Untersuchungen zur Virulenz von Salmonella Enteritidis sowie zur Wirksamkeit einer Salmonella Enteritidis-Inaktivatvakzine am Infektionsmodell "embryoniertes Hühnerei":
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| adam_text | Titel: Untersuchungen zur Virulenz von Salmonella Enteritidis sowie zur Wirksamkeit einer Salmonella-Enteri
Autor: Killing, Elke
Jahr: 1999
Inhaltsverzeichnis
Einleitung
2 Literatur
2.1 Salmonellen — Atiologie und Bedeutung
2.1.1 Ätiologie und Nomenklatur
2.1.2 Bedeutung als Krankheitserreger und Epidemiologie
2.2 Pathogenität und Virulenz
2.2.1 Definitionen
2.2.2 Virulenzfaktoren bei Salmonellen
2.2.2.1 Adhäsion t
2.2.2.2 Invasion c
2.2.2.2.1 Definition c
2.2.2.2.2 Invasion in das Darmepithel IC
2.2.2.2.3 Invasionsmechanismus und Invasome IC
2.2.2.2.4 Molekulargenetik der Salmonelleninvasion und
Proteinsekretionssystem III 13
2.2.2.3 Intrazelluläre Überlebens- und Vermehrungsfähigkeit 16
2.2.2.4 Plasmide 17
2.2.2.5 Toxine 19
2.2.3 Modelle zur Untersuchung der Virulenz und Invasion 20
2.2.3.1 Tiermodelle 20
2.2.3.2 Zeil- und Gewebekulturen 21
2.2.3.3 Bebrütetes Hühnerei 24
23 Salmonelleninfektionen bei Hühnern und deren Bekämpfung 26
2.3.1 Salmonelleninfektionen in Hühnerbeständen 26
2.3.1.1 Infektionsquellen und Verbreitung im Bestand 26
2.3.1.2 Infektion der Eier 27
2.3.1.3 Infektionsablauf und Klinik 28
2.3.1.4 Immunität gegen Salmonelleninfektionen 30
2.3.1.5 Immunkompetenz von Hühnerembryonen und Küken 32
2.3.1.6 Matemale Antikörper 33
2.3.2 Bekämpfimgsmaßnahmen 35
2.3.2.1 Oberblick 35
2.3.2.2 Diagnostik 36
2.3.2.3 Management und Hygiene 37
2.3.2.4 Chemotherapie 38
2.3.2.5 Competitive Exclusion 38
2.3.2.6 Züchtung resistenter Hühnerlinien 39
2.3.2.7 Schutzimpfung 40
2.3.2.7.1 Rechtliche Vorschriften 41
2.3.2.7.2 Art der Impfstoffe 41
2.3.2.7.3 Wirksamkeitsprüfung von Impfstoffen 45
2.3.2.7.4 Zulassung von Impfstoffen 47
3 Material und Methoden 48
3.1 Infektionsversuche an der CAM 48
3.1.1 Infektionsbedingungen 48
3.1.1.1 Bakterienstämme 48
3.1.1.2 Infektionsdosis 50
3.1.1.3 Inkubationszeit 50
3.1.2 Hühnereier 52
3.1.2.1 Herkunft der Eier 52
3.1.2.2 Infektion und Inkubation der Versuchseier 52
3.1.2.3 Probenentnahme 53
3.1.2.4 Negativkontrollen 53
3.1.3 Mikrobiologische Untersuchung der Eier 53
3.1.4 Statistische Auswertung der Keimzahlen 54
3.2 Beurteilung der letalen Wirkung 54
3.2.1 Embryonale Mortalität 55
3.2.2 Bestimmung der LD50 55
33 Untersuchung von Seren und Dotterproben immunisierter Hennen 56
3.3.1 Antikörper-Nachweis aus Eidotter und Serum 56
3.3.2 Wirkung von Antiseren auf die Invasion von Salmonella Enteritidis 57
3.4 Erstellung von Direktpräparaten der Salmonellen für die TEM-
Untersuchung 57
3.5 Licht- und elektronenmikroskopisehe Untersuchungen der CAM 58
3.5.1 Kunststoffeinbettung der CAM-Präparate 58
3.5.2 Licht-und Transmissionselektronenmikroskopie 58
3.5.3 Rasterelektronenmikroskopie 59
3.6 Rezepturen 60
3.7 Substanzen 62
4 Ergebnisse 63
4.1 Mikrobiologische Untersuchungen der Eier 63
4.1.1 Vergleich der S.E.-Stämme an SPF-Eiem 63
4.1.1.1 Keimzahlbestimmung in Allantoisflüssigkeit und Leber 63
4.1.1.2 Qualitativ-mikrobiologische Untersuchung des Ei-Inneren 78
4.1.2 Wirksamkeitsprüfiing der S.E.-Inaktivatvakzine an
Eiern immunisierter Hennen 88
4.1.2.1 Keimzahlbestimmung in Allantoisflüssigkeit und Leber 88
4.1.2.2 Qualitativ-mikrobiologische Untersuchung des Ei-Inneren 89
4.2 Embryonale Mortalität und LD50 97
4.2.1 Vergleich der S.E.-Stämme an SPF-Eiern 97
4.2.2 Wirksamkeitsprüfung der S.E.-Inaktivatvakzine an
Eiern immunisierter Hennen 97
4.3 Antikörper gegen Salmonella Enteriädis 100
4.3.1 Antikörperbestimmung aus Dotter und Serum 100
4.3.2 Wirkung von Antikörpern auf die Ei-Infektion 103
4.4 Darstellung von Direktpräparaten der Salmonellen im TEM 108
4.5 Mikroskopische Untersuchungen der CAM 108
4.5.1 Lichtmikroskopie 108
4.5.2 Transmissionselektronenmikroskopie 109
4.5.3 Rasterelektronenmikroskopie HO
4.5.4 Abbildungen 115
5 Diskussion 130
5.1 Virulenzuntersuchungen an Salmonella Enteritidis 130
5.1.1 Auswahl der S.E.-Stämme 131
5.1.2 Mikrobiologische Untersuchungen 131
5.1.3 Bestimmung der LD50 135
5.1.4 Mikroskopische Untersuchung der CAM 136
5.1.5 Beurteilung der Virulenzuntersuchungen und des Infektionsmodells 141
5.2 Untersuchungen zur Wirksamkeit der S.E.-lnaktivatvakzine 144
5.2.1 Überprüfung maternaler Schutzeffekte 144
5.2.2 Weiterführende Untersuchungen zur Wirkung der S.E.-Antikörper 147
5.2.3 Eignung des Infektionsmodells zur Wirksamkeitsprüfung von
Impfstoffen 150
6 Zusammenfassung 152
7 Summary 154
8 Literaturverzeichnis 156
9 Anhang 187
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