Die Rolle des transformierenden Wachstumsfaktors TGF-bTGF-beta Typ 1 (transforming growth factor beta 1) in der Karzinogenese: nativer und rekombinanter Faktor im Vergleich
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1998
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG
1
1.1 INTERZELLULAERE KOMMUNIKATION
1
1.2 WACHSTUMSFAKTOREN
1
TGF-SS-SUPERFAMILIE 2
TGF-SS
A) GESCHICHTE DER ENTDECKUNG 2
B) VORKOMMEN
3
C) TGF-SS-STRUKTUR UND BILDUNG
3
D) TGF-SS-AKTIVIERUNG
5
E) TGF-SS-REZEPTOREN UND MOEGLICHE SIGNALTRANSDUKTION 5
F) TGF-SS-AKTIVITAET
7
G) TGF-SS-EINFLUSS AUF KRANKHEITEN UND MOEGLICHE THERAPIEANSAETZE 8
1.3 PRAEPARATIVER TGF-SS ZEIGT PROKARZINOGENE EIGENSCHAFTEN 9
PRAEPARATIVER TGF-SS ALS TUMORPROMOTOR 9
PRAEPARATIVER TGF-SS KANN RATTENFIBROBLASTEN STABIL TRANSFORMIEREN 10
1.4 DIREKTE UND INDIREKTE ANTIKARZINOGENE EIGENSCHAFTEN VON PRAEPARATIVEM
10
TGF 0
ELIMINATION: TRANSFORMIERTE FIBROBLASTEN GEHEN IN GEGENWART VON TGF-SS
(PRAEPARATIVER FAKTOR) INDUZIERTEN NORMALEN ZELLEN IN APOPTOSE 10
INTERFERENZ ZUR ELIMINATION 13
1.5 ZIEL DER ARBEIT 13
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2
MATERIAL 15
2.1 FIBROBLASTEN-ZELLINIEN
NICHT TRANSFORMIERTE UND TRANSFORMIERTE FIBROBLASTEN 15
2.2 LYMPHOIDE ZELLEN
NICHT TRANSFORMIERTE UND TRANSFORMIERTE LYMPHOZYTEN 16
23
KULTURBEDINGUNGEN:
FIBROBLASTENKULTUR; KULTUR DER LYMPHOIDEN ZELLEN 16
2.4 MEDIEN
17
KULTURMEDIEN (EMEM. KM, RPMI)
17
MEDIUM UND VORGEHEN BEIM EINFRIEREN VON ZELLEN 18
2.5 STAMMLOESUNGEN ( AGAROSE, ELVANOL, FKS, GIEMSA, NATRIUMSULFIT, PBS )
18
2.6 ANTIKOERPER FUER DIE INDIREKTE IMMUNFLUORESZENZ _
19
2.7 FAKTOREN 20
TRANSFORMING GROWTH FACTOR
(TGF-SS) (PRAEPARATIVER UND REKOMBINANTER FAKTOR)
EPIDERMAL GROWTH FACTOR
(EGF) 21
EBV-INDUKTIONSLOESUNGEN (IODDESOXYURIDIN, I UDR) 21
2.8 PLASTIKMATERIAL 21
2.9 GLASMATERIAL 22
2.10 ZAEHLKAMMER 22
2.11 MIKROSKOPE, FOTOMATERIAL UND KAMERAS 22
3 METHODEN 23
3.1 EA- UND VCA-INDUKTION
INDIREKTE IMMUNFLUORESZENZ 23
3.2
TRANSFORMATION UNTERSUCHUNG IM SEMISOLIDEN MEDIUM 24
3.3 TUMORPROMOTION
UV-LICHT-INITIATION UND TUMORPROMOTION
IM EINSCHICHTIGEN ZELLRASEN 25
3.4
ELIMINATION KLONALE UEBERSCHICHTUNG (PLAQUEASSAY) 25
ETHANOLFIXIERUNG UND GIEMSAFAERBUNG 26
4
ERGEBNISSE
27
4.1 TGF-SSL-AKTIVITAET BEI EPSTEIN-BARR-VIRUS (EBV)-POSITIVEN LYPHOIDEN
ZELLEN 27
- INDUKTION DER EXPRESSION FRUEHER EBV-ANTIGENE ( EA) DURCH REKOMBINANTEN
TGF-SSL ( RAJI-ZELLEN ) 27
- INDUKTION DER EA- UND VCA-EXPRESSION BEI EB3-ZELLEN 30
4.2 EINFLUSS VON TGF-SSL AUF FIBROBLASTEN
3 ]
A) PROKARZINOGENE TGF-SSL-AKTIVITAET
31
- REKOMBINANTER TGF-SSL UND EGF PRAEGEN NORMALEN RATTENFIBROBLASTEN DER
LINIE
NRK 536 REVERSIBEL DEN TRANSFORMIERTEN PHAENOTYP AUF 31
- DIE AUSPRAEGUNG DES TRANSFORMIERTEN PHAENOTYPS IST VON DER ZELLDICHTE IM
SEMISOLIDEN MEDIUM ABHAENGIG 32
- STABILE TRANSFORMATION VON RATTENFIBROBLASTEN DER LINIE NRK 536 DURCH
REKOMBINANTEN TGF-SSL 35
- REKOMBINANTER TGF-SSL IST EIN STUFE-I-TUMORPROMOTOR 38
B) ANTIKARZINOGENE TGF-SSL-AKTIVITAET
41
- TRANSFORMIERTE FIBROBLASTEN WERDEN IN GEGENWART VON TGF-SSL UND
NORMALEN
FIBROBLASTEN ELIMINIERT 41
- ELIMINATION FINDET AUCH ZWISCHEN ARTFREMDEN ZELLEN STATT 43
C) DIFFERENZIERUNG UND PROLIFERATION DURCH TGF-SSL
45
- EINFLUSS VON REKOMBINANTEM TGF-SSL AUF DIE DIFFERENZIERUNG VON
C3H-FIBRO-
BLASTEN 45
- REKOMBINANTER TGF-SSL HEMMT DIE PROLIFERATION VON C3H-FIBROBLASTEN 47
-TGF-SSL UND DIE DIFFERENZIERUNG VON TRANSFORMIERTEN FIBROBLASTEN 48
5
DISKUSSION 50
5.1 PRAEPARATIVES HUMANES EIF/TGF-SS-ISOLAT UND REKOMBINANTER HUMANER
TGF-SSL ZEIGTEN EIN VERGLEICHBARES REAKTIONSMUSTER 50
5.2 TGF-SSL-AKTIVITAET BEI LYMPHOMZELLEN
- EA-INDUKTION ALS NACHWEIS VON TGF-SS-KONZENTRATIONEN IN UEBERSTAENDEN 50
5.3 TGF-SSL UND FIBROBLASTEN
A) PROKARZINOGENE WIRKUNGEN
5J
- RATTENFIBROBLASTEN DER LINIE NRK 536 NEHMEN IM SEMISOLIDEM MEDIUM IN
GEGENWART VON TGF-SSL UND EGF DEN TRANSFORMIERTEN PHAENOTYP AN. 51
- TGF-SSL KANN NRK 536-FIBROBLASTEN DOSISABHAENGIG STABIL TRANSFORMIEREN.
52
- TGF-SSL KANN DOSISABHAENGIG ALS TUMORPROMOTOR DURCH UV-LICHT BEHANDELTE
NORMALE MAEUSEFIBROBLASTEN DER LINIE C3H 10 T 1/2 C18 TRANSFORMIEREN 53
B) ANTIKARZINOGENE WIRKUNGEN
54
- TGF-SSL INDUZIERT DIE ELIMINATION TRANSFORMIERTER FIBROBLASTEN DURCH
NICHT
TRANSFORMIERTE FIBROBLASTEN 54
- TGF-SSL ALS DIFFERENZIERUNGSFAKTOR 54
- RESISTENZ VOR ELIMINATION DURCH POSTMITOTISCHEN ZUSTAND
TRANSFORMIERTER ZELLEN 55
5.4 UEBERTRAGUNG DER ERGEBNISSE AUF
IN VIVO
- VERHAELTNISSE UND BIOLOGISCHE
SIGNIFIKANZ DER ERMITTELTEN ZUSAMMENHAENGE 56
A) TGF-SSL INDUZIERT BEI EBV-POSITIVEN LYMPHOMLINIEN DIE EXPRESSION
FRUEHER
EBV-ANTIGENE ( EA UND /ODER VCA ) 55
B) TGF-SSL ALS PROKARZINOGENER FAKTOR
IN VIVO 56
C) TGF-SSL ALS ANTIKARZINOGENER FAKTOR
IN VIVO 57
D) VERKNUEFUNG VON PROKARZINOGENEN UND ANTIKARZINOGENEN
TGF-SSL-EIGENSCHAF- 58
TEN
DIFFERENZIERTE TRANSFORMIERTE ZELLEN WERDEN NICHT ELIMINIERT
58
6
ZUSAMMENFASSUNG 59
7 LITERATUR
60
ANHANG
VERWENDETE SYMBOLE UND ABKUERZUNGEN
DANK
LEBENSLAUF
85 |
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