Hitzeschockproteinexpression humaner Mesothelzellen in vivo und in vitro:
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
6
1.1
MORPHOLOGISCHE
UND
FUNKTIONELLE
EIGENSCHAFTEN
HUMANER
MESOTHELZELLEN
IN
VIVO
6
1.2
DIE
KLINISCHE
BEDEUTUNG
DER
MESOTHELZELLEN
7
13
MESOTHELZELLEN
IN
DER
ZELLKULTUR
8
1.4
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
BAUCHFELLENTZUENDUNG
10
1.5
TNF-A
12
1.6
IL-LSS
13
1.7
TNF-A
UND
IL-LSS
BEI
PERITONITIS
14
1.8
CHRONISCHE
PERITONEALDIALYSE
UND
PERITONITIS
15
1.9
STRESSPROTEINE
17
1.9.1
ENTDECKUNG
DER
STRESSPROTEINE
17
1.9.2
STRESSPROTEINE
ALS
CHAPERONE
18
1.93
WIRKUNG
DER
STRESSPROTEINE
19
1.9.4
HITZESCHOCKPROTEIN
70
20
1.10
METALLOTHIONEIN
21
2
PROBLEMSTELLUNG
23
3
MATERIAL
UND
METHODEN
24
3.1
MATERIAL
24
3.1.1
GERAETE
24
3.1.2
VERBRAUCHSMATERIALIEN
25
3.1.3
MEDIEN,
MEDIENZUSAETZE
UND
GEPUFFERTE
SALZLOESUNGEN
25
3.1.4
ENZYME,
ANTIBIOTIKA
UND
BESCHICHTIGUNGSSUBSTANZEN
25
3.1.5
MEDIUM
ZUR
KULTIVIERUNG
DER
HUMANEN
MESOTHELZELLEN
UND
HELA-ZELLEN
26
3.1.6
SUBSTRATE
UND
PROTEINASE
INHIBITOREN
26
3.1.7
ANTIKOERPER
26
3.1.8
CHEMIKALIEN
27
3.1.9
STAMMLOESUNGEN
27
3.1.10
PROTEINQUANTIFIZIERUNG
28
3.1.11
IMMUNCHEMILUMINISZENZ
SYSTEM
28
3.1.12
ZYTOTOXIZITAETBESTIMMUNG
28
3.1.13
PARAFFINEINGEBETTETE
APPENDIX
VERMIFORMIS
RESEKTATE
28
3.1.14
HELA-ZELLEN
29
3.1.15
HUMANE
MESOTHELZELLEN
29
INHALTSVERZEICHNIS
3.2
METHODEN
29
3.2.1
IMMUNHISTOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNGEN
(IN
VIVO)
29
3.2.2
IN
VITRO
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
ANALYSE
DER
HITZESCHOCKEXPRESSION
31
3.2.2.1
MESOTHELZELLKULTUR
(NACH
STYLIANOU
ET
AL.
1990)
31
3.2.2.2
HELA-ZELLKULTUR
32
3.2.2.3
ZELLZAHLBESTIMMUNG
32
3.2.2.4
HITZESCHOCKSTIMULATION
32
3.2.2.5
STIMULATION
DER
MESOTHELZELLEN
MIT
TNF-A,
IL-LSS,
DIALYSAT
ODER
ZINK
33
3.2.2.6
PROTEINEXTRAKTION
UND
AUFSCHLUSS
33
3.2.2.7
PROTEINQUANTIFIZIENMG
34
3.2.2.S
SDS-PAGE
UND
IMMUNOBLOT
35
3.2.3
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
FUNKTIONELLEN
BEDEUTUNG
DER
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
HUMANER
MESOTHELZELLEN
40
3.2.3.1
STIMULATIONSVERSUCHE
40
3.2.3.2
BESTIMMUNG
DER
LDH-AKTIVITAET
IM
UEBERSTAND
DER
MESOTHELZELLEN
41
3.2.3.3
BERECHNUNG
DER
RELATIVEN
MEMBRANPERMEABILITAET
42
4
ERGEBNISSE
43
4.1
HISTOLOGISCHE
UND
IMMUNHISTOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNG
VON
MESOTHELZELLEN
UNTER
RUHENDEN
BEDINGUNGEN
UND
BEI
PERITONITIS
43
4.2
DIE
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
DER
MESOTHELZELLEN
IN
VIVO
45
4.3
METALLOTHIONEINEXPRESSION
DER
MESOTHELZELLEN
IN
VIVO
47
4.4
UNTERSUCHUNG
DER
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
IN
VITRO
48
4.4.1
HITZESCHOCKPROTEIN-70-EXPRESSION
DER
HELA-ZELLEN
NACH
HITZESCHOCK
48
4.4.2
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
DER
MESOTHELZELLEN
NACH
HITZESCHOCK
48
4.4.3
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
DER
MESOTHELZELLEN
NACH
TNF-A
STIMULATION
50
4.4.4
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
DER
MESOTHELZELLEN
NACH
IL-LSS
STIMULATION
51
4.4.5
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
DER
MESOTHELZELLEN
NACH
STIMULATION
DURCH
DIALYSAT
UND
DURCH
DAS
SCHWERMETALL
ZINK
52
4.5
UNTERSUCHUNG
ZUR
FUNKTIONELLEN
BEDEUTUNG
DER
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
AUF
DIE
ZYTOTOXIZITAET
54
4.5.1
MESSUNG
DER
MEMBRANPERMEABILITAET
54
5
DISKUSSION
57
5.1
PATHOPHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
MESOTHELZELLEN
57
5.2
HITZESCHOCKPROTEIN-,
UND
METALLOTHIONEINEXPRESSION
BEI
ENTZUENDUNG
59
5.2.1
IN
VIVO
59
5.2.2
HITZESCHOCKPROTEIN-70-EXPRESSION
IN
VITRO
59
5.3
ZINK
ALS
INDUKTOR
DER
HSP-EXPRESSION
61
5.4
DIALYSAT
ALS
INDUKTOR
DER
HSP-EXPRESSION
62
5.5
DIE
INTRAZELLULAERE
REGULATION
DER
HSP-ANTWORT
62
INHALTSVERZEICHNIS
5.6
PROTEKTIVE
FUNKTION
DER
HITZESCHOCKPROTEINEXPRESSION
DER
MESOTHELZELLEN
64
6
ZUSAMMENFASSUNG
65
7
LITERATURVERZEICHNIS
66
8
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
75 |
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