Ausschluß von Punktmutationen auf der a-Alpha- und g-UntereinheitGamma-Untereinheit des hochaffinen IgE-Rezeptors (FceRI)(Fc-epsilon-RI) als Ursache für allergische Erkrankungen bei atopischen Kindern:
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1999
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-3
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
5
1.
EINLEITUNG
7
1.1.
DEFINITION
DER
ALLERGIE
7
1.2.
EINTEILUNG
DER
ALLERGIEFORMEN
7
1.3.
PATHOGENESE,
AETIOLOGIE
UND
SYMPTOMATIK
DER
ALLERGIE
VOM
TYP
I
8
1.4.
DIAGNOSTIK
ATOPISCHER
ERKRANKUNGEN
9
1.5.
TYPISCHE
KLINISCHE
MANIFESTATIONSFORMEN
DER
ATOPIE
UND
DEREN
THERAPIE
10
1.5.1.
POLLINOSIS
10
1.5.2.
ASTHMA
BRONCHIALE
11
1.5.3.
NEURODERMITIS
12
1.6.
DER
HOCHAFFINE
IGE-REZEPTOR
-
FC^RI
13
1.7.
STRUKTUR
DES
FCJRI
13
1.7.1.
A-KETTE
DES
FCJRI
14
1.7.2.
SS-KETTE
DES
FC
E
RI
16
1.7.3.
Y-KETTE
DES
FC
E
RL
16
1.8.
ZELLVERTEILUNG
DES
FCJRI
17
1.9.
FUNKTION
DES
FCJU
18
1.10.
SIGNALTRANSDUKTION
18
1.11.
DER
NIEDERAFFINE
IGE-REZEPTOR
-
FC^RII
-
CD23
20
1.12.
GENETISCHE
ASPEKTE
21
2.
ZIELSETZUNG
26
3.
MATERIAL
UND
METHODIK
27
3.1.
PATIENTENKOLLEKTIV
27
3.2.
LEUKOZYTENISOLIERUNG
28
3.3.
MESSENGER-RNA
REINIGUNG
29
3.4.
COMPLEMENTARY-DNA
SYNTHESE
31
3.5.
SYNTHETISCHE
PRIMER
32
3.5.1.
RANDOM
PRIMER
33
3.5.2.
PCR-PRIMER
34
3.6.
POLYMERASEKETTENREAKTION
34
3.7.
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
36
3.8.
REAMPLIFIKATION
38
3.9.
QIAQUICK
GELEXTRAKTION
39
3.10.
REINIGUNG
UND
KONZENTRIERUNG
VON
DNA
40
3.11.
SEQUENZIERUNG
42
-4
3.12.
EINBAU
VON
PUNKTMUTATIONEN
45
4.
ERGEBNISSE
47
4.1.
PATIENTENKOLLEKTIV
47
4.2.
A-KETTE
47
4.2.1.
ERSTE
PRIMER-AUSTESTUNGEN
47
4.2.2.
PROBLEME
DER
REPRODUZIERBARKEIT
50
4.2.3.
ENDGUELTIGE
FESTLEGUNG
DER
PRIMER
UND
SYNTHESEBEDINGUNGEN
52
4.2.4.
NACHWEIS
DER
KONTAMINATIONSFREIHEIT
55
4.2.5.
KONTROLLSEQUENZ
DER
A-KETTE
MIT
ARTIFIZIELLEN
PUNKTMUTATIONEN
55
4.2.6.
AUFARBEITUNG
DER
PATIENTENPROBEN
57
4.3.
Y-KETTE
62
4.3.1.
AUSTESTUNG
VON
PRIMERN
UND
SYNTHESEBEDINGUNGEN
62
4.3.2.
PROBLEME
MIT
KONTAMINATION
65
4.3.3.
KONTROLLSEQUENZ
DER
Y-KETTE
MIT
ARTIFIZIELLEN
PUNKTMUTATIONEN
66
4.3.4.
AUFARBEITUNG
DER
PATIENTENPROBEN
68
5.
DISKUSSION
70
5.1.
ALLGEMEINES
UND
PATIENTENKOLLEKTIV
70
5.2.
METHODIK
72
5.3.
A-UNTEREINHEIT
74
5.4.
Y-UNTEREINHEIT
76
5.5.
AUSBLICK
78
6.
ZUSAMMENFASSUNG
80
7.
ANHANG
82
8.
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
UND
TABELLEN
88
9.
LITERATURVERZEICHNIS
90
DANK
103
LEBENSLAUF
104 |
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