Hochauflösende MAS-NMR-Spektroskopie zur Untersuchung von Biomolekülen in Systemen mit eingeschränkter Beweglichkeit:
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINFUEHRUNG 1
2 FLUESSIG-KRISTALLINE PHASEN VON LIPID/WASSER-DISPERSIONEN 5
3 METHODIK DER STRUKTURUNTERSUCHUNG MIT HOCHAUFLOESENDER
(HR) MAS-NMR-SPEKTROSKOPIE 9
3.1 EINLEITUNG. 9
3.2 HR-MAS-XMR-SPEKTROSKOPIE: GRUNDLAGEN. 9
3.3 STRUKTURBESTIINNIUNG VON MOLEKULAREN SYSTEMEN AUF DER BASIS
DER NMR-SPEKTROSKOPIE . 12
3.3.1 ABSTANDSINFORMATION: XOESY- UND ROESY-
EXPERIMENTE. 12
3.3.2 INFORMATION UEBER DIEDERWINKEL: ./-KOPPLUNGEN. IG
3.3.3 MOLEKUELDYNAMIKSIMULATIONEN . 17
4
1H-HR-MAS-NMR-SPEKTROSKOPIE ZUR UNTERSUCHUNG VON
MODELLMEMBRANEN 23
4.1 EINLEITUNG. 23
4.2 MATERIALIEN'UND METHODEN. 24
4.3 PROBENPRAEPARATION UND TECHNISCHE ASPEKTE DER SPEKTRALEN
AUFLOESUNG IN DER HR-MAS-XMR-SPEKTROSKOPIE. 25
4.4 1H-XMR-SPEKTROSKOPISCHE CHARAKTERISIERUNG VON AFAB IN
LIPIDMEMBRANEN . 27
4.4.1 SIGNALZUORDNUNG .27
4.4.2 'H-KREUZRELAXATION ZUR UNTERSUCHUNG DER AFAB-
STRUKTUR IN LIPID-WASSER-DISPERSIONEN.28
4.4.3 DISKUSSION. 30
4.5 ROTATIONSSEITENBAENDER IN DER HOCHAUFLOESENDEN PROTONEN-
MAS-XMR-SPEKTROSKOPIE.31
4.5.1 EINLEITUNG. 31
4.5.2
FOLDING
UND
ALIAS INT/
VON ROTATIONSSEITENBAENDERN . 34
I
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/959406182
INHALTSVERZEICHNIS
4.5.3 ROTATIONSSEITENBAENDER UNTER REELLEN BEDINGUNGEN . 36
4.0 ZUSAMMENFASSUNG. 32
5 STRUKTURELLE UNTERSUCHUNGEN VON HYMENISTATIN IN MEM-
BRANMIMETIKA 43
5.1 EINLEITUNG. 43
5.2 METHODEN UND MATERIALIEN. 44
5.2.1 PROBENPRAEPARATION UND SUBSTANZEN. 44
5.2.2 XMR-EXPERIMENTE. 46
5.3 VORBEREITENDE EXPERIMENTE ZUR CHARAKTERISIERUNG DER LIPICL-
HYMENISTATIN-WEELISELWIRKUNG. 46
5.3.1 FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE. 46
5.3.2 ;,1P-FESTKOERPER-\MR-SPEKTROSKOPIE. 48
5.4 GRUNDLAGEN DER HR-MAS-NMR-EXPERIMENTE AN HYMENISTA
TIN IN MEMBRANUMGEBUNG. 49
5.4.1 ZUORDNUNG DER SPEKTREN DURCH VERGLEICH MIT UNTERSU
CHUNGEN VON HYMENISTATIN IN MIZELLARER LOESUNG . 49
5.4.2 GRUNDLAGEN MEHRDIMENSIONALER NMR-EXPERIMENTE
MIT POLARISATIONSTRANSFER. 50
5.4.3 EXPERIMENTE MIT DIREKT DETEKTIERTER 'H-6 * * * * * * 13C-
YERSCHIEBUNGS-KORRELATION. 54
5.4.4 ZWEIDIMENSIONALE INDIREKT DETEKTIERTE 'H-13C-
YERSCHIEBUNGS-KORRELATION. 57
5.4.5 DISKUSSION DER 13C-DATEN . 62
5.5 BESTIMMUNG STRUKTURELLER PARAMETER VON HYMENISTATIN IN
MEMBRANUMGEBUNG. CC
5.5.1 'H-^C-RUHSQC EXPERIMENTE ZUR BESTIMMUNG DER
3 JC-CO-IXOPPLUNG I VALIN UND ISOLEUCIN.66
5.5.2 UNTERSUCHUNG DER 'H-KREUZRELAXATION MIT DEM 3D-
13C/13C-HMQC-X()ESY-HSQC-EXPERIMENT.70
5.5.3 ERGEBNISSE DER STRUKTURBESTIMMUNG. 72
5.6 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK. 76
6 HOCHAUFLOESENDE MAS-NMR-SPEKTROSKOPIE AN KUBISCHEN
FLUESSIG-KRISTALLINEN PHASEN 79
6.1 EINLEITUNG. 79
6.2 MATERIALIEN UND METHODEN. 80
6.3 HOCHAUFLOESENDE X'MR ZUR UNTERSUCHUNG KUBISCHER PHASEN . . 81
6.4 UNTERSUCHUNG DER LIPID/WASSER-WECHSELWIRKUNG IN KUBISCHEN
PHASEN. 83
6.5 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK. 88
INHALTSVERZEICHNIS
III
7 UNTERSUCHUNG DER WECHSELWIRKUNG VON CARBOPLATIN MIT LI
PIDEN IN KUBISCHER FLUESSIG-KRISTALLINER PHASE 89
7.1 EINLEITUNG. 89
7.2 METHODEN UND MATERIALIEN. 90
7.3 ERGEBNISSE UND DISKUSSION. 91
7.4 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK. 95
8 CHYMOTRYPSIN IN EIS 97
8.1 EINLEITUNG. 97
8.2 EXPERIMENTE. 99
8.2.1 GRUNDLAGEN. 99
8.2.2 EXPERIMENTELLES UND PROBENPRAEPARATION .100
8.2.3 ERGEBNISSE UND DISKUSSION.100
8.3 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK.105
9 ZUSAMMENFASSUNG UND PERSPEKTIVEN 107
A NMR-EXPERIMENTE AN HYMENISTATIN 111
A.L BEDEUTUNG DER ABKUERZUNGEN.111
A.2 MIZELLEN.111
A. 3 MEMBRANEN.112
B NMR-DATEN 115
B. L AFAB.115
B.2 HYMENISTATIN IN MIZELLEN.11 (J
B.3 HYMENISTATIN IN MEMBRAN.118
B. 4 MONOOLEIN.120
C PULSSEQUENZEN 121
C. L 'H-^C-CF-HSQC .121
C.2 3D-13C/13C-HMQC-NOESY-HSQC.125
D NOE-KONTAKTE FUER MEMBRANASSOZIIERTES HYMENISTATIN 129
LITERATURVERZEICHNIS 131
DANKSAGUNG 149
LEBENSLAUF
151 |
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