Der Einfluß von Neoglykoproteinen auf die Megakaryozyten-abhängige Fibroblastenproliferation im normalen menschlichen Knochenmark: eine In-vitro-Studie
Gespeichert in:
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1999
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
MIKROENVIRONMENT
KNOCHENMARK
1
1.1.1.
DIE
ROLLE
DER
STROMAZELLEN
IM
MIKROMILIEU
2
1.1.2.
MEGAKARYOZYTEN
IM
HAEMATOPOIETISCHEN
SYSTEM
4
1.1.3.
REGULATIONSMECHANISMEN
IN
ZELL-INTERAKTIONS-PROZESSEN
5
1.1.3.1.
HUMORALE
FAKTOREN
6
1.1.3.2.
CYTOKINE
UND
WACHSTUMSFAKTOREN
7
1.1.3.3.
ZELL-ZELL-KOMMUNIKATION
8
1.1.3.4.
ZELL-MATRIX-KOMMUNIKATION
9
1.2.
INTERAKTIONSMECHANISMEN
IM
KNOCHENMARK
10
1.2.1.
KOHLENHYDRATSTRUKTUREN
10
1.2.2.
GLYKOLISIERTE
REZEPTOREN
UND
MEMBRANGEBUNDENE
LIGANDEN
12
1.2.3.
LEKTINE
12
1.2.4.
ADHAESIONSMOLEKUELE
14
1.2.4.1.
SELEKTINE
14
1.2.4.2.
ANDERE
ADHAESIONSMOLEKUELE
16
13.
MEGAKARYOZYTEN
UND
FIBROBLASTEN
19
1.3.1.
BETRACHTUNGEN
ZUM
STROMA
BEI
INTERAKTIONSPROZESSEN
19
1.3.2.
DER
EINFLUSS
VON
WACHSTUMSFAKTOREN
AUF
DIE
INTERAKTION
20
1.3.3.
ENDOGENE
LEKTINE
UND
KOHLENHYDRATSTRUKTUREN
AUF
MEGAKARYOZYTEN
21
1.3.4.
ENDOGENE
LEKTINE
UND
KOHLENHYDRATSTRUKTUREN
AUF
FIBROBLASTEN
23
1.4.
AUSSAGEN
ZUR
MYELOFIBROSE
BEI
CHRONISCH
MYELOPROLIFERATIVEN
ERKRANKUNGEN
-
MIT
BESONDERER
BERUECKSICHTIGUNG
DER
MEGAKARYOZYTEN
24
1.4.1.
CHRONISCH
MYELOPROLIFERATIVE
ERKRANKUNGEN
(CMPE)
24
1.4.1.1.
POLYCYTHAEMIA
RUBRA
VERA
(P.VERA)
26
1.4.1.2.
OSTEOMYELOFIBROSE
(OMF)
/IDIOPATHISCHE
MYELOFIBROSE
(IMF)
27
1.4.1.3.
PRIMAER
(ESSENTIELLE
HAEMORRHAGISCHE)
THROMBOZYTHAEMIE
(PTH)
28
1.4.1.4.
CHRONISCHE
MYELOISCHE
LEUKAEMIE
(CML)
29
1.5.
FRAGESTELLUNG
30
2.
MATERIAL
UND
METHODE
31
2.1.
KNOCHENMARKGEWINNUNG
31
2.2.
KNOCHENMARKAUFBEREITUNG
31
2.3.
MEGAKARYOZYTENANREICHERUNG
32
2.3.1.
PERCOLLDICHTEGRADIENTENZENTRIFUGATION
33
2.3.2.
MAGNETISCH
AKTIVIERTE
ZELLSORTIERUNG
(MACS)
34
2.4.
AUFREINIGUNG
VON
FIBROBLASTEN
37
2.4.1.
ISOLIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
VON
KNOCHENMARKFIBROBLASTEN
37
2.4.2.
FIBROBLASTENCHARAKTERISIERUNG
37
2.5.
ZELL-ZELL-INTERAKTIONSSTUDIEN
38
2.5.1.
PROLIFERATIONSSTUDIEN
38
2.5.1.1.
BASALPROLIFERATION
39
2.5.1.2.
KONTROLLEN
39
2.5.1.3.
INTERAKTIONSSTUDIEN
MIT
NEOGLYKOPROTEINEN
39
2.5.1.4.
KONZENTRATIONSABHAENGIGE
INTERAKTIONSSTUDIEN
40
2.5.2.
ADHAESIONSEXPERIMENTE
40
2.6.
AUFREINIGUNGSKONTROLLEN
41
2.6.1.
ZYTOSPINPRAEPARATE
41
2.6.2.
IMMUNZYTOCHEMISCHE
FAERBUNG
41
2.6.3.
FACSCAN-ANALYSE
42
2.7.
AUSWERTUNG
DER
VERSUCHE
43
2.7.1.
FIBROBLASTENWACHSTUMSINDEX
(FWI)
43
2.7.2.
VITALITAETSNACHWEIS
DER
MEGAKARYOZYTEN
43
2.8.
STATISTIK
43
2.9.
MATERIALLISTE
44
3.
ERGEBNISSE
47
3.1.
MEGAKARYOZYTENGEHALT
47
3.2.
AUSSAGEN
ZUR
VITALITAET
DER
MEGAKARYOZYTEN
47
3.3.
PROLIFERATIONSSTUDIEN
50
3.3.1.
FIBROBLASTENWACHSTUM
OHNE
CD61
+
-ZELLEN
50
3.3.2.
FIBROBLASTENWACHSTUM
MIT
CD61
-
-ZELLEN
50
3.3.3.
FIBROBLASTENWACHSTUM
MIT
CD61
+
-ZELLEN
50
3.4.
INTERAKTIONSSTUDIEN
MIT
CD61
+
-ZELLEN
UND
FIBROBLASTEN
50
3.4.1.
BASALPROLIFERATION
50
3.4.2.
PROLIFERATIONSASSAYS
MIT
0.01%
NEOGLYKOPROTEIN
IN
25%
FCS-HALTIGEM
MEDIUM
51
3.4.3.
PROLIFERATIONSASSAYS
MIT
0.01%
NEOGLYKOPROTEIN
IN
SERUMREDUZIERTEM
MEDIUM
55
3.4.4.
PROLIFERATIONSASSAYS
MIT
0.001%
NEOGLYKOPROTEIN
IN
25%
FCS-HALTIGEM
MEDIUM
55
3.5.
ADHAESIONSASSAYS
MITTELS
IMMUNFLUORESZENZ
56
4.
DISKUSSION
60
4.1.
METHODIK
60
43.
EINFLUSS
VON
MEGAKARYOZYTEN
AUF
DIE
PROLIFERATION
VON
KNOCHENMARKFIBROBLASTEN
60
4.2.1.
BEDEUTUNG
DES
ZELL-ZU-ZELLKONTAKTES
ZWISCHEN
MEGAKARYOZYTEN
UND
FIBROBLASTEN
62
43.
FAERBUNG
MIT
NEOGLYKOPROTEINEN
63
4.4.
EINFLUSS
VON
KOHLENHYDRATEN
AUF
EINE
DIREKTE
ZELL-ZU-ZELLADHAESION
65
4.4.1.
BEIDSEITIGE
BLOCKIERUNG
65
4.4.2.
EINSEITIGE
BLOCKIERUNG
66
43.
ABSCHLIESSENDE
BETRACHTUNG
67
4.6.
AUSBLICK
68
5.
ZUSAMMENFASSUNG
70
6.
LITERATURVERZEICHNIS
72
7.
ERKLAERUNG
ZUR
VORABVEROFFENTLICHUNG
VON
ERGEBNISSEN
100
8.
ANHANG:
TABELLEN
101
9.
LEBENSLAUF
114 |
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