Antigene gegen Filariasis aus Caenorhabditis elegans (MAUPAS, 1900):
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGEN
V
ZUSAMMENFASSUNG
VN
1
EINLEITUNG
I
1.1
BEDEUTUNG
DER
FILARIOSEN
I
1.2
TIERMODELL
ZUR
UNTERSUCHUNG
VON
FILARIEN
2
1.3
IMMUNITAET
GEGEN
F
ILARIEN
3
1.4
KREUZPROTEKTION
4
1.5
ZEITPUNKT
DER
ABWEHR
EINER
INFEKTION
DURCH
DEN
WIRT
5
1.6
HAEUTUNGSRELEVANTE
ANTIGENE
6
1.7
C.
E/EGANS-ENTWICKLUNGSSTADIEN
ALS
ANTIGENQUELLE
9
1.8
HAEUTUNG
VON
C.
ELEGANS
11
1.9
SCHUTZVERMITTELNDE
ANTIGENE,
DIE
NICHT
IN
VERBINDUNG
MIT
DER
11
HAEUTUNG
STEHEN
1.10
IMMUNOLOGISCHE
REAKTIONEN
GEGEN
FILARIEN
12
1.11
ADJUVANTIEN
15
1.11.1
"
KEYHOLE LIMPET
HEMOCYANIN
"
15
1.11.2
MISTELEXTRAKTE
ALS
POTENTIELLE
ADJUVANTIEN
16
1.12
IMMUNEVASIONSMECHANISMEN
BEI
FILARIEN
17
1.13
CHEMOTHERAPEUTIKA
18
1.14
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
18
2
MATERIAL
UND
METHODEN
20
2.1
VERSUCHSTIERE
20
2.1.1
CAENORHABDITIS
ELEGANS
20
2.1.1.1
LEBENSZYKLUS
20
2.1.1.2
HALTUNG
20
2.1.1.3
SYNCHRONISIERUNG
VON
C.
ELEGANS
21
-GEWINNUNG
VON
EIGELEGEN
21
-GEWINNUNG
VON
ERSTEN
LARVENSTADIEN
(L
1)
22
-ISOLIEREN
VON
ENTWICKLUNGSSTADIEN
22
INHALT
II
2.1.2
ACANTHOCHEILONEMA
VITEAE
23
2.1.2.1
PARASITENZYKLUS
23
2.1.2.2
GEWINNUNG
POST-INFEKTIOESER
LARVEN
24
2.1.2.3
ISOLIEREN
VON
MIKROFILARIEN
25
2.1.3
ONCHOCERCA
VOLVULUS
26
2.1.3.1
AUFTAUEN
KRYOKONSERVIERTER
LARVEN
26
2.1.3.2
IN
VIVO-TESTSYSTEM
26
2.1.4
MERIONES
UNGUICULATUS
27
2.1.4.1
HALTUNG,
ZUCHT
UND
INFEKTION
27
2.1.5
OMITHODOROS
MOUBATA
28
2.1.5.1
HALTUNG,
ZUCHT
UND
INFESTATION
28
2.2
PROTEINREINIGUNG
28
2.2.1
GEWINNUNG
VON
E/S-ANTIGENEN
28
2.2.2
GEWINNUNG
VON
OBERFAECHENANTIGENEN
29
2.2.2.1
EXTRAKTION
MIT
VERSCHIEDENEN
DETERGENTIEN
30
2.2.3
PRAEPARATION
VON
PARAMYOSIN
30
2.2.4
SDS-PAGE
31
2.2.4.1
SILBERFAERBUNG
FUER
PROTEINGELE
32
2.2.4.2
COOMASSIEFAERBUNG
FUER
PROTEINGELE
32
2.2.5
FRAKTIONIERUNG
SDS-PAGE-GETRENNTER
ANTIGENEXTRAKTE
32
2.2.6
IMMUNAFFMITAETSCHROMATOGRAPHIE
33
2.2.6.1
KOPPLUNG
VON
ANTIKOERPERN
AN
SAEULENMATERIAL
33
2.2.6.2
ANTIGENREINIGUNG
34
2.2.7
FPLC-GELFILTRATION
35
2.2.8
PROTEINBESTIMMUNG
35
2.2.8.1
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
35
2.2.8.2
PROTEINBESTIMMUNG
MIT
DEM
"
BIO-RAD
DC-ASSAY
"
35
2.3
IMMUNISIERUNGSEXPERIMENTE
36
2.3.1
NEMATIZIDE
WIRKUNG
VON
MISTELEXTRAKTEN
41
2.4
SEROLOGISCHE
ANALYSE
42
2.4.1
ENZYME-LINKED-IMMUNO-SORBENT-ASSAY
(ELISA)
42
III
INHALT
2.4.2
INDIREKTER
FLUORESZENZ-ANTIKOERPER-BINDUNGS-TEST
(IFAT)
43
2.4.3
WESTERN
UND
DOT-BLOT-ANALYSE
44
2.5
KOHLENHYDRATANALYTIK
45
2.5.1
DEGLYKOSYLIERUNG
45
2.5.1.1
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
NATRIUMPERJODAT-KONZENTRATION
45
2.5.1.2
SPALTUNG
DER
KOHLENHYDRATKETTEN
DURCH
PEIJODAT-BEHANDLUNG
46
2.5.2
LEKTINANALYSE
46
2.6
ENZYMATIK
47
2.6.1
MESSUNG
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
47
2.6.2
SUBSTRATGELELEKTROPHORESE
ZUM
NACHWEIS
VON
PROTEASEN
49
2.7
STATISTIK
50
2.8
MATERIAL
50
2.8.1
CHEMIKALIEN
50
2.8.2
ANTIBIOTIKA
UND
INHIBITOREN
52
2.8.3
ANTIKOERPER
53
2.8.4
PRAEPARATE
53
2.8.5
VERBRAUCHSMATERIAL
53
2.8.6
GERAETE
55
3
ERGEBNISSE
56
3.1
A.
VITEAE-HOMOLOGE
C.
E/EGANS-ANTIGENE
56
3.1.1
ENTWICKLUNGSSTADIUM-SPEZIFISCHE
OBERFLAECHENANTIGENE
56
3.1.2
ANTIGENEXPRESSION
WAEHREND
DER
HAEUTUNG
58
3.2
C.
ELEGANS-13/LA
ANTIGENE
61
3.2.1
LDS-T
OTALEXTRAKTE
61
3.2.2
OBERFLAECHEN-ANTIGENE
64
3.3
IMMUNISIERUNGSEXPERIMENTE
68
3.3.1
IMMUNISIERUNG
MIT
C.
E/EGONS-ANTIGENEN
68
3.3.2
IMMUNISIERUNG
MIT
A.
VIREAE-E/S-ANTIGENEN
75
3.3.3
IMMUNISIERUNG
MIT
0.
VOLVULUS
76
3.3.4
KORRELATION
VON
ANTIKOERPERTITERN
UND
RUECKFINDUNGSRATEN
79
INHALT
IV
3.4
LOKALISATION
SCHUTZVERMITTELNDER
ANTIGENE
AUF
A.
VITEAE-L3/LA
HAEUTUNGSSTADIEN
81
3.5
DETEKTION
VON
A.
V/TEAE-ANTIGENEN
MIT
ANTI-C.
ELEGANS
L3/L4-80-100
KDA
SEREN
87
3.6
IDENTIFIZIERUNG
VON
KOHLENHYDRATEN
IN
C.
E/EGANS-ANTIGENEN
88
3.7
NACHWEIS
VON
PARAMYOSIN
IN
DER
C.
ELEGANS
80-100
KDA
FRAKTION
89
3.8
IDENTIFIZIERUNG
HAEUTUNGSRELEVANTER
ENZYME
VON
C.
ELEGANS
UND
A.
VITEAE
91
3.8.2
CHITINASEN
93
3.8.3
PROTEASEN
94
4.
DISKUSSION
98
4.1
A.
VAEEAE-HOMOLOGE,
IMMUNORELEVANTE
C.
ELEGANS-ANTIGENE
98
4.1.1
PROTEASEN
103
4.1.2
CHITINASEN
105
4.1.3
PARAMYOSIN
107
4.1.4
LOKALISATION
SCHUTZVERMITTELNDER
ANTIGENE
109
4.2
IMMUNISIERUNGSEXPERIMENTE
111
4.2.1
C.
E/EGONS-ANTIGENE
112
4.2.2
A.
V/ZEAE-L4-E/S-ANTIGENE
114
4.2.3
0.
VOLVULUS-ANTIGENE
115
4.2.4
SCHUTZMECHANISMEN
117
4.2.5
MODELL
ZUR
INDUKTION
EINER
PROTEKTIVEN
IMMUNANTWORT
MIT
C.
E/EGANS-ANTIGENEN
120
4.3
AUSBLICK
121
5
LITERATUR
123
6
BEITRAEGE
ZU
WISSENSCHAFTLICHEN
KONGRESSEN
143
7
DANKSAGUNG
144
8
LEBENSLAUF
145 |
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