Die Mevalonat-unabhängige Isoprenoid-Biosynthese und deren Verbreitung in Pflanzen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Karlsruhe
Botanisches Inst., Univ.
1999
|
| Schriftenreihe: | Karlsruher Beiträge zur Pflanzenphysiologie
36 |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
V
ENGLISH
SUMMARY
VII
1
EINFUEHRUNG
.
1
1.1
DIE
YYBIOGENETISCHE
ISOPRENREGEL
"
UND
VIELFALT
DER
ISOPRENOIDE
.
1
1.2
ADDITION
DER
ISOPRENEINHEITEN
ZU
PRENYLKETTEN
.
3
1.3
SUBZELLULAERE
BIOSYNTHESEKOMPARTIMENTE
PFLANZLICHER
ISOPRENOLDE
.
3
1.4
BILDUNG
VON
IPP
NACH
DEM
ACETAT/MEVALONAT-WEG
.
4
1.5
ALTERNATIVER
IPP-BIOSYNTHESEWEG
.
6
1.6
PROBLEMSTELLUNG
.
9
2
METHODEN
.
11
2.1
EINBAUEXPERIMENTE
.
11
2.1.1
FUER
MARKIERUNGSEXPERIMENTE
VERWENDETE
GRUENALGEN
.
11
2.1.2
13
C
UND
2
H
MARKIERTE
SUBSTRATE
.
11
2.1.3
MARKIERUNG
VON
GRUENALGEN
MIT
[L
13
C]-GLUCOSE
UND
[3
13
C]-PYRUVAT
.
12
2.1.4
EINBAU
I3
C-MARKIERTER
GLUCOSE
IN
ISOPRENOIDE
HOEHERER
PFLANZEN
.
12
2.1.5
EINBAU
VON
[L
2
HI]-L-DESOXY-D-XYLULOSE
UND
DL-[2
13
C]MEVALONSAEURELACTON
IN
ISOPRENOIDE
VON
ALGEN
UND
HOEHEREN
PFLANZEN
.
16
2.2
GEWINNUNG
VERSCHIEDENER
PRENYLLIPIDE
UND DER
FETTSAEUREN
AUS
PFLANZEN
GEWEBEN
FUER
DIE
NMR-ANALYTIK
UND
FUER
GC-MS
.
17
2.2.1
EXTRAKTION
DER
LIPIDE
AUS
PFLANZENGEWEBEN
FUER
DIE
NMR-ANALYTIK
.
17
2.2.2
LIPID-FRAKTIONEN
FUER
DIE
GC-MS-ANALYSE
.
17
2.2.3
GEWINNUNG
VON
PHYTOL,
STEROLEN,
SS-CAROTIN
UND
LUTEIN
.
18
2.2.4
GEWINNUNG
VON
FETTSAEUREN
.
18
2.2.5
EXTRAKTION
UND
AUFREINIGUNG
DER
LIPIDE
AUS
DEN
GRUENALGEN
SCENEDESMUS,
CHLAMYDOMONAS
UND
CHLORELLA
.
18
2.2.6
EXTRAKTION
UND
REINIGUNG
DER
LIPIDE
AUS
LEMNA
GIBBA
.
19
2.2.7
EXTRAKTION
UND
REINIGUNG
DER
LIPIDE
AUS
HORDEUM
VULGARE
.
19
2.2.8
EXTRAKTION
UND
REINIGUNG
DER
LIPIDE
AUS
DAUCUS
CAROTA
.
20
2.2.9
EXTRAKTION
UND
REINIGUNG
DES
LYCOPINS
AUS
TOMATENFRUECHTEN
.
20
2.3
IDENTIFIZIERUNG
UND
ANALYSE
DER
ISOTOPENMARKIERUNG
DER
ISOPRENOIDE,
FETTSAEUREN
UND
LANGKETTIGEN
ALKOHOLE
.
21
2.4
MOLEKULARGENETISCHE
METHODEN
.
26
2.4.1
ANZUCHT
VON
ALGEN
UND
PFLANZEN
.
26
2.4.2
ZUR
KLONIERUNG
VERWENDETE
E.
COH'-STAEMME
.
26
2.4.3
MEDIEN
FUER
BAKTERIEN
.
26
2.4.4
VERMEHRUNG
VON
X-PHAGEN
.
27
2.4.5
ISOLIERUNG
VON
DNA
.
28
2.4.6
ISOLIERUNG
VON
RNA
.
29
2.4.7
CDNA
AUS
ARABIDOPSIS-RNA
.
29
2.4.8
FAELLUNG
VON
NUCLEINSAEUREN
.
29
II
INHALTSVERZEICHNIS
2.4.9
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
.
30
2.4.10
QUANTIFIZIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
30
2.4.11
MARKIERUNG
VON
DNA
MIT
DIGOXYGENIN
(DIG-11-UTP)
.
31
2.4.12
SOUTHERN-BLOT
ANALYSE
.
31
2.4.13
PLAQUEHYBRIDISIERUNG
.
34
2.4.14
RESTRIKTIONSVERDAU
.
35
2.4.15
DEPHOSPHORYLIERUNG
VON
DNA
.
35
2.4.16
KLONIERUNGSMETHODEN
.
35
2.4.17
LIGATION
.
35
2.4.18
GENETISCHE
TRANSFORMATION
DURCH
ELEKTROPORATION
.
36
2.4.19
SEQUENZIERUNG
VON
DNA
.
36
2.4.20
SEQUENZANALYSEN
.
36
2.4.21
STANDARD-PCR
.
36
2.4.22
HETEROLOGE
EXPRESSION
IN
E.
COLI
.
37
3
ERGEBNISSE
.
39
3.1
MARKIERUNGSEXPERIMENTE
MIT
EINZELLIGEN
GRUENALGEN
.
39
3.1.1
EINBAU
VON
[3
13
C]-PYRUVAT
IN
PHYTOL
VON
SCENEDESMUS
OBLIQUUS
.
39
3.1.2
EINBAU
VON
[L
13
C]-GLUCOSE
IN
CHLORELLA
FUSCA
UND
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII
.
40
3.1.3
EINBAU
VON
[L
2
HI]-L-DESOXY-D-XYLULOSE
UND
DL-[2
13
C]-MEVALONSAEURELACTON
IN
GRUENALGEN
.
41
3.1.4
ZUSAMMENFASSUNG:
MARKIERUNGSEXPERIMENTE
MIT
GRUENALGEN
.
43
3.2
MARKIERUNGSEXPERIMENTE
MIT
HOEHEREN
PFLANZEN
.
44
3.2.1
EINBAU
VON
[L
13
C]-GLUCOSE
IN
ISOPRENOIDE
GRUENER
PFLANZENGEWEBE
.
44
3.2.2
EINBAU
VON
[L
13
C]-GLUCOSE
UND
[U
13
C6]-GLUCOSE
IN
LYCOPIN
REIFENDER
TO
.
45
3.2.3
EINBAU
VON
[L
2
HI]-L-DESOXY-D-XYLULOSE
UND
DL-[2
13
C]-MEVALONSAEURELACTON
IN
LEMNA
GIBBA
.
47
3.2.4
EINBAU
VON
[L
2
HI]-L-DESOXY-D-XYLULOSE
IN
ERGRUENENDE
GERSTENKEIMLINGE
.
48
3.2.5
ZUSAMMENFASSUNG:
EINBAUVERSUCHE
MIT
HOEHEREN
PFLANZEN
.
48
3.3
KLONIERUNG
DER
L-DESOXY-D-XYLULOSE-5-PHOSPHAT-SYNTHASE
(DXS)
AUS
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII
.
49
3.3.1
DXS-SPEZIFISCHE
OLIGONUKLEOTIDE
UND
DIGOXYGENIN-MARKIERTE
SONDE
.
49
3.3.2
DURCHSUCHEN
DER
CWAMYDOMONAS-CDNA-BIBLIOTHEK
.
49
3.3.3
SEQUENZIERUNG
DES
KLONES
6/1
.
50
3.3.4
HETEROLOGE
EXPRESSION
DES
KLONES
6/1
IN
E.
COLI
.
54
3.4
KLONIERUNG
DER
L-DESOXY-D-XYLULOSE-5-PHOPSPHAT-REDUKTOISOMERASE
(DXR)
AUS
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
58
3.4.1
KLONIERUNG
DER
DXR
AUS
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
59
3.4.2
HETEROLOGE
EXPRESSION
DER
DXR
AUS
A.
THALIANA
IN
E.
COLI
.
62
4
DISKUSSION
.
65
4.1
ISOPRENOIDBIOSYNTHESE
IN
GRUENALGEN
.
68
4.1.1
IPP-BIOSYNTHESE
IN
SCENEDESMUS
.
68
4.1.2
EINBAU
VON
[L
13
C]-GLUCOSE
IN
ISOPRENOIDE
VON
CHLORELLA
FUSCA
UND
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII
.
72
INHALTSVERZEICHNIS
NI
4.1.3
VORKOMMEN
DER
IPP-BIOSYNTHESEN
UEBER
L-DESOXY-D-XYLULOSE-5-PHOSPHAT
UND
MEVALONSAEURE
IN
GRUENALGEN
.
72
4.2
ISOPRENOIDBIOSYNTHESE
IN
HOEHEREN
PFLANZEN
.
75
4.2.1
ISOPRENOIDBIOSYNTHESE
IN
GRUENEN
GEWEBEN
.
75
4.2.2
LYCOPINBIOSYNTHESE
IN
REIFENDEN
TOMATENFRUECHTEN
.
77
4.3
KLONIERUNG
UND
HETEROLOGE
EXPRESSION
DER
L-DESOXY-D-XYLULOSE-5-PHOPSPHAT
SYNTHASE
(DXS)
AUS
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII
.
80
4.4
KLONIERUNG
UND
HETEROLOGE
EXPRESSION
DER
L-DESOXY-D-XYLULOSE-5-PHOPSPHAT
REDUKTOISOMERASE
(DXR)
AUS
ARABIDOPSIS
THALIANA
.
84
4.5
ZUSAMMENFASSUNG:
BISHER
BEKANNTE
SCHRITTE
DER
IPP-BIOSYNTHESE
UEBER
DOXP
.
86
4.6
DISKUSSION
WEITERER
LITERATUR
UEBER
DIE
ALTERNATIVE
IPP-BIOSYNTHESE
.
87
4.6.1
VERGLEICH
DER
NEUEN
ERKENNTNISSE
UEBER
DIE
PLASTIDAERE
IPP-BIOSYNTHESE
IN
PFLANZEN
MIT
AELTERER
LITERATUR
.
87
4.6.2
NEUERE
ERGEBNISSE
UEBER
DIE
ALTERNATIVE
IPP-BIOSYNTHESE
IN
HOEHEREN
PFLANZEN.
90
4.6.3
BILDUNG
DER
ISOPRENOIDEN
UBICHINON-SEITENKETTE
IN
HOEHEREN
PFLANZEN
.
94
4.6.4
DOXP-WEG
IN
BAKTERIEN,
CYANOBAKTERIEN
UND
EUKARYOTISCHEN
ALGEN
.
95
4.6.5
ACETAT/MEVALONAT-WEG
IN
PILZEN
UND
MAMMALIA
.
97
4.6.6
L-DESOXY-D-XYLULOSE-5-PHOSPHAT
ALS
IPP-VORSTUFE
.
97
4.6.7
2-C-METHYL-D-ERYTHRITOL-4-PHOSPHAT
ALS
WEITERE
IPP-VORSTUFE
.
99
4.6.8
WEITERE
INTERMEDIATE
DES
DOXP-WEGES
.
100
4.7
AUSBLICK:
.
101
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
103
LITERATUR
109
ANHANG
A
NMR-TABELLEN
123
ANHANG
B
GC/MS-DATEN
157
ANHANG
C
PUBLIKATIONEN
UNTER
MITWIRKUNG
DES
AUTORS
167 |
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| series | Karlsruher Beiträge zur Pflanzenphysiologie |
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| spelling | Schwender, Jörg Verfasser aut Die Mevalonat-unabhängige Isoprenoid-Biosynthese und deren Verbreitung in Pflanzen von Jörg Schwender Karlsruhe Botanisches Inst., Univ. 1999 X, 168 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Karlsruher Beiträge zur Pflanzenphysiologie 36 Zugl.: Karlsruhe, Univ., Diss., 1999 Mesovalonsäure (DE-588)4604376-7 gnd rswk-swf Isoprenoide (DE-588)4162552-3 gnd rswk-swf Biosynthese (DE-588)4006902-3 gnd rswk-swf Vermeidung (DE-588)4460312-5 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Isoprenoide (DE-588)4162552-3 s Biosynthese (DE-588)4006902-3 s Mesovalonsäure (DE-588)4604376-7 s Vermeidung (DE-588)4460312-5 s DE-604 Karlsruher Beiträge zur Pflanzenphysiologie 36 (DE-604)BV000896104 36 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=008954849&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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