Injektion des Phosphataseinhibitors Okadainsäure in den Nucleus basalis Meynert der Ratte: Entwicklung eines Tiermodelles für die Alzheimersche Erkrankung
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1999
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II
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
A. BIBLIOGRAPHISCHE ANGABEN I
B. INHALTSVERZEICHNIS II
C'. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS V
1. EINLEITUNG 1
1.1 EPIDEMIOLOGIE, RISIKOFAKTOREN UND AETIOLOGIE DER ALZHEIMERSCHEN
ERKRANKUNG 1
1.2 NEUROPATHOLOGIE DER ALZHEIMERSCHEN ERKRANKUNG 3
1.2.1 NEUROPATHOLOGISCHE BEFUNDE UND KORRELATE DER ALZHEIMERSCHEN
ERKRANKUNG 3
1.2.2 THERAPEUTISCHE ANSAETZE 4
1.2.3 DAS NEURONALE ZYTOSKELETT 5
1.2.4 NEUROFIBRILLENBUENDEL UND PAARIG HELIKALE FILAMENTE (PHF)-TAU 6
1.2.5 NEUROFILAMENTE UND IHRE BEDEUTUNG FUER NEURODEGENERATIVE PROZESSE 7
1.2.6 SS-AMYLOID PRAEKURSOR PROTEIN UND SS-AMYLOID-PEPTID - AMYLOIDOSE 8
1.2.7 ROLLE DER GLIAZELLEN IN DER ALZHEIMERSCHEN ERKRANKUNG 9
1.3 HYPERPHOSPHORYLIERUNG UND ALZHEIMERSCHE ERKRANKUNG 10
1.4 DER ZUSAMMENHANG ZWISCHEN VORGAENGEN DER HYPERPHOSPHORYLIERUNG, 11
DER NFT-BILDUNG UND AMYLOIDOSE
1.5 TIERMODELLE FUER DIE ALZHEIMERSCHE ERKRANKUNG 12
1.5.1 OKADAINSAEURE 16
2 AUFGABENSTELLUNG 18
3 MATERIAL UND METHODEN 19
3.1 MATERIAL 19
3.1.1 PRIMAERE UND SEKUNDAERE ANTIKOERPER 19
3.1.2 WEITERE CHEMIKALIEN 19
3.1.3 PUFFER 19
3.2 VERSUCHSTIERE 19
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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III
3.3 GERAETE UND VERBRAUCHSMITTEL 21
3.4 METHODEN 21
3.4.1 DURCHFUEHRUNG DER OKADAINSAEUREAPPLIKATION 21
3.4.2 FIXIERUNG UND ENTNAHME DER GEHIRNE 23
3.4.3 ANFERTIGUNG DER PRAEPARATE 24
3.4.3.2 INAKTIVIERUNG DER ENDOGENEN PEROXIDASEAKTIVITAET 24
3.4.3.3 MASKIERUNG UNSPEZIFISCHER BINDUNGSSTELLEN 25
3.4.3.4 INKUBATION MIT DEN PRIMAEREN ANTIKOERPERN 25
3.4.3.5 B
4-ISOLEKTINBINDUNG 26
3.4.3.6 INKUBATION MIT DEN SEKUNDAEREN ANTIKOERPERN 26
3.4.3.7 INKUBATION MIT EXTRAVIDIN -PEROXIDASE 26
3.4.3.8 REAKTION MIT DAB-LOESUNG 27
3.4.3.9 GEVVEBSSCHNITTE UND EINDECKEN DER OBJEKTTRAEGER 27
3.5 AUSWERTUNG 27
3.6 KONTROLLEN 28
4 ERGEBNISSE 29
4.1 BEURTEILUNGSKRITERIEN 29
4.2 VERLAUF DES EINSTICHKANALS 30
4.3 ANTIKOERPER ZUR DARSTELLUNG MIKROTUBULI-ASSOZIIERTER PROTEINE 31
4.3.1 ANTI-MAP2-ANTIKOERPER ZUR DARSTELLUNG DES MIKROTUBULI-ASSOZIIERTEN
31
PROTEINS 2
4.3.2 ANTIKOERPER TAU-1 ZUR DARSTELLUNG EINES TAUPROTEIN-EPITOPES 34
4.3.3 ANTIKOERPER TAU-2 ZUR DARSTELLUNG EINES TAUPROTEIN-EPITOPES 35
4.4 NEUROFILAMENTE MARKIERENDE ANTIKOERPER 35
4.5 ANTIKOERPER GEGEN DAS AMYLOID-VORLAEUFER-PROTEIN 44
4.6 ANTI-SSA4-PEPTID ANTIKOERPER 46
4.7 ANTI-GFAP-ANTIKOERPER ZUR DARSTELLUNG VON ASTOGLIA 46
4.8. B
4
-ISOLEKTIN-BINDUNG ZUR DARSTELLUNG VON MIKROGLIA 49
4.9 DARSTELLUNG DER VON PATHOLOGISCHEN VERAENDERUNGEN BETROFFENEN AREALE
50
4.10 ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE 51
IV
5 DISKUSSION 53
5.1 VERWENDUNG PRIMAERER ANTIKOERPER 53
5.2 OKADAINSAEURE 54
5.3 PBS VERSUS DMSO ALS TRAEGERSUBSTANZ FUER OKADAINSAEURE 55
5.4 PHOSPHATASEN 57
5.5 VERAENDERUNGEN AN MIKROTUBULI-ASSOZIIERTEN PROTEINEN 58
5.6 NEUROLLLAMENTANTIKOERPER UND TAUPROTEIN 61
5.7 VERAENDERUNGEN AN NEUROFILAMENTEN 64
5.8 DIE RAEUMLICHE VERTEILUNG VON VERAENDERUNGEN 68
5.9 APP UND SS-AMYLOIDPEPTID 70
5.10 VERAENDERUNGEN AN ASTROZYTEN 72
5.11 ZUSAMMENFASSUNG DER DISSKUSSION UND SCHLUSSFOLGERUNGEN 73
6 ZUSAMMENFASSUNG 76
7 LITERATURVERZEICHNIS 79
7.1 VERZEICHNIS EIGENER PUBLIKATIONEN 79
7.2 VERZEICHNIS ZITIERTER LITERATUR 80
ANHANG: DANKSAGUNG X
SELBSTAENDIGKEITSERKLAERUNG XX
LEBENSLAUF XXX |
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