Entwicklung eines pseudo-homogenen amperometrischen Immunsensors mit Verdrängungsprinzip:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin
dissertation.de
2000
|
| Ausgabe: | Als Ms. gedr. |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Münster (Westfalen), Univ., Diss., 1999 |
| Beschreibung: | VI, 145 S. graph. Darst. : 21 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
V
1.
ZUSAMMENFASSUNG
1
2.
EINLEITUNG
2.1
UMWELTANALYTIK
5
2.2
ANTIKOERPER
6
2.2.1
STRUKTUR
UND
FUNKTION
DES
ANTIKOERPERS
6
2.2.2
ANTIGEN-ANTIKOERPER-WECHSELWIRKUNG
8
2.3
IMMUNOASSAYS
10
2.4
DIREKTE
UND
INDIREKTE
IMMUNSENSOREN
13
2.5
HOMOGENE
AMPEROMETRISCHE
IMMUNSENSOREN
16
2.6
PROBLEMSTELLUNG
19
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
3.1
VERWENDETE
GERAETE
UND
MATERIALIEN
21
3.2
VERWENDETE
CHEMIKALIEN
22
3.3
VERWENDETE
ANTIKOERPER
24
3.4
PUFFER
UND
STAMMLOESUNGEN
24
3.5
SYNTHESE
VON
HAPTEN-PROTEIN
KONJUGATEN
27
3.5.1
MIXED
ANHYDRID
METHODE
27
3.5.2
KOPPLUNG
DURCH
EDC-AKTIVIERUNG
'
28
3.6
MASSENSPEKTROMETRISCHE
UNTERSUCHUNGEN
DER
HAPTEN-BSA
KONJUGATE
29
3.7
HERSTELLUNG
VON
F
AH
-FRAGMENTEN
30
3.8
KONJUGATION
VON
POD
MIT
F
AB
-FRAGMENTEN
31
3.9
UEBERPRUEFUNG
DER
HERSTELLUNG
VON
POD-MARKIERTEN
FAB-FRAGMENTEN
MITTELS
GELELEKTROPHORESE
32
3.10
HERSTELLUNG
VON
POD-MARKIERTEN
ANTI-2,4-D
ANTIKOERPERN
33
3.11
ELISA-PROTOKOLLE
34
3.12
VERDRAENGUNGSASSAY
MIT
NUNC-IMMUNOYY
STICKS
37
3.13
ELISA-DATENAUSWERTUNG
38
3.14
EINSATZ
DER
GOD
ALS
WASSERSTOFFPEROXIDDONATOR
39
N
INHALTSVERZEICHNIS
3.14.1
BESTIMMUNG
DES
OPTIMALEN
PH-WERTS
39
3.14.2
EINFLUSS
DER
GOD
UND
CATALASE
KONZENTRATION
AUF
DIE
POD
40
3.14.3
OPTIMIERUNG
DER
GLUCOSE-KONZENTRATION
FUER
DAS
ENZYMSYSTEM
GOD/POD
40
3.14.4
KALIBRATION
VON
POD-MARKIERTEN
GAM-IGG
MIT
DEM
GOD/GLUCOSE-SYSTEM
40
3.15
HERSTELLUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
SIEBDRUCK-ELEKTRODEN
FUER
AMPEROMETRISCHE
MESSUNGEN
41
3.15.1
HERSTELLUNG
TTF-MODIFIZIERTER
ELEKTRODEN
42
3.15.1.1
VERFAHREN
ZUR
HERSTELLUNG
VON
TTF-KOMPOSIT-ELEKTRODEN
42
3.15.1.2
HERSTELLUNG
TTF-BESCHICHTETER
GRAPHITELEKTRODEN
43
3.15.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
GRAPHITELEKTRODEN
43
3.15.2.1
KONTAKTWINKELMESSUNG
43
3.15.2.2
REPRODUZIERBARKEIT
DER
ELEKTRODEN
44
3.16
CHARAKTERISIERUNG
DER
MEDIATOREN
TTF,
FEII/111
UND
KI
44
3.16.1
ZYKLISCHE
VOLTAMMETRIE
44
3.16.2
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
MEDIATORKONZENTRATION
45
3.16.3
H
2
O2-TITRATION
45
3.16.4
BESTIMMUNG
DES
PH-OPTIMUMS
45
3.16.5
POD-KALIBRATION
MIT
DEN
MEDIATOREN
TTF,
FELL/III
UND
KI
46
3.17
2,
4-D
KALIBRATION
MIT
AMPEROMETRISCHER
DETEKTION
46
3.17.1
VORVERSUCHE
ZUR
DURCHFUEHRUNG
DES
VERDRAENGUNGSASSAYS
AUF
DER
ELEKTRODE
47
3.17.2
2,
4-D
KALIBRATION
NACH
DEM
HETEROGENEN
UND
PSEUDO-HOMOGENEN
ASSAYPRINZIP
47
3.17.3
OPTIMIERUNG
ZUR
CO-IMMOBILISIERUNG
DER
GOD
48
3.17.4
2,4-D-KALIBRATION
MIT
CO-IMMOBILISIERTER
GOD
NACH
DEM
PSEUDOHOMOGENEN
ASSAYPRINZIP
49
3.17.5
LAGERUNG
ANTIGEN-BESCHICHTER
ELEKTRODEN
50
3.17.6
DURCHFUEHRUNG
DER
REALPROBENMESSUNGEN
50
4.
ERGEBNISSE
4.1
CHARAKTERISIERUNG
DER
HAPTEN-BSA
KONJUGATE
51
4.1.1
MASSENSPEKTROMETRISCHE
UNTERSUCHUNGEN
DER
MCPA-BSA
KONJUGATE
51
4.1.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
HAPTEN-BSA
KONJUGATE
IM
ELISA
52
4.2
OPTIMIERUNG
DER
ANTI-2,4-D
ANTIKOERPER
KONZENTRATION
54
4.3
KINETIK
DER
VERDRAENGUNGSREAKTION
55
4.4
EINFLUSS
DER
ANTIKOERPERINKUBATIONSZEIT
AUF
DIE
VERDRAENGUNGSREAKTION
56
4.5
2,
4-D
KALIBRATION
58
INHALTSVERZEICHNIS
111
4.6
EINFLUSS
DER
LAGERBEDINGUNGEN
DES
ANTIGEN-ANTIKOERPER-KOMPLEXES
IN
MIKROTITERPLATTEN
AUF
DIE
VERDRAENGUNGSREAKTION
59
4.7
EINSATZ
VON
F
AB
-FRAGMENTEN
IM
ELISA
60
4.7.1
HERSTELLUNG
VON
F
DB
-FRAGMENTEN
61
4.7.1.1
ENZYMATISCHE
SPALTUNG
DES
ANTIKOERPERS
IN
F(
AB
)
2
-FRAGMENTE
UND
REINIGUNG
MITTELS
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
61
4.7.1.2
KOPPLUNG
VON
POD
MIT
FAB-FRAGMENTEN
62
4.7.2
UEBERPRUEFUNG
DER
HERSTELLUNG
VON
POD-MARKIERTEN
F
A
B-FRAGMENTEN
MITTELS
SDS-GELELEKTROPHORESE
62
4.7.3
EINSATZ
DES
F
AH
-POD
KONJUGATS
IM
ELISA
64
4.7.4
EINSATZ
DER
F
A
B-FRAGMENTE
IM
ELISA
65
4.7.4.1
BESTIMMUNG
DER
KREUZREAKTIVITAET
GANZER
ANTI-2,4-D
ANTIKOERPER
UND
DEREN
F
AB
-FRAGMENTE
GEGENUEBER
MCPA
66
4.7.4.2
EINFLUSS
DER
ANTIKOERPERVALENZ
AUF
DEN
VERDRAENGUNGSASSAY
BEI
DER
VERWENDUNG
VON
HAPTEN-BSA
KONJUGATEN
MIT
UNTERSCHIEDLICHEM
KONJUGATIONSVERHAELTNIS
67
4.7.4.3
KINETIK
DER
VERDRAENGUNGSREAKTION
69
4.7.4.4
EINFLUSS
DER
ANTIKOERPERVALENZ
AUF
DIE
2,4-D
KALIBRATIONSKURVE
DES
VERDRAENGUNGSASSAYS
71
4.7.4.5
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ASSAYPARAMETER
VON
ANTI-2,4-D
ANTIKOERPERN
UND
DEREN
F
A
B-FRAGMENTEN
72
4.8
VERWENDUNG
VON
POD-MARKIERTEN
ANTI-2,4-D
ANTIKOERPERN
73
4.8.1
HERSTELLUNG
POD-MARKIERTER
ANTI-2,4-D
ANTIKOERPER
73
4.8.2
EINSATZ
VON
POD-MARKIERTEN
ANTI-2,4-D
ANTIKOERPERN
IM
VERDRAENGUNGSASSAY
74
4.9
VERDRAENGUNGSASSAY
MIT
NUNC
IMMUNOSTICKSYY
75
4.10
EINSATZ
DER
GLUCOSEOXIDASE
ALS
WASSERSTOFFPEROXIDDONATOR
77
4.10.1
BESTIMMUNG
DES
PH-OPTIMUMS
78
4.10.2
EINFLUSS
DER
GOD
-
UND
CATALASE
KONZENTRATION
AUF
DIE
POD-AKTIVITAET
78
4.10.3
OPTIMIERUNG
DER
SUBSTRATKONZENTRATION
FUER
DAS
POD/GOD-ENZYMSYSTEM
80
4.10.4
KALIBRATION
VON
POD-MARKIERTEN
GAM-IGG
MIT
DEM
GOD/GLUCOSE-SYSTEM
82
4.11
AMPEROMETRISCHE
VORUNTERSUCHUNGEN
ZUM
AUFBAU
EINES
PSEUDO-HOMOGENEN
IMMUNSENSORS
83
4.11.1
ELEKTRODENCHARAKTERISIERUNG
83
4.11.1.1
KONTAKTWINKELMESSUNGEN
83
4.11.1.2
REPRODUZIERBARKEIT
DER
ELEKTRODEN
83
4.11.1.3
CHARAKTERISIERUNG
VON
TTF-KOMPOSIT-ELEKTRODEN
84
4.
1
1.1.4
MESSWERTAUSWERTUNG
86
IV
INHALTSVERZEICHNIS
4.11.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
MEDIATOREN
TTF,
FEII/III
UND
KI
UND
DIE
AMPEROMETRISCHE
DETEKTION
VON
POD
87
4.11.2.1
CHARAKTERISIERUNG
DES
MEDIATORS
TTF
88
4.11.2.2
CHARAKTERISIERUNG
DES
MEDIATORS
FELL/III
92
4.11.2.3
CHARAKTERISIERUNG
DES
MEDIATORS
KL
97
4.12
ENTWICKLUNG
EINES
PSEUDO-HOMOGENEN
AMPEROMETRISCHEN
IMMUNSENSORS
106
4.12.1
VORVERSUCHE
ZUR
DURCHFUEHRUNG
DES
VERDRAENGUNGSASSAYS
AUF
DER
ELEKTRODE
107
4.12.1.1
OPTIMIERUNG
DER
KONZENTRATION
DES
MCPA-BSA
KONJUGATS
108
4.12.1.2
TITRATION
POD-MARKIERTER
ANTI-2,4-D
ANTIKOERPER
108
4.12.2
2,4-D
KALIBRATION
NACH
DEM
HETEROGENEN
UND
PSEUDO-HOMOGENEN
ASSAYPRINZIP
109
4.12.3
2,4-D
KALIBRATION
MIT
CO-IMMOBILISIERTER
GOD
112
4.12.4
LAGERUNG
ANTIGEN-BESCHICHTETER
ELEKTRODEN
113
4.12.5
EINLAUF
UND
ANSPRECHVERHALTEN
DER
ELEKTRODEN
113
4.12.6
CHARAKTERISTISCHE
PARAMETER
DES
AMPEROMETRISCHEN
PSEUDO-HOMOGENEN
IMMUNSENSORS
114
4.13
REALPROBENMESSUNG
114
5.
DISKUSSION
117
6.
LITERATURVERZEICHNIS
133 |
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| spelling | Gerdes, Melanie 1970- Verfasser (DE-588)122448952 aut Entwicklung eines pseudo-homogenen amperometrischen Immunsensors mit Verdrängungsprinzip vorgelegt von Melanie Gerdes Als Ms. gedr. Berlin dissertation.de 2000 VI, 145 S. graph. Darst. : 21 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Zugl.: Münster (Westfalen), Univ., Diss., 1999 Austauschreaktion (DE-588)4143659-3 gnd rswk-swf Immunosensor (DE-588)4398344-3 gnd rswk-swf Hapten (DE-588)4123342-6 gnd rswk-swf Amperometrie (DE-588)4388445-3 gnd rswk-swf Enzyme-linked immunosorbent assay (DE-588)4152476-7 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Hapten (DE-588)4123342-6 s Immunosensor (DE-588)4398344-3 s Amperometrie (DE-588)4388445-3 s Enzyme-linked immunosorbent assay (DE-588)4152476-7 s Austauschreaktion (DE-588)4143659-3 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=008944841&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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