Untersuchungen zur Agonisten-induzierten Internalisierung der Somatostatin-Rezeptoren:
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1998
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1
EINLEITUNG. 4
1.1 REZEPTORVERMITTELTE ENDOCYTOSE. 4
1.2 SIEBEN-TRANSMEMBRAN-REZEPTOREN. 6
1.3 REZEPTOR-DESENSIBILISIERUNG. 8
2 MATERIAL UND METHODEN
. 14
2.1
CHEMIKALIEN UND ENZYME.
14
2.2
VERWENDETE VEKTOREN, BAKTERIENSTAEMME UND ZELLINIEN.
14
2.3
ZELLKULTURMEDIEN UND LOESUNGEN.
15
2.4
MOLEKULARBIOLOGISCHE ARBEITSTECHNIKEN. .
17
2.5
ZELLBIOLOGISCHE ARBEITSTECHNIKEN.
22
2.6
PROTEINCHEMISCHE ARBEITSTECHNIKEN.
23
2.7
CAMP-BESTIMUNG.
28
2.8
FLUORESZENZMIKROSKOPIE.
29
3
ERGEBNISSE. 34
3.1 CHARAKTERISIERUNG DER ZELLINIEN HEK 293 UND RIN1046-38. 34
3.2 BIOCHEMISCHE ANALYSE DER AGONISTEN-INDUZIERTEN ABNAHME ~
PLASMAMEMBRANSTAENDIGER BINDUNGSSTELLEN. 44
3.3 BIOCHEMISCHE ANALYSE DER ZUNAHME DER PLASMAMEMBRANSTAENDIGEN
BINDUNGSSTELLEN. 47
3.4 FLUORESZENZMIKROSKOPISCHE ANALYSE DER SST-TAG. 50
3.5 REZEPTORVERMITTELTE AUFNAHME VON FITC-SST-14. 60
3.6 KOLOKALISIERUNGS-EXPERIMENTE ZWISCHEN SST-TAG UND FITC-SST-14. 64
3.7 REZEPTORVERMITTELTE AUFNAHME VON 125I-TYR"-SST-14. 68
3.8 HPLC-ANALYSE VON 125I-TYR''-SST-14. 74
3.9 UNTERSUCHUNGEN ZUR CHARAKTERISIERUNG DES SSTL -SPEZIFISCHEN
ENDOCYTOSEWEGES. 81
3.10 UNTERSUCHUNGEN DES INTEMALISIERUNGSVERHALTENS DER SSTL
DELETIONSMUTANTEN. 83
4 DISKUSSION. 84
4.1
DIE SSTL-SPEZIFISCHE INTERNALISIERUNG. 86
4.2
DIE AGONISTEN-SPEZIFISCHE INTERNALISIERUNG. 88
4.3
DER AGONISTEN-SPEZIFISCHE INTRAZELLULAERE TRANSPORT.
90
4.4
DER SST-SPEZIFISCHE INTRAZELLULAERE TRANSPORT.
92
5
ZUSAMMENFASSUNG. 103
6
ANHANG.*. 14
6.1 ABKUERZUNGEN.*. 104
6.2 BINDUNGSKONSTANTEN SYNTHETISCHER SOMATOSTATIN-ANALOGA.
105
6.3 OLIGONUKLEOTIDE. 105
7
LITERATURVERZEICHNIS. 107
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