Strukturelle und physiologische Charakterisierung der larvalen Nerv-Muskel-Synapse von Drosophila melanogaster:
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
1
1 EINLEITUNG.4
1.1
DROSOPHILA MELANOGASTEREM VIELSEITIGES MODELLSYSTEM.4
1.2 DAS LARVALE NEUROMUSKULAERE SYSTEM VON
DROSOPHILA.5
1.3 DAS LARVALE NERV-MUSKEL-PRAEPARAT VON
DROSOPHILA MELANOGASTER.8
1.4 SAP47.10
1.5
DROSOPHILA SYNAPSIN.11
1.6 TETANUS TOXIN.13
1.7 AEQUORIN.14
1.8 ZIELSETZUNG.15
2 MATERIAL.
16
2.1 FLIEGENSTAEMME:. 16
2.2 PUFFER UND LOESUNGEN:.1.16
2.3 CHEMIKALIEN:.18
2.4 ANTIKOERPER:.19
2.5 GERAETE:.19
2.6 SONSTIGE MATERIALIEN:.21
2.7 HARD- UND SOFTWARE:.21
3 METHODEN.23
3.1 MESSSTAND:.23
3.1.1 DER SCHWINGUNGSFREIE TISCH.24
3.1.2 ANPASSUNG DES MIKROSKOPS.24
3.1.3 DIE MIKROMANIPULATOREN.24
3.1.4 DER PHOTOMULTIPLIER.24
3.1.5 HITZESCHOCKAPPARATUR.25
3.1.6 MESSVERSTAERKER:.25
3.1.7 DIE TEMPERATURSTEUERUNGSKAMMER.26
3.1.8 GENERIEREN VON STIMULI.27
3.1.9 AUFZEICHNEN DER MESSDATEN.27
3.1.10 AUSWERTEN DER MESSDATEN.28
3.2 KLASSISCHE IMMUNHISTOCHEMIE.30
3.2.1 PRAEPARATION VON YYWHOLEMOUNTS".30
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
2
3.2.2 ANTIKOERPEMACHWEISREAKTIONEN.31
3.3 ELEKTRONENMIKROSKOPIE.32
3.3.1 KLASSISCHE ELEKTRONENMIKROSKOPIE.32
3.3.2 ANTIKOERPEMACHWEISREAKTIONEN AUF ELEKTRONENMIKROSKOPISCHER EBENE
(YYPRE-
EMBEDDING").35
3.3.3 IMMUNO-GOLD-LOKALISATION AUF ULTRADUENNSCHNITTEN.35
3.4 ELEKTROPHYSIOLOGIE.37
3.4.1 PRAEPARATION DRITTER LARVEN.37
3.4.2 INTRAZELLULAERE ABLEITUNG VON MUSKELPOTENTIALEN.37
3.5 CALCIUM-IMAGING.40
3.5.1 INJEKTION VON COELENTERAZIN IN DRITTE LARVEN.40
3.5.2 HERSTELLEN VON HOMOGENAT DRITTER LARVEN. 41
3.5.3 NACHWEIS VON BIOLUMINESZENZ.41
3.5.4 PRAEPARATION DRITTER LARVEN.41
3.5.5 AUFZEICHNEN VON CALCIUM SIGNALEN.41
4 ERGEBNISSE
.42
4.1 LOKALISATION DES SAP47 PROTEINS AUF LICHT- UND
ELEKTRONEN-MIKROSKOPISCHER
EBENE.42
4.2 LOKALISATION DES CYSTEIN-STRING-PROTEINS AUF LICHT- UND ELEKTRONEN
MIKROSKOPISCHER EBENE.57
4.3 LOKALISATION DES
DROSOPHILA SYNAPSIN PROTEINS AUF LICHT- UND ELEKTRONEN
MIKROSKOPISCHER EBENE.62
4.4 LOKALISATIONSUNTERSCHIEDE DER PROTEINE SAP47, CSP UND SYNAPSIN.66
4.5 MORPHOLOGISCHE UND ELEKTROPHYSIOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER
SYNAPSIN-
MUTANTEN DSYN
79 UND DSYN97.73
4.6 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER FLIEGENLINIEN DSYN
7BUND DSYN97 87
4.7 BLOCKADE DER SYNAPTISCHEN UEBERTRAGUNG DURCH TETANUS-TOXIN.96
4.8 VORVERSUCHE ZUM CA
2+-IMAGING MIT HILFE DES AEQUORIN SYSTEMS AM LARVALEN
NERV-MUSKEL-PRAEPARAT VON
DROSOPHILA.100
5
DISKUSSION
.
104
INHALTSVERZEICHNIS
3
5.1 LOKALISATION DES SAP47 PROTEINS AUF LICHT- UND ELEKTRONEN-
MIKROSKOPISCHER
EBENE.104
5.2 DIE ROLLE VON SAP47 IM AXONALEN TRANSPORT VON ZELLORGANELLEN.106
5.3 LOKALISATION DES CYSTEIN-STRING-PROTEINS AUF LICHT- UND ELEKTRONEN
MIKROSKOPISCHER EBENE.109
5.4 LOKALISATION DES SYNAPSIN PROTEINS AUF LICHT- UND
ELEKTRONEN-MIKROSKOPISCHER
EBENE.110
5.5 LOKALISATIONSUNTERSCHIEDE DER PROTEINE SAP47, CSP UND SYNAPSIN.111
5.6 MORPHOLOGISCHE UND ELEKTROPHYSIOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER
SYNAPSIN NULL
MUTANTEN DSYN
78 UND DSYN97.113
5.7 BLOCKADE DER SYNAPTISCHEN UEBERTRAGUNG DURCH TETANUS-TOXIN.116
5.8 AEQUORIN. 118
6
ZUSAMMENFASSUNG.120
7
AUSBLICK.123
8
LITERATUR.
125 |
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