
DNA
ISOLIERUNG
33
3.
3.
8.
3
DNA-AMPLIFIKATION
UND
BEWERTUNG
DER
ELEKTROPHEROGRAMME
34
3.
3.
8.
3.
1
METHODE
DES
PCR-FINGERPRINTING:
AMPLIFIKATION
DER
DNA-FRAGMENTE
34
3.
3.
8.
3.
2
BEWERTUNG
DER
ELEKTROPHEROGRAMME
(ELEKTROPHORESEGELE)
35
3.
3.
8.
4
DURCHFLUSSCYTOMETRIE
UND
BEWERTUNG
DER
DNA-HISTOGRAMME
35
3.
3.
8.
4.
1
BESTIMMUNG
DES
PLOIDIEGRADES
35
3.
3.
8.
4.
2
BEWERTUNG
DER
DNA-HISTOGRAMME
35
3.3.9
EINKAPSELUNG
DER
SOMATISCHEN
EMBRYONEN
35
3.
3.
9.
1
VOLLKUGELN
35
3
3
9.
2
DOPPELSCHICHTKUGELN
36
3.3.9
3
DOPPELSCHICHTKUGELN
MIT
KUENSTLICHEM
ENDOSPERM
36
3.
3.
10
TRANSFORMATION
36
3
3.10
1
NAEHRMEDIUM
FUER
DIE
AGROBACLERIUM
TUMEFACIENS-STUEMME
UND
LOESUNGEN
FUER
DIE
ANALYSE
DER
TRANSFORMATION
36
3.3.10.2
METHODEN
DER
TRANSFORMATION
37
3.
3.
10.
3
PCR-ANALYSE
ZUM
NACHWEIS
DER
GENE
HPT
UND
UIDAE.
38
3.3
10.
4
HYBRIDISIERUNG
MIT
RADIOAKTIV
MARKIERTEN
SONDEN
39
3.
3
10.
5
ERMITTLUNG
DER
TRANSFORMATIONSFREQUENZ
39
3.
4
STATISTISCHE
ANALYSEN
39
INHALTSVERZEICHNIS
4
ERGEBNISSE
41
4.
1
VERGLEICHENDE
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
INDUKTION
UND
KULTUR
SOMATISCHER
EMBRYONEN
BEI
LARIX
DECIDUA
UND
PICEA
ABIES
41
4.
1.
1
INDUKTION
41
4.
1.
1.
1
ALLGEMEINE
BESCHREIBUNG
DES
VERLAUFES
UND
DER
ERGEBNISSE
DER
INDUKTION
41
4.
1.
1.
2
LARIX
DECIDUA
:
INDUKTION
AN
UNTERSCHIEDLICHEN
EXPLANTATEN
42
4.
1,
1.
2.
1
ZYGOTISCHE
EMBRYONEN
42
4.
1.1.2.
2
SOMATISCHE
EMBRYONEN
42
4.
1.
1.
2.
3
KEIMPFLANZEN
SOMATISCHEN
URSPRUNGS
46
4.
1.
1.3
PICEA
ABIES
YY
INDUKTION
AN
ZYGOTI
SEHEN
EMBRYONEN
46
4.
1.
2
EINFLUSS
AUSGEWAEHLTER
NAEHRMEDIENBESTANDTEILE
AUF
DIE
VERMEHRUNG
UND
ENTWICKLUNG
SOMATISCHER
EMBRYONEN
VON
LARIX
DECIDUA
49
4.
1.
2.
1
VERAENDERUNGEN
DER
NAEHRMEDIEN
WAEHREND
DER
LAGERUNG
49
4.
1.
2.
2
L-GLUTAMIN
51
4.
1.
2.
3
NICKEL
51
4.
1.
2.
3
BOR
52
4.
2
ENTWICKLUNGSBIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
DER
FRUEHEN
PHASE
DER
SOMATISCHEN
EMBRYOGENESE
BEI
LARIX
DECIDUA
AM
BEISPIEL
DER
DIREKTEN
SOMATISCHEN
EMBRYOGENESE
AUS
PROTOPLASTEN
UND
IN
SUSPENSIONSKULTUREN
54
4.
2.
1
PLATTIERUNGSEFFIZIENZ
UND
ENTWICKLUNGSMUSTER
IN
PROTOPLASTENKULTUREN
MIT
UND
OHNE
APPLIKATION
VON
WACHSTUMSREGULATOREN
54
4.
2.
2
EINFLUSS
DES
AUXINTRANSPORT-INHIBITORS
NPA
AUF
DIE
ZELLTEILUNG
IN
PROTOPLASTENBUERTIGEN
KULTUREN
UND
ENTWICKLUNG
VON
PHASE-I-EMBRYONEN
57
4.
2.
3
HEMMUNG
DER
EMBRYONALENTWICKLUNG
DURCH
BORMANGEL
58
4.
2.
3.
1
EINFLUSS
DER
BORATKONZENTRATION
AUF
DIE
EMBRYOENTWICKLUNG
IN
PROTOPLASTENBUERTIGEN
KULTUREN
58
4.
2.
3.
2
MORPHOLOGISCH-ANATOMISCHE
UND
ULTRASTRUKTURELLE
CHARAKTERISIERUNG
EMBRYOGENER
KULTUREN
UNTER
BORMANGEL
59
4.
3
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
VERLAUF
UND
ZUR
STEUERBARKEIT
DER
EMBRYOREIFUNG
67
4.
3.
1
VERAENDERUNGEN
IM
MEDIUM
UND
IN
DEN
ESM
IM
VERLAUFE
EINES
REIFUNGSVERSUCHES
67
4.3.2
VERLAUF
DER
EMBRYOREIFUNG
69
4.3.3
EINFLUSS
VON
NAEHRSTOFFEN,
OSMOTIKA
UND
WACHSTUMSREGULATOREN
AUF
DIE
STEUERBARKEIT
UND
SYNCHRONITAET
DER
ENTWICKLUNG
SOWIE
DEN
EMBRYOERTRAG
BEI
LARIX
DECIDUA
73
4.
3.
3.
1
OSMOTIKA
73
4.
3.
3.
1.
1
PEG-TYPEN
UND-KONZENTRATIONEN
73
4.
3.
3.
1.
2
SORBITOL
76
4.
3.
3.
2
ABSCISINSAEURE
77
4.
3.
3.
3
SACCHAROSE
78
4
3
3.
4
AUXINTRANSPORT-INHIBITOREN
80
4.
3.
3.
5
L-GLUTAMIN
84
4.
3.
3.
6
BOR
84
4.
3.
3.
7
KLONALE
UNTERSCHIEDE
87
4.
3.
4
VERGLEICHENDE
UNTERSUCHUNGEN
MIT
PICEA
ABIES
UND
ABIES
ALBA
89
4.
3.
4.
1
PICEA
ABIES
89
4.
3.
4.
2
ABIES
ALBA
91
4.3.5
KONVERSION
SOMATISCHER
EMBRYONEN
UND
PFLANZENANZUCHT
92
INHALTSVERZEICHNIS
4.
3.
5.
1
ABLAUF
DER
KONVERSION
SOMATISCHER
EMBRYONEN
ZU
KEIMPFLANZEN
92
4.
3.
5.
2
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
KONVERSION
SOMATISCHER
EMBRYONEN
VON
LARIX
DECIDUA
94
4.
3.
5.
2.
1
BASALMEDIUM
94
4.
3.
5.
2.
2
SACCHAROSEKONZENTRATION
95
4.
3.
5.
2.
3
GELBILDNER
IM
NAEHRMEDIUM
96
4.
3.
5.
2.
4
KLONALE
UNTERSCHIEDE
97
4.
3.
5.
3
VERGLEICH
MIT
SOMATISCHEN
EMBRYONEN
VON
PICEA
ABIES
97
4.
3.
5.
4
AKKLIMATISIERUNG
98
4.4
EINKAPSELUNG
REIFER
SOMATISCHER
EMBRYONEN
VON
LARIX
DECIDUA
101
4.
5
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
SOMAKLONALEN
VARIABILITAET
103
4.
5.
1
VARIABILITAET
DES
PHAENOTYPS
103
4.
5.
2
VARIABILITAET
DES
PLOIDIEGRADES
(DURCHFLUSSCYTOMETRIE)
104
4.5.2.
1
REIFE
SOMATISCHE
EMBRYONEN
'
105
4.
5.
2.
2
KEIMPFLANZEN
106
4.
5.
3
VARIABILITAET
DES
GENOTYPS
(PCR-FINGERPRINTING)
107
4.6
TRANSFORMATION
MIT
AGROBACTERIUM
TUMEFACIENS
ALS
VEKTOR
112
4.
6.
1
ERMITTLUNG
DER
GEEIGNETEN
CEFOTAXIMEKONZENTRATION
ZUR
HEMMUNG
DES
WACHSTUMS
VON
AGROBACTERIUM
TUMEFACIENS
113
4.
6.
2
OPTIMIERUNG
DER
HYGROMYCINKONZENTRATIONEN
FUER DIE
SELEKTION
TRANSGENER
ZELLEN
114
4.
6.
3
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
EINFLUSS
VON
ACETOSYRINGON
AUF
DIE
TRANSFORMATIONSRATE
115
4.6.4
KLONALE
UNTERSCHIEDE
117
4.
6.
5
NACHWEIS
DER
UEBERTRAGENEN
GENE
119
5
DISSKUSION
5.
1
INDUKTION
UND
KULTUR
SOMATISCHER
EMBRYONEN
125
5.2
REIFUNG
SOMATISCHER
EMBRYONEN
131
5.3
KONVERSION
UND
AKKLIMATISIERUNG
136
5.
4
SOMAKLONALE
VARIABILITAET
137
5.
5
TRANSFORMATION
139
6
VERZEICHNISSE
143
6.
1
LITERATURVERZEICHNIS
143
6.
2
ABKUERZUNGEN
168
6.
3
TABELLEN
171
6.
4
ABBILDUNGEN
173 |
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