RNA-bindende Proteine aus dem Chloroplasten der Grünalge Chlamydomonas reinhardtii:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
München
Utz, Wiss.
2000
|
| Schriftenreihe: | Bochumer Beiträge zur Molekularen Botanik
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Bochum, Univ., Diss., 1999 |
| Beschreibung: | 124 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
I.
EINFUEHRUNG.
.
1
1.
EINLEITUNG
.
1
2.
PROZESSIERUNGEN
VON
5
UND
3
'-ENDE
UND
STABILITAET
DER
MRNAS
.
2
2.1
SPALTUNG
POLYCISTRONISCHER
TRANSKRIPTE
.
3
2.2
PROZESSIERUNG
DES
5'-NICHTTRANSLATIERTEN
BEREICHES
.
5
2.3
PROZESSIERUNG
DES
3'-NICHTTRANSLATIERTEN
BEREICHES
.
7
2.4
DEGRADIERUNG
DER
MRNA
.
10
3.
EDIERUNG
.
12
3.1
EDIERUNG
INNERHALB
DES
KODIERENDEN
BEREICHES
.
12
3.2
EDIERUNG
IN
NICHT
KODIERENDEN
BEREICHEN
.
13
3.3
CIS
UND
ZRANS-FAKTOREN
DER
EDIERUNG
.
14
4.
SPLEISSEN
.
15
4.1
GRUPPE
I-INTRONEN
.
15
4.2
GRUPPE
IL-INTRONEN
.
17
4.3
TRANS-SPLEISSEN
.
18
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
20
II.
PROBLEMSTELLUNG
.
21
III.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
24
1.
MATERIAL
.
24
1.1
STAEMME
.
24
1.2
NAEHRMEDIEN
.
24
1.3
PLASMIDE
.
25
1.4
OLIGONUKLEOTIDE
.
26
1.5
CHEMIKALIEN
.
26
1.6
ENZYME/INHIBITOREN
.
27
1.7
MEMBRANEN/SAEULEN
.
27
1.8
HAEUFIG
VERWENDETE
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
27
1.9
GERAETE
.
27
2.
METHODEN
.
28
2.1
OLIGONUKLEOTIDSYNTHESE
.
28
2.2
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
28
2.3
GELELUTION
VON
NUKLEINSAEUREN
.
28
2.4
IN
V;7RO-REKOMBINATION
VON
DNA
.
29
2.5
KULTURBEDINGUNGEN
.
29
2.6
TRANSFORMATION
VON
ESCHERICHIA
COLI
.
29
2.7
PLASMID-ISOLIERUNG
AUS
ESCHERICHIA
COLI
.
29
2.8
DNA-SEQUENZIERUNG
.
29
2.9
RNA-ISOLIERUNG
AUS
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII
.
30
2.10
PROTEINISOLIERUNG
AUS
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII
.
30
2.11
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA
.
31
2.12
JN
VITRO-TRANSKRIPTION
.
31
2.13
GELELEKTROPHORESE
.
32
2.14
YYNORTHEM
"
-HYBRIDISIERUNG
.
33
2.15
RNA-GELRETENTIONSANALYSEN
.
33
2.16UV-QUERVEMETZUNGSEXPERIMENTE
.
33
2.17
IN
V/RRO-SPLEISSEXPERIMENTE
.
34
2.18
GRADIENTENZENTRIFUGATION
.
34
2.19
RN
A-AFFINITAETSSAEULE
.
35
2.20
SICHERHEITSBESTIMMUNGEN
.
35
IV.
ERGEBNISSE
.
36
1.
IN
W/RO-BINDUNGSSTUDIEN
PLASTIDAERER
PROTEINE
MIT
DERIVATEN
DES
INTRONS
RL
1
.
37
1.1
KONSTRUKTION
VON
PLASMIDEN
.
37
1.2
GELRETENTIONSANALYSEN
.
39
1.3
UV-QUERVEMETZUNGSEXPERIMENTE
MIT
VERSCHIEDENEN
ZIEL-RNAS
.
41
1.3.1
DAS
VOLLSTAENDIGE
INTRON
RLL
.
42
1.3.2
DERIVATE
DES
INTRONS
RLL
.
43
1.3.3
SPEZIFITAET
DER
WECHSELWIRKUNGEN
.
46
2.
IN
VIVO-ANALYSEN
VON
RNA-PROTEIN-KOMPLEXEN
MITTELS
VERGLEICHENDER
GRADIENTENZENTRIFUGATION
.
49
2.1
IN
V/VO-IDENTIFIZIERUNG
VON
RNA-PROTEIN-KOMPLEXEN
IN
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII
.
49
2.2
WECHSELWIRKUNGEN
ZWISCHEN
PROTEINEN
UND
DEM
INTRON
RL
1
.
53
2.3
BINDUNGSANALYSEN
MIT
DERIVATEN
DES
INTRONS
RL
1
.
57
3.
STRATEGIEN
ZUR
ANREICHERUNG
RLL-BINDENDER
PROTEINE
.
61
3.1
PRAEPARATIVE
GRADIENTENZENTRIFUEGATION
.
61
3.2
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
.
63
V.
DISKUSSION
.
66
1.
PLASTIDAERE
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII-PROTEINE
UND
DAS
INTRON
RLL
BILDEN
IN
VITRO
RNA-PROTEIN-KOMPLEXE
AUS
.
66
1.1
RNA-GELRETENTIONSANALYSEN
ERMOEGLICHEN
DEN
NACHWEIS
VON
SPEZIFISCHEN
RNA-PROTEIN-KOMPLEXEN
.
67
1.2
PROTEINE
UNTERSTUETZEN
DEN
RNA-KATALYSIERTEN
GRUPPE
II-SPLEISSVORGANG
.
71
2.
IN
VIVO
LIEGT
DAS
INTRON
RLL
IN
RNA-PROTEIN-KOMPLEXEN
VOR
.
75
2.1
DURCH
VERGLEICHENDE
GRADIENTENZENTRIFUGATION
WERDEN
RNA-PROTEIN
KOMPLEXE
IN
VIVO
NACHGEWIESEN
.
75
2.2
DIE
ANALYSE
VON
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII-TRANSFOMANTEN
ZEIGT
DAS
INTRON
RLL
ALS
BESTANDTEIL
HOCHMOLEKULARER
PARTIKEL
.
76
3.
FUENF
PROTEINE
INTERAGIEREN
DOMAENEN-SPEZIFISCH
MIT
DEM
INTRON
RLL
.
79
4.
RNA-PROTEIN-WECHSELWIRKUNGEN
KOENNEN
FILR
DIE
ANREICHERUNG
VON
RNA-BINDENDEN
PROTEINEN
GENUTZT
WERDEN
.
85
4.1
GRUPPE
II-INTRON-BINDENDE
PROTEINE
VON
CHLAMYDOMONAS
REINHARDTII
KOENNEN
MITTELS
GRADIENTENZENTRIFUGTION
ANGEREICHERT
WERDEN
.
85
4.2
DAS
31
KDA
UND
DAS
36
KDA-PROTEIN
KOENNEN
DURCH
AFFINITAETS
CHROMATOGRAPHIE
STARK
ANGEREICHERT
WERDEN
.
86
5.
INTRON
RLL-BINDENDE
PROTEINE
SIND
MOEGLICHERWEISE
TRANS-SPLEISSFAKTOREN
.
90
6.
EXISTIEREN
YYSPLEISSOSOMEN-AEHNLICHE
"
KOMPLEXE
IN
DEN
CHLOROPLASTEN?
.
92
VI.
ZUSAMMENFASSUNG
.
96
VII.
SUMMARY
.
98
VIII.
LITERATUR
.
100
IX.
ANHANG
.
123 |
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| series2 | Bochumer Beiträge zur Molekularen Botanik |
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