Struktur und Funktion des murinen CGRP-Rezeptors:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
---|---|
Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Berlin
VWF, Verl. für Wiss. und Forschung
2000
|
Ausgabe: | 1. Aufl. |
Schriftenreihe: | Akademische Abhandlungen zur Biologie
|
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | Zugl.: München, Techn. Univ., Diss., 2000 |
Beschreibung: | VIII, 137 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
I
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
V
TABELLENVERZEICHNIS
VII
1
EINLEITUNG
1
1.1
TUMORMETASTASIERUNG
.
2
1.1.1
STADIEN
DER
TUMORMETASTASIERUNG
.
2
1.1.2
DIE
ROLLE
VON
ADHAESIONSMOLEKUELEN
BEI
DER
TUMORMETASTASIERUNG
.
3
1.1.3
DIE
ROLLE
DER
SPEZIFISCHEN
ORGAN-MIKROUMGEBUNG
BEI
DER
TUMORME
TASTASIERUNG
.
4
1.2
NEUROPEPTIDE
UND
DAS
IMMUNSYSTEM
.
6
1.3
CALCITONIN-FAMILIE
.
6
1.3.1
CALCITONIN
.
7
1.3.2
CALCITONIN-REZEPTOR
.
7
1.3.3
CGRP
(YYCALCITONIN-GENE-RELATED
PEPTIDE
"
)
.
8
1.3.4
CGRP-REZEPTOR
.
9
1.3.5
AMYLIN
.
9
1.3.6
AMYLIN-REZEPTOR
.
9
1.3.7
ADRENOMEDULLIN
.
9
1.3.8
ADRENOMEDULLIN-REZEPTOR
.
10
1.4
G-PROTEIN-GEKOPPELTE
REZEPTOREN
.
10
1.5
DIE
ROLLE
VON
CATS-L/RAMP-1
.
11
1.6
VORARBEITEN
.
11
1.7
ZIELE
DER
ARBEIT
.
14
II
INHALTSVERZEICHNIS
2
MATERIAL
UND
METHODEN
15
2.1
BEZUGSQUELLENNACHWEIS
.
15
2.1.1
CHEMIKALIEN
.
15
2.1.2
ENZYME
.
17
2.1.3
RADIOCHEMIKALIEN
.
17
2.1.4
FILTER,
YYKITS
"
UND
SONSTIGES
VERBRAUCHSMATERIAL
.
18
2.1.5
GERAETE
.
19
2.2
MEDIEN
UND
PUFFER
.
20
2.2.1
MEDIEN
FUER
ESCHERICHIA
COLI
BAKTERIEN
.
20
2.2.2
ZELLKULTURMEDIEN
.
21
2.2.3
STAMMLOESUNGEN
UND
PUFFER
.
22
2.3
BAKTERIENSTAEMME,
ZELLINIEN
UND
ANTIKOERPER
.
26
2.3.1
BAKTERIENSTAEMME
.
26
2.3.2
ZELLINIEN
.
27
2.3.3
ANTIKOERPER
.
27
2.3.4
VEKTOREN
UND
VERWENDETE
OLIGONUKLEOTIDE
.
31
2.4
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.
33
2.4.1
PLASMIDPRAEPARATION
FUER
ANALYTISCHE
ZWECKE
.
33
2.4.2
PLASMIDPRAEPARATION
FUER
PRAEPARATIVE
ZWECKE
.
34
2.4.3
ENZYMATISCHE
BEHANDLUNG
VON
DNS
.
35
2.4.4
AUFTRENNUNG
VON
DNS-FRAGMENTEN
IM
AGAROSE-GEL
.
36
2.4.5
ISOLIERUNG
VON
DNS-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSE-GELEN
.
36
2.4.6
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
E.
COLI
BAKTERIEN
.
36
2.4.7
TRANSFORMATION
KOMPETENTER
E.
COLI
BAKTERIEN
.
37
2.4.8
SEQUENZIERUNG
.
37
2.4.9
PRAEPARATION
VON
RNS
.
38
2.4.10
ELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
RNS
.
38
2.4.11
TRANSFER
VON
RNS
AUF
NYLONMEMBRANEN
-
YYNORTHERN
BLOT
"
.
38
2.4.12
DETEKTION
SPEZIFISCHER
MRNS
(YYHYBRIDISIERUNG
"
)
.
39
2.4.13
CDNS-SYNTHESE
.
40
2.4.14
AMPLIFIZIERUNG
VON
DNS-STUECKEN
DURCH
PCR
.
41
2.4.15
SEMIQUANTITATIVER
NACHWEIS
VON
RNS
DURCH
REVERSE
TRANSKRIPTASE
POLYMERASEKETTENREAKTION
(RT-PCR)
.
41
2.4.16
GEWINNUNG
EINES
GENOMISCHEN
KLONS
.
42
2.4.17
GEWINNUNG
VON
CHROMOSOMALER
DNS
AUS
ES-ZELLEN
.
43
2.4.18
TRANSFER
VON
DNS
AUF
NYLONMEMBRANEN
-
YYSOUTHERN
BLOT
"
.
43
INHALTSVERZEICHNIS
III
2.4.19
DETEKTION
SPEZIFISCHER
DNS-BANDEN
(YYHYBRIDISIERUNG
"
)
.
44
2.5
ZELLBIOLOGISCHE
METHODEN
.
46
2.5.1
ALLGEMEINE
ZELLKULTURTECHNIKEN
.
46
2.5.2
MYKOPLASMENTEST
.
46
2.5.3
TRANSIENTE
TRANSFEKTION
VON
REPORTERZELLEN
.
47
2.5.4
HERSTELLUNG
STABILER
LINIEN
NACH
ELEKTROPORATION
.
48
2.5.5
HERSTELLUNG
STABILER
GP+E-86
ZELLEN
ZUR
PRODUKTION
ECOTROPER
VIREN
48
2.5.6
YYENZYME-LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
"
(ELISA)
.
50
2.5.7
ADHAESIONSASSAY
.
50
2.5.8
NACHWEIS
VON
CAMP
.
51
2.5.9
DURCHFLUSSZYTOMETRIE:
YYFLUORESCENCE
ACTIVATED
CELL
SORTING
"
(FACS)
.
.
51
2.5.10
AUFTRENNUNG
VON
B
UND
T-ZELLEN
AUS
DER
MILZ
MIT
MAGNETISCHEN
YYBEADS
"
.
52
2.6
PROTEINANALYTISCHE
METHODEN
.
52
2.6.1
AUFREINIGUNG
VON
IG-FUSIONSPROTEINEN
.
52
2.6.2
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
.
53
2.6.3
TRANSFER
VON
PROTEINEN
AUF
NITROZELLULOSE
-
YYWESTERN
BLOT
"
.
54
2.6.4
DETEKTION
VON
PROTEINEN
.
55
3
ERGEBNISSE
57
3.1
SPEZIFITAET
DER
CATS-1
INDUZIERTEN
ZELLADHAESION
.
58
3.1.1
ADHAESIONSASSAYS
MIT
VERSCHIEDENEN
ZELLINIEN
.
58
3.1.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
VERSCHIEDENEN
ZELLINIEN
.
60
3.2
STRUKTURELLE
CHARAKTERISIERUNG
VON
CATS-1
.
62
3.3
CATS-1
ALS
BESTANDTEIL
DES
CGRP-REZEPTORS
.
64
3.4
LB-ZELLEN
EXPRIMIEREN
EINEN
FUNKTIONELLEN
CGRP-REZEPTOR
.
65
3.5
DE
NOVO
EXPRESSION
EINES
FUNKTIONELLEN
CGRP-REZEPTORS
.
66
3.5.1
HERSTELLUNG
REKOMBINANTER
RETROVIREN
.
67
3.5.2
TITERBESTIMMUNG
DER
VERWENDETEN
RETROVIREN
.
67
3.5.3
RETROVIRALE
EXPRESSION
VON
CATS-1
IN
NIH
3T3
ZELLEN
.
68
3.5.4
EXPRESSION
VON
MCRLR
IN
NIH
3T3/CATS-1
ZELLEN
.
69
3.6
EXPRESSIONSANALYSE
VON
CATS-1
UND
CRLR
IN
VERSCHIEDENEN
GEWEBEN
.
71
3.6.1
EXPRESSION
VON
CATS-1
IN
MURINEN
GEWEBEN
.
71
3.6.2
EXPRESSION
VON
RAMP-1
IN
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
.
74
3.6.3
EXPRESSION
VON
CATS-1
IN
MURINEN
B
UND
T-LYMPHOM-ZELLINIEN
.
.
75
3.6.4
EXPRESSION
VON
CRLR
IN
MURINEN
GEWEBEN
.
75
IV
INHALTSVERZEICHNIS
3.6.5
EXPRESSION
VON
CRLR
IN
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
.
78
3.6.6
EXPRESSION
VON
CRLR
IN
MURINEN
B
UND
T-ZELL-LYMPHOM-ZELLINIEN
.
79
3.6.7
ZUSAMMENFASSUNG
DER
EXPRESSIONSDATEN
.
80
3.7
EXPRESSION
VON
ADHAESIONSMOLEKUELEN
UND
CHEMOKINREZEPTOREN
.
83
3.7.1
REGULATION
DER
EXPRESSION
VON
ADHAESIONSMOLEKUELEN
.
83
3.7.2
REGULATION
DER
EXPRESSION
VON
CHEMOKINREZEPTOREN
.
85
3.8
GENOMISCHE
STRUKTUR
DES
CATS-1
GENORTES
.
86
3.8.1
CHARAKTERISIERUNG
DES
BAC-KLONS
21238
.
88
3.8.2
KLONIERUNG
DES
REKOMBINATIONSVEKTORS
.
90
4
DISKUSSION
95
4.1
CATS-1
ALS
NEUROPEPTID-REZEPTOR
.
96
4.2
FUNKTION
DES
CGRP-REZEPTORS
IM
IMMUNSYSTEM
.
98
4.3
SIGNALTRANSDUKTION
NACH
CGRP-BINDUNG
.
100
4.4
ROLLE
VON
CATS-1
IN
DER
ADHAESION
.
101
4.5
CGRP-REZEPTOR-EXPRESSION
.
104
4.6
FUNKTIONALE
INAKTIVIERUNG
DES
CGRP-REZEPTORS
.
107
5
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
109
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
111
LITERATURVERZEICHNIS
115 |
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