Nachweis des 5-Lipoxygenase Stoffwechselwegs in Langerhans-Zellen der normalen humanen Epidermis und Dendritischen Zellen von Lymphknoten:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1999
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INHALTSVERZEICHNIS
I
EINLEITUNG
1.1.
GRUNDLAGEN
DES
ARACHIDONSAEURESTOFFWECHSELS,
VORKOMMEN
UND
STOFFWECHSELWEGE
VON
LIPOXYGENASEN
UND
ASSOZIIERTER
ENZYME
.
1
1.2.
BIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
VON
LEUKOTRIENEN
(LT)
.
11
1.3.
AUFBAU,
FUNKTION
UND
PATHOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
DER
HUMANEN
EPIDERMIS
.
15
1.4.
DAS
DENDRITISCHE
ZELLSYSTEM
.
20
1.5.
AUFGABENSTELLUNG
.
26
II
MATERIALIEN
UND
METHODEN
2.1.
GEWEBE
.
27
2.1.1
KRYOPRAESERVATION
VON
GEWEBEN
.
28
2.1.2.
GEWEBEISOLIERUNG
DURCH
HITZETRENNUNG
UND
MIKRODISSEKTION
VON
GE&IERSCHNITTEN
.
28
2.2.
ZELLEN
.
30
2.2.1.
ZELLKULTIVIERUNG
.
30
2.2.2.
GEWINNUNG
VON
LEUKOZYTEN
("BUFFY-COATS")
AUS
VOLLBLUT
.
31
2.3.
RNA
.
31
2.3.1.
RNA
GEWINNUNG
AUS
GEWEBEN
UND
ZELLEN
.
31
2.3.2.
RT-PCR
(REVERSE-TRANSCRIPTASE
POLYMERASE-CHAIN-REACTION)
.
33
2.3.3.
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
(ISH)
.
37
2.3.4.
NORTHEM-BLOTTING
.
47
2.4.
PROTEINBIOCHEMISCHE
VERFAHREN
.
48
2.4.1.
PROTEINEXTRAKTION
.
48
2.4.2.
ZYTOSKELETTPRAEPARATION
AUS
HACAT
ZELLEN
UND
EPIDERMALEM
STRATUM
COMEUM
.
49
2.4.3.
ADSORPTION
POLYKLONALER
5-LIPOXYGENASE
(5-LO)
ANTISEREN
AN
ZYTOSKELETTPRAEPARATIONEN
.
51
2.4.4.
KOMPETITION
DER
5-LO
ANTISEREN
MIT
REKOMBINANTER
5-LO
.
52
2.4.5.
WESTEM-BLOTTING
.
52
2.4.6.
INDIREKTE
IMMUNHISTOCHEMIE
.
54
2.4.7.
KONFOKALE
LASERSCAN
MIKROSKOP
(CLSM,
CONFOCAL
LASER
SCAN
MICROSCOPY).
59
INHALTSVERZEICHNIS
III
ERGEBNISSE
3.1.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
EXPRESSION
DER
KONSTITUENTEN
DES
5-LO
STOFFWECHSELWEGS
UND
DES
LEUKOTRIENB
4
-REZEPTORS
(LTB4-R)
IN
DER
NORMALEN
HUMANEN
EPIDERMIS
.
61
3.1.1.
RT-PCR ANALYSE
DER
MRNA
VON
5-LO,
FUENF-LIPOXYGENASE-AKTIVIERENDES
PROTEIN
(FLAP),
LTAI-HYDROLASE
(LTA4-H),
LTC
4
-SYNTHASE
(LTC4-S)
UND
LTB4
R
IN
DER
EPIDERMIS
.
61
3.1.2.
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
(ISH)
.
70
3.I.2.I.
NACHWEIS
DER
SPEZIFITAET
DER
5-LO
ANTISENSE
SONDEN
.
71
3.1.2.2.
DARSTELLUNG
DER
5-LO
MRNA
EXPRIMIERENDEN
ZELLEN
DURCH
ISH
AN
EPIDERMALEN
GEFRIERSCHNITTEN
.
74
3.1.3.
VERGLEICH
DER
MRNA
EXPRESSION
ZWISCHEN
ISOLIERTEN
LANGERHANS
ZELLEN
(LZ),
VON
LZ
ABGEREICHERTEN
EPIDERMALEN
ZELLEN
(AEZ)
UND
HUMANEN
LEUKOZYTEN
(YYBUFIY
COAT
"
)
.
78
3.1.4.
IDENTIFIKATION
DER
5-LO
EXPRIMIERENDEN
ZELLEN
DURCH
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
AN
GEFRIERSCHNITTEN
DER
EPIDERMIS
.
80
3.1.4.1.
CHARAKTERISIERUNG
DER
5-LO
POSITIVEN
ZELLEN
DER
EPIDERMIS
DURCH
DOPPELMARKIERUNGEN
MIT
ZELLSPEZIFISCHEN
ANTIKOERPERN
.
82
3.1.5.
CLSM
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
INTRAZELLULAEREN
LOKALISATION
DES
5-LO
PROTEINS
IN
LZ
IN
SITU
.
86
3.1.6.
WESTERN-BLOT
ANALYSE
VON
EPIDERMALEN
ZELLEN
(EZ),
LZ
UND
AEZ
.
89
3.1.6.1.
WES
TEM-BLO
T
ANALYSE
MIT
ANTISEREN
GEGEN
5-LO,
FLAP
UND
LT
A4
H
.
89
3.1.7.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
DER
5-LO
EXPRESSION
UND
DER
ANDEREN
KONSTITUENTEN
DES
5-LO
STOFLWECHSELWEGS
BETEILIGTEN
ENZYME
IN
DER
HUMANEN
EPIDERMIS
.
91
3.2.
5-LO
EXPRESSION
IN
DENDRITISCHEN
ZELLEN
(DZ)
NORMALER
HUMANER
LYMPHKNOTEN
.
92
3.2.1.
DARSTELLUNG
DER
5-LO
MRNA
POSITIVEN
ZELLEN
IN
LYMPHKNOTEN
DURCH
ISH
.
92
3.2.2.
IMMUNHISTOLOGISCHE
ANALYSE
DER
5-LO
EXPRIMIERENDENDZ
IN
LYMPHKNOTEN.
94
3.2.3.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
UEBER
5-LO
EXPRIMIERENDE
DZ
VON
LYMPHKNOTEN
.
99
IV
DISKUSSION
4.1.
EXPRESSION
DER
KONSTITUENTEN
DES
5-LO
STOFLWECHSELWEGS
UND
DES
LTB4-R
IN
DER
NORMALEN
HUMANEN
EPIDERMIS
.
100
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.1.
BEDEUTUNG
DER
5-LO
BEI
PATHOLOGISCHEN
VERAENDERUNGEN
DER
HUMANEN
EPIDERMIS
.
109
4.2.
5-LO
EXPRESSION
IN
DZ
VON
LYMPHKNOTEN
.
112
4.2.1.
HYPOTHETISCHE
MODELLE
EINER
ROLLE
DES
5-LO
STOFFWECHSELWEGS
INNERHALB
DES
DENDRITISCHEN
ZELLSYSTEMS
.
115
V
ZUSAMMENFASSUNG
.
118
VI
ABKIIRZUNGSVERZEICHNIS
.
121
VII
LITERATURVERZEICHNIS
.
123 |
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| topic_facet | Epidermis Stoffwechselweg Langerhans-Zelle Lymphknoten Dendritische Zelle Lipoxygenase 5- Hochschulschrift |
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